醫(yī)生為了鑒定男性生育能力,常囑男方作精液檢查,正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時(shí)間長者,可呈淡黃色,若出現(xiàn)鮮紅色.暗紅色,則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升,常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀,1小時(shí)之內(nèi)應(yīng)液化為稀薄的液體,用一根小玻璃棒插入精液中再提起,所形成的精液絲長度一般不超過2厘米,否則視為異常。精液呈弱堿性,PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應(yīng)超過2000萬/毫升。排精后1小時(shí)內(nèi)活動精>=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動力分為四級:0級:不活動;1級:精子原地?cái)[動;2級:有中等的前向運(yùn)動;3級:前向運(yùn)動活躍,快速直線運(yùn)動。正常的精子活動力為2~3級的精子>=40%~50%.精子形態(tài):畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項(xiàng)指標(biāo)定論,應(yīng)對精子數(shù)量活力活動率液化時(shí)間畸形率等多方面進(jìn)行綜合能力分析。采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。精子分析儀能分析與精子運(yùn)動功能相關(guān)的各種參數(shù)。北京魚精子分析W.H.O 5
1.基本檢查:是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法,不僅是男科實(shí)驗(yàn)室,任何開展精液檢查的實(shí)驗(yàn)室都能遵循。精子計(jì)數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的方法,但計(jì)數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法,伊紅染色和低滲腫脹實(shí)驗(yàn)只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明,鑒別快速前向運(yùn)動精子非常重要。因此,關(guān)于精子活力分級,第6版手冊建議恢復(fù)到快速前向運(yùn)動、慢速前向運(yùn)動、非前向運(yùn)動和不活動4個(gè)活力級別,但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運(yùn)動(PR)、非前向運(yùn)動(NP)、不活動(IM)3個(gè)活力級別計(jì)算。第6版手冊強(qiáng)調(diào),精子形態(tài)學(xué)評估的價(jià)值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正?!毙螒B(tài)率的判斷,則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評估1500個(gè)精子來完成;對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液,應(yīng)單獨(dú)計(jì)算并在報(bào)告中注明;美國前向運(yùn)動精子分析頻閃光源計(jì)算機(jī)輔助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科學(xué)名詞。
世界衛(wèi)生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)手冊》于1980年***出版,以滿足臨床與科研對人類精液標(biāo)準(zhǔn)化檢測程序日益增長的需求。該手冊是人類精液實(shí)驗(yàn)室檢查和處理程序及方法的標(biāo)準(zhǔn)操作指南,旨在提高精液分析的質(zhì)量和提高不同實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的可比性。在過去40年里,該手冊進(jìn)行了4次修訂與補(bǔ)充(1987年、1992年、1999年和2010年),內(nèi)容涉及精液檢查的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序、精子功能、精漿生化、精液處理與冷凍以及質(zhì)量保證等,已成為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn),被世界各地臨床和實(shí)驗(yàn)室***使用。中國衛(wèi)生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術(shù)規(guī)范。WHO《人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊(第5版)》精液參考值的數(shù)據(jù)是來自全球3大洲8個(gè)國家的前瞻性、多中心臨床研究的結(jié)果,通過循證醫(yī)學(xué)研究獲得的精液參數(shù)參考值具有里程碑式意義。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一,即使在**近幾年其下載量也在穩(wěn)步增長。它是男科實(shí)驗(yàn)室及全球范圍內(nèi)開展精液分析操作的其他實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)院和研究機(jī)構(gòu)使用的標(biāo)準(zhǔn)操作手冊。該手冊在國際大會、科學(xué)會議、以及WHO合作中心、專業(yè)學(xué)會和其他學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)的培訓(xùn)項(xiàng)目中進(jìn)行了***傳播。截止到2021年,已被3000余篇同行評議論文和評論引用。
精子手工計(jì)數(shù)原理及操作方法1.原理:將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯?,混勻注入?jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù),再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法(按照***版第四版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》)1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。3.計(jì)算1).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子少于10個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)所有25個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子在10~40個(gè),應(yīng)計(jì)10個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子多于40個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式:精子數(shù)=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×25×1/計(jì)數(shù)池高度×20×103/ml=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×1/計(jì)數(shù)池高度×5×103/ml精子分析,直線速率(VSL)?:精子頭在開始檢測時(shí)的位置與終止所處位置之間的直線運(yùn)動的時(shí)均速率。
精子分析儀使用注意事項(xiàng)1.樣品制備是CASA取得高質(zhì)量檢查結(jié)果的關(guān)鍵。CASA采用深度為10um樣品池,能保證精子在單層界面內(nèi)自由運(yùn)動。取樣分析前標(biāo)本必須充分混勻,用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中,用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。2.不潔凈的計(jì)數(shù)池可影響精子的活力,尤其影響灰度CASA精子計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。3.精子樣品密度過大時(shí),造成圖像處理上的粘連,無法分析每個(gè)精子的運(yùn)動特性。**中所含精子太少時(shí),需增加檢查視野數(shù)量或者使用低倍物鏡觀察,以提高樣品檢出率。精子分析儀與人工方法相比具有客觀,高效,高精度的優(yōu)點(diǎn)。美國快速運(yùn)動精子分析STR
在精子研發(fā)的歷程中,計(jì)算機(jī)輔助精子檢測經(jīng)歷了黑白圖像機(jī)、彩色圖像檢測。目前先進(jìn)的是熒光精子圖像檢測。北京魚精子分析W.H.O 5
CASA精子運(yùn)動速度和運(yùn)動軌跡特征主要參數(shù)有:①軌跡速度(VCL):也稱曲線速度,即精子頭部沿其實(shí)際行走曲線的運(yùn)動速度。②平均路徑速度(VAP):精子頭沿其空間平均軌跡的運(yùn)動速度,這種平均軌跡是計(jì)算機(jī)將精子運(yùn)動的實(shí)際軌跡平均后計(jì)算出來的,可因不同型號的儀器而有所改變。③直線運(yùn)動速度(VSL):也稱前向運(yùn)動速度,即精子頭部直線移動距離的速度。④直線性(LIN):也稱線性度,為精子運(yùn)動曲線的直線分離度,即VSL/VCL。⑤精子側(cè)擺幅度(ALH):精子頭實(shí)際運(yùn)動軌跡對平均路徑的側(cè)擺幅度,可以是平均值,也可以是最大值。不同型號的CASA系統(tǒng)由于計(jì)算方法不一致,因此相互之間不可直接比較。⑥前向性(STR):也稱直線性,計(jì)算公式為VSL/VAP,亦即精子運(yùn)動平均路徑的直線分離度。⑦擺動性(WOB):精子頭沿其實(shí)際運(yùn)動軌跡的空間平均路徑擺動的尺度,計(jì)算公式為VAP/VCL。⑧鞭打頻率(BCF):也稱擺動頻率,即精子頭部跨越其平均路徑的頻率。⑨平均移動角度(MAD):精子頭部沿其運(yùn)動軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時(shí)間平均值。⑩運(yùn)動精子密度:每毫升精液中VAP>0μm/s的精子數(shù)。北京魚精子分析W.H.O 5