我們向裂解液中加入針對某個已知蛋白（誘餌蛋白）的特異性抗體，抗體與誘餌蛋白結(jié)合形成抗原 - 抗體復合物。如同 IP 免疫沉淀一樣，借助 Protein A/G 磁珠或瓊脂糖珠等固相載體，將抗原 - 抗體復合物從復雜的裂解液中分離出來。此時，與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白質(zhì)（獵物蛋白）也會隨著誘餌蛋白一起被沉淀下來，從而實現(xiàn)對蛋白質(zhì)復合物的富集和分析，幫助我們了解細胞內(nèi)蛋白質(zhì)之間的相互作用關系。實驗流程上，首先同樣是細胞或組織的裂解。該技術(shù)通過免疫反應沉淀目標物，為疾病診斷和藥物研發(fā)提供重要依據(jù)。上海anti Flag免疫沉淀實驗視頻
在分離復合物階段，固相載體的質(zhì)量與特性直接影響分離效果。如磁珠的磁響應性、表面修飾等因素，都關乎能否快速、純凈地分離出目標復合物。在新興的基因領域，免疫沉淀技術(shù)正發(fā)揮著前沿作用。研究人員利用它來研究病毒載體與宿主細胞蛋白的相互作用，以優(yōu)化載體設計，提高基因傳遞效率和安全性。在神經(jīng)科學的神經(jīng)環(huán)路研究中，免疫沉淀用于分析特定神經(jīng)元亞型中蛋白質(zhì)的相互作用，助力理解神經(jīng)信號在復雜網(wǎng)絡中的傳導機制。然而，免疫沉淀技術(shù)也面臨諸多挑戰(zhàn)。一方面，抗體的批次間差異可能導致實驗結(jié)果的不一致性。廣州IP免疫沉淀磁珠多少錢蛋白免疫沉淀操作嚴謹，有效分離目標蛋白，為后續(xù)研究提供基礎。
免疫沉淀技術(shù)自誕生以來，便在生命科學研究領域扮演著舉足輕重的角色。早期的免疫沉淀技術(shù)較為簡單，主要依賴于抗原抗體的基本結(jié)合原理。隨著研究的深入，科研人員不斷優(yōu)化，使得這一技術(shù)逐漸成熟。如今，它已成為研究生物分子相互作用的重要手段。免疫沉淀的原理基于抗原與抗體的特異性識別。在復雜的生物樣本中，抗體如同 “精確制導武器”，能靶向結(jié)合目標抗原，形成穩(wěn)定的抗原 - 抗體復合物。再利用固相載體的特性，將復合物從樣本中分離出來，從而實現(xiàn)對目標分子的富集與分析。
Co-IP技術(shù)在疾病研究中同樣發(fā)揮著重要作用。通過研究疾病相關蛋白質(zhì)的相互作用網(wǎng)絡，科學家們能夠揭示出疾病發(fā)生和發(fā)展的分子機制，為疾病的診斷和提供新的思路和方法。例如，在研究中，Co-IP可用于鑒定相關基因的表達產(chǎn)物及其相互作用伙伴，從而揭示發(fā)生和發(fā)展的關鍵途徑和靶點。此外，Co-IP技術(shù)還可用于研究神經(jīng)退行性疾病、心血管疾病等復雜疾病的蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡，為這些疾病的診斷和提供新的線索和依據(jù)。Co-IP技術(shù)在藥物研發(fā)領域同樣具有廣闊的應用前景。通過研究藥物靶點與其相互作用蛋白質(zhì)的網(wǎng)絡關系，科學家們能夠揭示出藥物作用的分子機制和潛在副作用，為藥物的優(yōu)化和改進提供重要依據(jù)。此外，Co-IP技術(shù)還可用于篩選和鑒定藥物候選分子，通過檢測藥物分子與目標蛋白質(zhì)及其相互作用伙伴的結(jié)合情況，評估藥物的療效和安全性。這種基于蛋白質(zhì)相互作用的藥物研發(fā)策略，為新藥研發(fā)提供了更加精細和高效的方法。憑借抗體與抗原的特異性結(jié)合，免疫沉淀技術(shù)能有效分離和分析特定蛋白。
隨后，借助偶聯(lián)了特定抗體結(jié)合蛋白（如 Protein A 或 Protein G）的固相載體，通過離心或磁分離等手段，就能將復合物從復雜的細胞裂解物中高效分離出來。與其他蛋白質(zhì)分離技術(shù)相比，免疫沉淀技術(shù)具有獨特優(yōu)勢。例如，相較于傳統(tǒng)的親和層析，免疫沉淀對低豐度蛋白的捕獲能力更強，能在復雜背景下精細富集目標蛋白。同時，它能更好地保留蛋白質(zhì)的天然狀態(tài)及相互作用關系，這對于研究蛋白質(zhì)復合物的組成與功能至關重要。在藥物研發(fā)領域，免疫沉淀技術(shù)發(fā)揮著關鍵作用。通過研究藥物靶點蛋白與其他蛋白的相互作用，科學家可以深入了解藥物的作用機制。Protein A/G 免疫沉淀為蛋白質(zhì)組學研究開辟道路，推動生命科學進展。北京IP免疫沉淀技術(shù)服務
源于免疫學原理的免疫沉淀技術(shù)，在蛋白質(zhì)組學研究中不可或缺。上海anti Flag免疫沉淀實驗視頻
Co-IP實驗的關鍵步驟包括細胞培養(yǎng)、裂解、抗體孵育、沉淀和后續(xù)檢測。首先，需要選擇合適的細胞類型和生長條件，確保目標蛋白質(zhì)的表達和活性。其次，在細胞裂解過程中，需要選擇合適的裂解液和條件，以充分釋放細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)并保持其活性。接著，加入與目標蛋白質(zhì)特異性結(jié)合的抗體，通過孵育使抗體與蛋白質(zhì)結(jié)合形成復合物。然后，利用離心等方法將復合物沉淀下來，通過Western blot等檢測手段驗證沉淀中的蛋白質(zhì)成分。Co-IP技術(shù)在蛋白質(zhì)相互作用研究中發(fā)揮著重要作用。通過該技術(shù)，科學家們能夠揭示出許多以前未知的蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡，為理解生命活動的復雜性和多樣性提供了重要線索。例如，在信號傳導研究中，Co-IP可用于鑒定信號分子的受體和下游效應分子，從而揭示信號傳遞的完整路徑。此外，Co-IP技術(shù)還可用于研究蛋白質(zhì)在細胞周期、代謝途徑以及疾病發(fā)生和發(fā)展過程中的相互作用，為疾病的診斷和提供新的思路和方法。上海anti Flag免疫沉淀實驗視頻