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來源: 發(fā)布時間:2023-09-20

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細胞凍存為了減少我們在細胞培養(yǎng)時的細胞代謝頻率,從而進行長期儲存的一種細胞培養(yǎng)技術,是細胞保存的主要方法之一,起到了細胞保種的作用。那么,細胞凍存的需要用到哪些細胞培養(yǎng)耗材,其凍存步驟又是怎樣的呢?利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。細胞凍存需要用到的細胞培養(yǎng)耗材包括凍存管、細胞培養(yǎng)瓶、吸管、移液管等。待凍存細胞懸液的制備(1)按常規(guī)方法消化處于對數(shù)生長期的細胞培養(yǎng)物,制備單細胞懸液,并計算細胞總數(shù);(2)將細胞懸液以800~1000r/min離心5min,去上清夜;(3)向細胞沉淀物中加入冷凍保護液,輕輕吹打混勻,使細胞密度達1×106~1×107個/ml;(4)按每管1~1.5ml的量分裝于凍存管內,擰緊管蓋;(5)將凍存管上做好標記,包括細胞代號及凍存日期。上海4mlNEST凍存管代理凍存管帶二維碼的是不是更好?

凍存管一般指菌種保存管,菌種保存管主要由保存液、保存管和小瓷珠三部分組成,它是一種實驗室保存菌種的容器,用于菌種的保存或者轉移,一般菌種保存管內有25顆小瓷珠用于細菌的吸附和保存。使用過程中,將細菌接種在保存管內,放置于-20℃或-80℃環(huán)境中可長期保存。(-20℃可保存一年,-80℃可保存兩年)。細菌菌株的保存始終是實驗室一個必不可少的工作。長期以來,形成了平板傳代法、斜面?zhèn)鞔?、凍干法等多種。保存方法:隨著可保存時間的由短到長,保存復雜程度及對相應設備的要求也是逐步增加。如何取得可保存時間與保存復雜程度之間的比較好關系,是菌種保存方法的關鍵。

冷凍保存管在使用過程中,應在保存管內接種細菌,可在-20或-80長期保存。(可在-20保存一年,在-80保存兩年)。細菌菌株的保存一直是實驗室的一項基本工作。長期以來,形成了平板傳代、斜面?zhèn)鞔?、凍干等多種保存方法。隨著存儲時間的縮短,存儲的復雜性和對相應設備的要求也逐漸提高。如何在保存時間和保存復雜度之間獲得比較好關系是菌種保存方法的關鍵。使用步驟:1。直接刮取平板上生長的新鮮培養(yǎng)物,放入菌種保存管中;2.一般一個平板的純培養(yǎng)可以保存兩個菌種保藏管;3.使用時,用接種針從菌種保存管中取出小瓷珠,直接劃線平板或放入相應的菌種增菌液中。NEST凍存管分外旋內旋兩種。

凍存管可保存一般細菌、苛刻菌,霉菌、酵母菌等***也可在低溫條件下通過菌種保存管保存,因此菌種保存管被廣泛應用于臨床領域(臨床藥敏試驗菌株的保存)、疾控領域(監(jiān)測分離到的菌株的保存)、菌種保存中心(菌株的日常取用與保存)以及制藥企業(yè)(陽性對照菌株保存和取用)等領域。從原理上講,所有菌種都可用瓷珠菌種保存管保存。菌種保存的原理是DNA復制時自發(fā)突變導致菌種退化,因此要創(chuàng)造代謝不活潑的狀態(tài),干燥、低溫、缺氧、缺營養(yǎng)的環(huán)境,創(chuàng)造的環(huán)境越接近此狀態(tài),所保存的菌種的時間就越長。但需要注意的是,由于苛刻菌(如流感嗜血桿菌、腦膜炎萘瑟氏菌)等特殊細菌保存時,需-80℃或更低溫度保存,才可以做到更長期的保存。NEST凍存管可耐受低溫冷凍和液氮冷凍。閔行區(qū)1.2mlNEST凍存管包裝規(guī)格

NEST凍存管有圓底可立的。上海4mlNEST凍存管代理

凍存管的使用方法1、使用凍存管儲存樣本時,嚴格要求應把凍存管放入液氮的氣相層或冰箱中保存。如果凍存管儲存于液氮液體中,液氮有一定幾率會滲入凍存管內部,復蘇時液氮氣化導致管內外壓力不平衡,這樣極易造成凍存管的炸裂,并具有生物危害性,并導致稀有樣本丟失。2、操作凍存管復蘇,全程使用安全防護設備,建議穿實驗服、戴棉質手套且在安全的實驗臺上進行操作。條件允許情況下,請佩戴護目鏡或防護面罩。由于夏季室內溫度會高于冬季,請格外小心。3、凍存細胞儲存過程中,凍存管的冷凍溫度須均勻。不均勻的受凍將會導致冰塞的產生,冰塞會抑制兩側的液體溫度傳遞進而產生危險的高壓力并導致凍存管受損。4、凍存的樣本量不要超過凍存管要求的大工作體積。上海4mlNEST凍存管代理

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