高效液相色譜分離原理

液—固

流動相為液體，固定相為吸附劑（如硅膠、氧化鋁等）。這是根據(jù)物質(zhì)吸附作用的不同來進行分離的。其作用機制是：當(dāng)試樣進入色譜柱時，溶質(zhì)分子 (X) 和溶劑分子(S)對吸附劑表面活性中心發(fā)生競爭吸附（未進樣時，所有的吸附劑活性中心吸附的是S)，可表示如下：Xm nSa ====== Xa nSm

式中：Xm--流動相中的溶質(zhì)分子；Sa--固定相中的溶劑分子；Xa--固定相中的溶質(zhì)分子；Sm--流動相中的溶劑分子。

當(dāng)吸附競爭反應(yīng)達平衡時：

K=[Xa][Sm]/[Xm][Sa]

式中：K為吸附平衡常數(shù)。[討論：K越大，保留值越大。]

液相色譜類型

液相色譜按其分離機理，可分為四種類型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法

吸附色譜法

吸附色譜法的固定相為吸附劑，色譜的分離過程是在吸附劑表面進行的，不進入固定相的內(nèi)部。與氣相色譜不同，流動相(即溶劑)分子也與吸附劑表面發(fā)生吸附作用。在吸附劑表面，樣品分子與流動相分子進行吸附競爭，因此流動相的選擇對分離效果有很大的影響，一般可采用梯度淋洗法來提高色譜分離效率。

在聚合物的分析中，吸附色譜一般用來分離添加劑，如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等，也可用于石油烴類的組成分析。

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液相色譜類型

液相色譜按其分離機理，可分為四種類型--吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜、凝膠色譜法

凝膠色譜法

目前，凝膠色譜法既適用于水溶液的體系，又適用于有機溶劑的體系。當(dāng)所用的洗脫劑為水溶液時，稱為凝膠過濾色譜，凝膠過濾色譜在生物界的應(yīng)用比較多；采用有機溶劑為洗脫劑時，稱為凝膠滲透色譜，凝膠滲透色譜在高分子領(lǐng)域應(yīng)用比較多。

四種不同類型的液相色譜，可以依據(jù)樣品性質(zhì)的不同，選擇不同的方法，靈活應(yīng)用。

高效液相色譜

高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“**離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用。 更高的流速：達 5 mL/min。Vanquish液相色譜系統(tǒng)咨詢報價

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