蘇州細胞支原體預(yù)防試劑現(xiàn)貨

來源：發(fā)布時間：2024-06-15

支原體是細胞外生存的小微生物，是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在0.2~0.5um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲形、分枝狀等多種態(tài)。

1、支原體存在于我們周圍，他可能就如塵埃一樣存在于我們的環(huán)境中

2、可透過一般的濾膜，所以不要寄希望于過濾可以清楚支原體污染的液體

支原體對培養(yǎng)細胞的污染發(fā)生率高，據(jù)估計平均發(fā)生率在60%左右。同時又非常隱秘，早期不容易被發(fā)現(xiàn)，除非用特異性和靈敏度都非常高的檢測試劑盒。支原體因為個頭小，能穿過0.22微米濾器，并且在實驗室內(nèi)會潛在的擴散。支原體污染使得用被污染的細胞樣本做的實驗完全失去意義和價值。

支原體去除的原理是什么？蘇州細胞支原體預(yù)防試劑現(xiàn)貨

預(yù)防細胞培養(yǎng)過程中的支原體污染至關(guān)重要，因為一旦發(fā)生污染，可能會嚴重影響實驗結(jié)果和細胞的生長。以下是一些有效的預(yù)防措施：

1. 無菌操作：始終在無菌條件下進行細胞培養(yǎng)操作，包括使用無菌的移液器、手套和其他實驗室器材。

2. 個人防護：穿戴適當?shù)膫€人防護裝備，如實驗服、手套和口罩，以減少污染的風(fēng)險。

3. 細胞培養(yǎng)室的清潔：保持實驗室和細胞培養(yǎng)室的清潔，定期進行消毒處理。

4. 培養(yǎng)箱的維護：定期清潔和消毒CO2培養(yǎng)箱，避免飛濺和溢出，并維持嚴格的清潔計劃。

5. 使用無支原體污染的試劑：使用經(jīng)過檢測確認無支原體污染的培養(yǎng)基、血清和其他添加物。

6. 細胞的檢測：定期對細胞進行支原體污染的檢測，尤其是在引入新的細胞系或傳代細胞之前。

7. 培養(yǎng)基和試劑的過濾：使用0.22μm或更小孔徑的濾膜過濾所有細胞培養(yǎng)用液體，以阻止支原體的通過。

8. 使用抗*素預(yù)防：雖然抗*素不能作為常規(guī)預(yù)防手段，但在某些情況下，可以考慮使用抗*素作為預(yù)防措施，尤其是在高風(fēng)險操作中。

杭州細胞支原體檢測方法LAMP法支原體去除試劑會影響細胞的生長狀態(tài)嘛？

支原體去除試劑使用后，對支原體的檢測可能會有影響。一些支原體去除試劑通過特異性地與支原體膜結(jié)合、改變支原體膜的通透性來殺死支原體，而對真核細胞幾乎沒有影響。然而，某些情況下，去除試劑可能會對細胞的活力和形態(tài)產(chǎn)生一定的影響，尤其是在去除劑作用期間。此外，如果去除劑的效果不徹底，可能會導(dǎo)致細胞再次被支原體污染。

需要注意的是，某些支原體去除試劑可能會在去除支原體的過程中導(dǎo)致支原體膜溶解，從而釋放出支原體的DNA，這可能會在隨后的支原體核酸檢測中引起假陽性結(jié)果。因此，在去除支原體后，建議在繼續(xù)正常傳代培養(yǎng)幾代細胞后再進行支原體檢測，以確保檢測結(jié)果的準確性。

