在細胞培養(yǎng)實驗里,DMEM 培養(yǎng)基的使用過程需嚴謹規(guī)范。收到培養(yǎng)基后,應及時存放于 2-8°C 的環(huán)境中,低溫可有效減緩培養(yǎng)基內成分的降解速度,確保其營養(yǎng)成分的穩(wěn)定性。在使用前,需將培養(yǎng)基預熱至 37°C,模擬人體體溫環(huán)境,讓細胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時,由于 DMEM 培養(yǎng)基多采用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),需將培養(yǎng)環(huán)境的 CO?濃度維持在 5 - 10%,以此精細調控培養(yǎng)基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區(qū)間,為細胞打造穩(wěn)定且舒適的 “居住空間”,促進細胞健康生長。MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,在MEM的基礎上又添加了NEAA、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分。江西樣本細胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨
1.細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養(yǎng);后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基,如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點是營養(yǎng)成分豐富,培養(yǎng)效果良好,但缺點是成分復雜,來源受限且制作過程復雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清,另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質在培養(yǎng)某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經蛋白酶和肽酶水解的產物。江西樣本細胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨Ham’s F-12營養(yǎng)混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)是由Ham以Ham’s F-10營養(yǎng)混合物為基礎設計而成的。
RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,采用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基**初是為淋巴細胞培訓專門設計的,現在已普遍應用于各種正常細胞和惡性**的培養(yǎng),包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和惡性**,是采用極其普遍的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比之下其他培養(yǎng)基之所以具與眾不同的功效,是因為其中富含還原劑谷胱甘肽和高濃度的維他命。RPMI1640培養(yǎng)基包含生物素、維他命B12以及PABA,這些成份是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對普遍的細胞培養(yǎng)應用,我們提供多種組分的RPMI1640改進培養(yǎng)基。
DMEM 培養(yǎng)基在細胞毒性測試中發(fā)揮著重要作用。在評估藥物、化合物或化妝品對細胞的毒性影響時,將細胞置于 DMEM 培養(yǎng)基中,再加入待測試物質??蒲腥藛T通過觀察細胞在含測試物質的 DMEM 培養(yǎng)基中的生長狀態(tài)、形態(tài)變化、增殖能力以及細胞死亡情況等指標,判斷測試物質的細胞毒性強弱。比如,在新藥研發(fā)初期,利用 DMEM 培養(yǎng)基進行細胞毒性測試,可初步篩選出細胞毒性較低的藥物候選物,減少后期研發(fā)風險,為新藥研發(fā)的安全性提供重要保障。MCDB 131培養(yǎng)基不同于傳統(tǒng)培養(yǎng)基之處在于,其含有微量元素、腐胺、腺嘌呤及更高濃度的氨基酸和維生素。
任意調節(jié)葡萄糖的濃度,簡便快捷。高糖型培養(yǎng)基廣泛應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒寄主細胞、單一細胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產,例如運用CHO細胞表述EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適宜代謝效用較慢、依賴性貼壁細胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的海洋生物緩沖劑,對細胞無毒性效用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間維持恒定的PH范圍,可以有效性的以防培養(yǎng)液PH波動較大對細胞生長產生不利于的影響??捎糜跓oCO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,**適宜細胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些弱點,研究說明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的功用,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),**好用到不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀抵消。青霉素-鏈霉素混合液一般而言也被稱做“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為防止微生物污染**常用的***,其中,青霉素能夠擾亂細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效性。DMEM/F12培養(yǎng)基含有多種微量元素,廣泛應用于多種哺乳類細胞的培養(yǎng)。陜西醫(yī)用細胞培養(yǎng)基廠家
Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。江西樣本細胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨
Brinster’s BMOC-3 培養(yǎng)基
Brinster’s BMOC-3培養(yǎng)基是Ralph Brinster設計出的一種簡單的化學限定的培養(yǎng)基,**初用于小鼠卵細胞的體外培養(yǎng),還可用于其他哺乳胚胎早期發(fā)育時的培養(yǎng)。
Brinster’s BMOC-3培養(yǎng)基不含任何氨基酸或維生素,但含有BSA,BSA能支持卵母細胞的成熟以及哺乳動物胚胎的早期發(fā)育。
注意事項
本產品經過濾除菌,使用時應注意無菌操作,避免污染;
為保持本產品的比較好使用效果,請勿進行凍融處理;本產品用于科研或進一步研究使用,不用于診斷。 江西樣本細胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨
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