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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-12-30

糖原染色:方法固定液Carnoy固定液:純酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以選用75%酒精配制1)過(guò)碘酸酒清夜配法:過(guò)碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸鈉(2.72g+蒸餾水100ml)5ml蒸餾水10ml保存于冰箱內(nèi),用棕色瓶,可用兩周.2)Schiff氏液:0.5克堿性品紅加入100毫升蒸餾水中,時(shí)時(shí)搖動(dòng)三角瓶5分鐘,使之充分溶解.冷卻至50℃后過(guò)濾加入10毫升1N鹽酸.冷卻至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸鈉,在室溫中至少靜置24小時(shí),然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒**配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml純酒精23ml4)亞硫酸水1%偏重亞硫酸蒸餾水180ml的樹膠溶解~可以選用真空滲入法來(lái)幫助底物和酶滲入細(xì)胞。福建品質(zhì)好的糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)

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醫(yī)院檢驗(yàn)中心糖原染色操作規(guī)程:1.雪夫氏試劑:400m1蒸餾水煮沸除去C02,逐漸加堿性品紅2.08溶解后,待冷卻至60℃,加1mm01兒HCl40ml,再加偏重亞硫酸鈉(NaHSO:)4g,次日加活性碳1.5g,放置半天后過(guò)濾。配好后液體為無(wú)色透明,保存于4℃冰箱中。2.過(guò)碘酸作用液:過(guò)碘酸1g溶于蒸餾水100ml中,或取過(guò)碘酸鉀(1tI04)0。698加蒸餾水100ml,微加熱使溶解,再加濃硝酸0.3m1,置冰箱中保存。3.固定液:95%乙醇90ml與甲醛10m1混勻。4.20g/l甲基綠:甲基綠2g溶于100m1蒸餾水。[操作]_x005f_x000c_(1)新鮮或陳舊血片、骨髓片于固定液內(nèi)10分鐘。(2)水洗數(shù)次后,對(duì)照片先用唾液消化30分鐘,也可在同一片,在其中間用蠟筆劃界,一半做對(duì)照,另一半做測(cè)定。(3)水洗后,滴加過(guò)碘酸數(shù)滴于涂片上,作用10分鐘后,再水洗數(shù)次。浙江口碑好的糖原染色試劑盒產(chǎn)品介紹推薦用于骨和軟骨的染色。

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糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面:PAS染色時(shí)需于暗處加蓋反應(yīng),染色時(shí)間10~20min(染色時(shí)間長(zhǎng)短取決于試劑的質(zhì)量和環(huán)境溫度,SO濃度高,染色時(shí)間適當(dāng)縮短;環(huán)境溫度高,染色時(shí)間也應(yīng)適當(dāng)縮短,反之則需適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間)。染色過(guò)程中不能接觸伊紅,以免造成顏色誤差[4]。作糖原染色時(shí),較好作消化對(duì)照,即取兩張連續(xù)切片,其中一張脫蠟至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后與不經(jīng)消化處理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如經(jīng)消化處理的切片染色陰性,不經(jīng)消化處理的切片染色陽(yáng)性,即肯定為糖原[6]。偏重亞硫酸鈉(鉀)溶液配置后,不能保存,因此,必須現(xiàn)配現(xiàn)用,用過(guò)一次即應(yīng)廢棄。各種試劑必須是化學(xué)純或者分析純。器皿、染色缸必須潔凈而干燥。

糖原pas染色液配制及使用方法:1、常規(guī)固定,常采用10%的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水。3、自來(lái)水沖洗2~3min,再用蒸餾水浸洗2次。4、入過(guò)碘酸溶液,室溫放置,一般不宜超過(guò)10min。5、自來(lái)水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。6、入SchiffReagent,置于室溫陰暗處浸染。7、自來(lái)水沖洗10min。8、入蘇木素染色液,染細(xì)胞核。9、酸性乙醇分化液分化。_x005f_x000c_10、自來(lái)水沖洗10~15min,更換蒸餾水清洗,使其返藍(lán)。11、逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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糖原染色(PAS):(1)原理:過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合,形成紫色化合物,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分鐘,流水沖洗,晾干。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘,流水沖洗,晾干。滴加雪夫液作用60分鐘,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,流水沖洗,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽(yáng)性程度和陽(yáng)性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷。對(duì)鹽基性染料有親合力,因此在HE染色中、切片上的粘液呈污穢藍(lán)色。山東咨詢糖原染色試劑盒單價(jià)

在染色過(guò)程中較好不要在玻片上貼標(biāo)簽紙。福建品質(zhì)好的糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)

糖原染色在使用過(guò)程中需要注意以下幾個(gè)方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時(shí)固定。糖原易溶于水,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,更易溶于水,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗。應(yīng)避免用水溶性固定液,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,能較好地保存糖原,但有使糖原流動(dòng)到細(xì)胞一側(cè)的現(xiàn)象,多數(shù)人認(rèn)為是由于固定劑把細(xì)胞內(nèi)的糖原推向固定劑對(duì)組織浸透的方向而造成。其他組織應(yīng)用中性福爾馬林固定為佳。組織在4℃左右溫度內(nèi)固定與保存,是針對(duì)糖的性質(zhì)和避免糖原溶于水而采取的相應(yīng)措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白,亦能白和糖原沉淀,但仍可溶于水,因此較好不單獨(dú)使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳福建品質(zhì)好的糖原染色試劑盒報(bào)價(jià)

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