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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-10-16

與常規(guī)的PCR的方法相比,dPCR有很好的優(yōu)勢(shì)。***定量常規(guī)PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR定量檢測(cè)都需要已知拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)DNA制定標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),由于樣品測(cè)定在各種條件上不會(huì)完全一致,會(huì)造成PCR擴(kuò)增效率的差異,從而影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性。而ddPCR不受標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)影響,可以進(jìn)行***定量。樣品需求量低在檢測(cè)珍貴樣品和樣品核酸存在降解時(shí)具有明顯的優(yōu)勢(shì)。高靈敏度ddPCR本質(zhì)上是 將一個(gè)傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)分成了數(shù)萬(wàn)個(gè) 的PCR反應(yīng),在這些反應(yīng)中可以精確地檢測(cè)到很小的目的片段的差異、單拷貝甚至是低濃度混雜樣品,且能避免非同源異質(zhì)雙鏈的形成。高耐受性由于目的序列被分配到多個(gè)微滴中,***降低了體系間的影響以及背景序列和***物對(duì)反應(yīng)的干擾,擴(kuò)增基質(zhì)效應(yīng)大大減小。數(shù)字PCR,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,有需求可以來(lái)電數(shù)字PCR!黑龍江藥品數(shù)字PCR供應(yīng)商

數(shù)字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來(lái)的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來(lái)說(shuō),數(shù)字PCR對(duì)結(jié)果的判定不依賴(lài)于擴(kuò)增曲線(xiàn)循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬(wàn)份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個(gè)單元都會(huì)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對(duì)每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號(hào)的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對(duì)而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。黑龍江藥品數(shù)字PCR供應(yīng)商浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR,歡迎您的來(lái)電!

研究方向低豐度及稀有序列的精確定量目前對(duì)于低豐度目標(biāo)序列的檢測(cè),定量PCR、雜交、毛細(xì)管測(cè)序及NGS等方法都因受到背景DNA的干擾,使得檢測(cè)靈敏度及精確性都達(dá)不到精細(xì)定量的要求(如定量PCR檢測(cè)中Ct值大于33的情況下,其重復(fù)性就不是很高),而微滴式數(shù)字PCR系統(tǒng)通過(guò)**的微滴化處理,使得稀有的核酸序列從大量的背景DNA中分離出來(lái),從而提高了檢測(cè)的靈敏度及重復(fù)性。此外,由于樣品微滴化處理的同時(shí),也將樣品中可能存在的***劑進(jìn)行了分裝,提高了數(shù)字PCR擴(kuò)增對(duì)于***劑的耐受程度,因此可具體應(yīng)用于很多臨床樣品(血液、尿液、糞便、痰液、腦脊液等)中對(duì)**核酸標(biāo)記物的檢測(cè)。一般而言,毛細(xì)管電泳和定量PCR的檢測(cè)靈敏度約在10%;NGS的靈敏度可達(dá)到1%;而ddPCR的檢測(cè)下限為0.001%。

無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前檢查鐮狀細(xì)胞貧血(sicklecellanemia)是HBB基因突變引起的常染色體顯性遺傳病,有嚴(yán)重的危害,可以導(dǎo)致高達(dá)5%的胎兒死亡率及4.62%的孕婦死亡率 。而精細(xì)有效的無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前診斷是預(yù)防鐮狀細(xì)胞貧血患兒出生的有效方法。研究人員采用dPCR技術(shù)檢測(cè)孕婦胎兒游離DNA(cff-DNA)HBB基因突變。結(jié)果顯示,dPCR技術(shù)能夠確定87%的男性胎兒(n=45)和75%的女性胎兒(n=20)HBB基因的突變狀態(tài)。當(dāng)cff-DNA濃度大于7%時(shí),可以**的檢測(cè)出HBB基因突變[3],可以說(shuō)是相當(dāng)厲害了。檢測(cè)數(shù)量一次可達(dá)96個(gè)樣品。

MicroDrop-100微滴式數(shù)字PCR應(yīng)用范圍如下:a.動(dòng)植物檢驗(yàn)檢疫,動(dòng)物源性分析、極微量病原菌檢測(cè)定量分析、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè);b.降低篩查成本、縮短檢測(cè)周期,適用于T13\T18\T21三體綜合征等遺傳病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估;適用于zhong瘤早期篩查、分子分型、靶向用藥和療效監(jiān)測(cè)等;適用于傳染性疾病的早期診斷和診療指導(dǎo);c.可用于DNA甲基化的檢測(cè)、CRISPR-Cas9基因編輯效率檢測(cè)等。d.基因表達(dá)差異監(jiān)測(cè)單細(xì)胞研究:測(cè)序、PCRe.無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查:低成本、快速、傳染性疾病:HBV、HIV、CO VID-19定量數(shù)字PCR,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,用戶(hù)的信賴(lài)之選。黑龍江藥品數(shù)字PCR供應(yīng)商

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研究方向無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查無(wú)創(chuàng)傷的產(chǎn)前診斷,如21號(hào)染色體為3倍體的唐氏綜合征、已知父母基因型的胎兒地貧檢測(cè)或已知父母基因型的其它核酸病檢測(cè)(孟德?tīng)栂嚓P(guān)遺傳疾病)。目前標(biāo)本來(lái)源主要為血液,而待檢測(cè)的胎兒DNA受到母體DNA的干擾,影響了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。而QX200檢測(cè)系統(tǒng)獨(dú)特的微滴化技術(shù)完全可以作為二代測(cè)序法的補(bǔ)充來(lái)進(jìn)行的無(wú)創(chuàng)傷產(chǎn)前診斷,從而提高工作效率及節(jié)約成本。轉(zhuǎn)基 因食品或成分的檢測(cè)目前在確定轉(zhuǎn)基因作物或成分的含量時(shí)采取定量PCR的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法,這種方法需要依賴(lài)于已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品(CertifiedReferenceMaterialsCalibrants,CRMCs)。ddPCR***定量的方式可以徹底解決這些標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定標(biāo)工作。黑龍江藥品數(shù)字PCR供應(yīng)商

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