激光掃描共聚焦顯微鏡是目前生物學領域應用和圖像分辨率比較高的實驗儀器它是在熒光顯微鏡成像基礎上加裝了激光掃描裝置,利用計算機進行圖像處理,使用紫外或可見光激發(fā)熒光探針,從而得到細胞或**內部微細結構的熒光圖像 已成為形態(tài)學、分子細胞生物學、材料科學等諸多領域中有力的研究工具。激光掃描共聚焦顯微鏡主要由 1、光學顯微鏡部分 2、激光發(fā)射器 本院的LSCM使用三個激光器氬離子激光器 488nm 氦氖綠激光器543nm 氦氖紅激光器 633nm 這三個激光器可做三通道熒光標記 可使用絕大多數(shù)常見的綠、紅或遠紅外激發(fā) 3、掃描裝置 檢測***光柵、分光鏡、發(fā)射熒光分色器等 4、光檢測器 高靈敏度的光電倍增管(PMT) 電壓越高 則光信號轉換成的電信號越強 可將熒光圖像的強度按照0~255分級顯示 5、計算機系統(tǒng)(包括數(shù)據(jù)采集、處理、轉換、應用軟件) 6、圖像輸出設備六部分組成。 雙光子顯微鏡是怎么操作的？吉林生物顯微鏡廠家
1、動態(tài)連續(xù)掃描及三維圖像重組
LSCM可以對對活細胞或細胞切片樣品的不同層面進行連續(xù)
逐層掃描, 來獲得各個層面的圖像 即所謂的“無損傷的光學切片”。
LSCM掃描的每個層面之間的間距可以達到0.1um甚至更小。獲得的圖像
通過計算機重組 可獲得精細的細胞骨架、染色體、細胞器和細胞膜系
統(tǒng)的三維圖像 與普通光學顯微鏡獲得的圖像相比 LSCM所得的重組
三維圖像清晰度高、立體感強, 可通過計算機軟件對細胞內所研究的結
構進行各種測量 對細胞內的空間結構和某些物質在細胞內的定位方面
的研究中有應用。
2、同時多種物質標記
利用LSCM 通過對膜上、胞漿內多種物質的熒光標記 可以實現(xiàn)
在同一樣品上同時進行多重物質的觀察 比如檢測細胞內鈉、鈣、鎂等
離子濃度的比率及動態(tài)變化。 西藏顯微鏡質量推薦激光掃描共聚焦顯微鏡的規(guī)格。
首先我們從放大的倍數(shù)分析， 國產(chǎn)的金相顯微鏡放大倍數(shù)標的都是很大的， 有的都是幾千倍，
但是實際效果卻大不大這么大的倍數(shù)， 實際上的倍數(shù)頂多也就幾百倍， 然而進口的放大倍數(shù)
標的只有一千倍， 但是誤差卻很少， 這是一點， 另外我們從光學系統(tǒng)方面說， 光學系統(tǒng)是金
相顯微鏡的心臟， 國產(chǎn)有鏡片上的鍍膜標準是達不到的， 所以導致質量上也不達標， 和國際
標準相差很遠， 國產(chǎn)的一般都是有限的光學系統(tǒng)， 進口的卻是無限的光學系統(tǒng)； 從校正能力
上來分析， 國產(chǎn)金相顯微鏡也是無法比擬的， 分辨的能力懸殊也很大； 從使用壽命上來分析，
能夠長時間維持高清圖像質量的只有進口金相顯微鏡， 國產(chǎn)的使用壽命和進口的使用壽命相
差也很大； 售后服務方面進口的金相顯微鏡要比國產(chǎn)的好， 就像進口的奔馳汽車， 奔馳公司
可以開著飛機去給你免費維修， 當然光學產(chǎn)品沒有那么夸張， 但是服務態(tài)度遠遠高于國產(chǎn)金
相顯微鏡。
2． 為什么說雙光子顯微鏡一般不需要配備紫外激發(fā)激光器？
雙光子顯微鏡技術是建立在雙光子激發(fā)效應的基礎上的一種熒光激發(fā)技術： 熒光染料分子可以同時吸收低
能量的兩個光子而被激發(fā)（兩個光子到達熒光分子的時間間隔小于 1 飛秒） ， 其激發(fā)效果可以等同于吸收
一個 1/2 波長的高能量光子。 例如， 吸收兩個紅色波長的光子， 相當于一個吸收紫外的分子。 長波長的光
子不易被細胞吸收， 因此對活細胞的光毒性減少， 也降低了光漂白。 這樣即起到紫外激發(fā)的功能， 又避免
了紫外光線對樣品的傷害。 雙光子顯微鏡哪個牌子的好？
在傳統(tǒng)熒光顯微鏡中， 一個熒光團吸收一個光子， 該光子能量對應于
熒光團基態(tài)和激發(fā)態(tài)能量之差。 通過一個較短壽命的虛態(tài)， 也可以通過同
時吸收兩個較低能量（即更高的波長） 的光子激發(fā)熒光。 例如， 吸收兩個
紅色波長的光子， 可以激發(fā)一個吸收紫外的分子。 雙光子激發(fā)是一個非線
性過程， 對激發(fā)光強度有平方依賴關系。
使用單激發(fā)光源， 雙光子具有相同的波長， 該技術被稱為雙光子激發(fā)
熒光顯微術。 如果兩個光子具有不同的波長， 就稱作雙色激發(fā)熒光顯微術。
雙光子吸收幾率依賴于兩個入射光子在空間和時間上的重合程度（兩
個光子必須在 10－18 秒內到達）。 雙光子吸收截面很小， 對若丹明 B 一般
為 10－50cm4 s photon－1 molecule－1， 這樣， 只有在具有很大光子流量
的區(qū)域的熒光團才會被激發(fā)。 鈦寶石激光器等鎖模的， 高峰值功率激光可
以為雙光子激發(fā)提供足夠的強度。 激光掃描共聚焦顯微鏡的種類有哪些？湖南掃描探針顯微鏡生產(chǎn)廠家哪家好
在哪里可以買到雙光子顯微鏡？吉林生物顯微鏡廠家
電子顯微鏡的分辨率達0.1nm左右.因此亞微米數(shù)量級樣品的觀察一直主要靠電子顯微鏡.但電子顯微鏡結構復雜,且使用電子顯微鏡需要將樣品置于真空環(huán)境,這樣環(huán)境會迅速破壞必須在潮濕化學狀態(tài)上才能維持的全部生物活性,而且樣品容易受到高能電子束引起的輻射損傷.與之相比,光學顯微鏡具有結構簡單,操作方便,直觀,可以在自然狀態(tài)下觀察樣品,且對樣品無任何損傷等優(yōu)越性.但經(jīng)典光學顯微鏡受衍射的限制,分辨率不高,不能適應現(xiàn)代科學技術的發(fā)展.因而研究超**辨率光學顯微鏡具有重要意義. 吉林生物顯微鏡廠家
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