方法	靈敏度	優(yōu)勢	劣勢
培養(yǎng)法	☆☆☆	ü 便捷 ü 便宜 ü 金標準	ü 費勞力 ü 耗時長 ü 需要特定的培養(yǎng)基 ü 特定支原體種類需要特定的培養(yǎng)基
DNA染色 (DAPI or Hoescht)	☆	ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜	ü 可能難以判讀結(jié)果 ü 無法鑒別支原體種屬 ü 可能假陽性可能性
間接染色	☆☆☆	ü 迅速 ü 便宜 ü 易檢測	ü 費時 ü 需要細胞系指示
ELISA	☆☆	ü 迅速 ü 客觀，易判讀結(jié)果 ü 可以鑒別支原體種屬	ü 受抗體限制 ü 價格高
免疫染色	☆☆	ü 迅速 ü 可檢測支原體種屬 ü 價格略高	ü 可檢測的支原體種屬有限
放射自顯影	☆☆	ü 迅速	ü 難以判讀結(jié)果 ü 無法鑒別支原體種屬 ü 費勞力
生物發(fā)光	☆☆	ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜	ü 難以判讀結(jié)果 ü 無法鑒別支原體種屬
PCR	☆☆☆	ü 便宜 ü 迅速 ü 具有特異性	ü 可能假陽性可能性 ü 檢測特異性依賴引物特異性 ü 需要提取DNA
Real-Time PCR	☆☆☆	ü 便捷 ü 迅速 ü 具有特異性 ü 結(jié)果可靠 ü 高通量	ü 可能假陽性可能性 ü 檢測特異性依賴引物特異性 ü 需要提取DNA
LAMP	☆☆	ü 便捷 ü 無需DNA提取 ü *需10min左右的實驗操作時間 ü 具有特異性 ü 高通量	ü 可能假陽性可能性 ü 檢測特異性依賴引物特異性支原體的檢測方法有哪些？

細胞被支原體污染后可能會出現(xiàn)以下幾種情況：

1. 生長速度變慢：支原體污染的細胞生長速度可能會減慢，甚至停止生長。

2. 形態(tài)改變：部分細胞可能會變圓，從培養(yǎng)瓶壁脫落。有些細胞在支原體污染后，形態(tài)變化可能不明顯，但有些細胞可能會出現(xiàn)體積增大、細胞碎片增多等現(xiàn)象。

3. 培養(yǎng)液pH變化：支原體污染的細胞可能導(dǎo)致培養(yǎng)液pH值變化明顯，更換培養(yǎng)液后幾小時內(nèi)變酸（顏色變黃）。

4. 細胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積：在某些情況下，細胞與細胞間隙可能出現(xiàn)膜狀沉積，影響細胞的正常生長和傳代。

5. 細胞功能受損：支原體污染可能會影響細胞的代謝和功能，如影響細胞蛋白質(zhì)、DNA、RNA的合成。

6. 染色體畸變：支原體污染可能會導(dǎo)致細胞染色體斷裂、數(shù)目減少，出現(xiàn)雙著絲點染色體、環(huán)狀染色體等異常。

7. 免疫細胞產(chǎn)量受影響：對于巨噬細胞等免疫細胞的培養(yǎng)，支原體污染可能會抑制干擾素的合成和降低其活性。

8. 細胞培養(yǎng)環(huán)境的污染：污染的細胞可能成為實驗室的污染源，影響工作區(qū)域、培養(yǎng)箱和液氮罐等。

9. 實驗結(jié)果的不確定性：使用被支原體污染的細胞進行實驗可能會得到不準確的結(jié)果，影響科研的可靠性。

支原體污染和黑膠蟲污染有什么區(qū)別？杭州細胞培養(yǎng)支原體去除現(xiàn)貨

細胞庫支原體檢測的必要性？蘇州細胞支原體預(yù)防試劑現(xiàn)貨

巢式PCR法和一步法恒溫支原體檢測試劑盒各有優(yōu)缺點，具體哪個更好要根據(jù)實驗需求和條件來決定。

1. 巢式PCR法通過兩輪PCR擴增來提高檢測的特異性和靈敏度。它的優(yōu)點是：

2. 特異性強，可以減少假陽性結(jié)果。

3. 靈敏度高，可以檢測到很低數(shù)量的支原體。

4. 通過設(shè)計多對引物，可以覆蓋多種支原體種類。

不過巢式PCR法也存在一些缺點：

1. 操作復(fù)雜，需要兩輪PCR反應(yīng)。

2. 容易受到PCR抑制物的影響，產(chǎn)生假陰性結(jié)果。

3. 反應(yīng)后需要開蓋電泳檢測，增加了污染的風(fēng)險。

而一步法恒溫支原體檢測試劑盒采用等溫擴增技術(shù)，具有以下優(yōu)點：

1. 操作簡便，只需一次反應(yīng)即可完成檢測。

2. 靈敏度和特異性也很高，可檢出10個拷貝以上的支原體污染。

3. 反應(yīng)后無需開蓋，減少了污染的風(fēng)險。

但一步法試劑盒的缺點是：

1. 靈敏度雖高，但可能略低于巢式PCR法。

2. 價格可能比巢式PCR試劑盒要高。

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