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來源: 發(fā)布時間:2024-12-22

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為了證明檢測極低濃度的可能診斷價值使用數(shù)字ELISA檢測血液中的蛋白質(zhì),對接受治理性前列腺切除術(shù)(RP)的患者血清樣本中的PSA進(jìn)行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標(biāo)志物病癥既用作篩查工具,也用于監(jiān)測住院患者的復(fù)發(fā)接受治理性前列腺切除術(shù)28。治理性前列腺切除術(shù)后,絕大多數(shù)PSA被消除,水平低于標(biāo)準(zhǔn)商用檢測方法的檢測限(3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測這些患者的PSA恢復(fù)情況可以檢測前列腺病的復(fù)發(fā),但術(shù)后幾年內(nèi)生化復(fù)發(fā)可能不會被發(fā)現(xiàn)。 芯棄疾單分子ELISA檢測盒,使用靈活開放,少于8孔即可測試,可使用客戶自研各用試劑!代理數(shù)字ELISA廠家

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    創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。循環(huán)血液轉(zhuǎn)化為~2×10?15M(或2飛摩爾,fM);早期HIV傳染血清中每mL含有10-3000個病毒顆粒,相當(dāng)于p24抗原濃度范圍為從50×10?18M(50attomolar,aM)到15×10?15M(15fM)10.嘗試開發(fā)能夠測量這些蛋白質(zhì)濃度的方法集中在蛋白質(zhì)上的核酸標(biāo)記復(fù)制,11,12或測量整體、結(jié)合標(biāo)記蛋白分子的性質(zhì)13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金納米顆粒和DNA生物條形碼的標(biāo)記物,已將蛋白質(zhì)的檢測范圍擴(kuò)展至低飛摩爾水平;更近使用該技術(shù)的一篇報道展示了檢測到10飛摩爾PSA插入物17。這些方法所達(dá)到的靈敏度然而,檢測蛋白質(zhì)仍然落后于核酸,如聚合酶鏈反應(yīng)(PCR),從而限制了蛋白質(zhì)組中具有已在血液中檢測到6,19。單個蛋白質(zhì)分子的分離和檢測為測量極低濃度的蛋白質(zhì)s1,2提供了一種有希望的方法。 單分子技術(shù)數(shù)字ELISA多重檢測新型的單分子檢測方法的普及版;

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在前列腺切除術(shù)后患者中,能夠準(zhǔn)確量化PSA水平的能力,即使在非常低的濃度(<300fM或10pg/mL)下,也應(yīng)提供如果PSA水平升高,早期提示復(fù)發(fā)17,29。圖4顯示PSA水平使用數(shù)字ELISA在30名接受治理性前列腺切除術(shù)且術(shù)后至少6周采集血液的患者血清中進(jìn)行測量。所有30例患者的血清PSA水平均低于商業(yè)檢測限采用PSA數(shù)字ELISA(圖3A)對全血清樣本進(jìn)行稀釋1:4后測定,成功檢測到所有30例患者中PSA,濃度范圍為14fg/mL至9.4pg/mL,平均濃度為1.5pg/mL。需要進(jìn)一步的臨床研究來確定在RP患者中測量PSAfg/mL水平的診斷益處。

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通過在離散的飛升微孔陣列中分離和檢測單個免疫復(fù)合物,實現(xiàn)數(shù)字ELISA已使在亞細(xì)胞水平上測量血清中臨床重要的蛋白質(zhì)成為可能飛摩爾濃度。我們認(rèn)為,與之前報道的方法相比,數(shù)字ELISA表現(xiàn)出的不敏感性改善將轉(zhuǎn)化為診斷上的好處。例如,在本研究中測定的30個RP樣品中有9個樣品的PSA水平低于基于納米顆粒標(biāo)簽的先前比較高靈敏度PSA測定的LOD17。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA, 極速檢測,快15min能完成 的ELISA檢測!

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超敏:芯棄疾.數(shù)字ELISA,與Simoa同樣的檢測方案,將檢測結(jié)果二維化,使用成像方式,可精確量檢測區(qū)多少個微球載體上發(fā)生免疫反應(yīng),具有陽性熒光信號,理論可達(dá)fg級;使用常規(guī)ELISA試劑,測試IL-6等演示指標(biāo),也可輕松達(dá)到亞pg級(0.2-0.5pg/mL)10微升樣本,2-4項指標(biāo)) 芯棄疾JX-8B單分子小型化ELISA檢測產(chǎn)品,多重檢測,同時測試2-6個檢測項目;科研場景用數(shù)字ELISA超敏檢測

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    芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列(圖1C)我們稱之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測單個酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個酶的動力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測單個酶的能力來檢測用酶標(biāo)記的單個蛋白質(zhì)分子。在這個單分子免疫測定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個三明治抗體復(fù)合物,結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記,如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品,蛋白質(zhì)的比值分子(以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物)與微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布,導(dǎo)致單個微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如,如果在(3000個分子)的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì),并且在200,000個微球上進(jìn)行標(biāo)記,則珠子,然后,。無法檢測到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測技術(shù)(例如,平板閱讀器)的標(biāo)簽,因為熒光染料由每種酶生成的產(chǎn)物擴(kuò)散到一個大卵試驗體積(通常為),并進(jìn)入其中需要數(shù)十萬種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號背景。 代理數(shù)字ELISA廠家

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