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外泌體的提取、分離方法：尺寸排阻色譜法和超濾法；尺寸排阻色譜法是利用分子篩理論，較初是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小分離蛋白質(zhì)的色譜技術(shù)。該方法的主要優(yōu)點是不需要很大的離心力，從而保證了外泌體的完整性。Mol等[13]對比超高速離心和尺寸排阻色譜法得到的外泌體蛋白，結(jié)果顯示，后者得到的外泌體的蛋白豐度高于前者。這些基于過濾或尺寸排阻色譜的新方法為外泌體大規(guī)模的生產(chǎn)和臨床應(yīng)用提供了可能。超濾也是根據(jù)外泌體的尺寸將其分離出來的一種方法，超濾一般被認為是外泌體分離過程中的一個準備過程，通過超濾除去大分子和小分子的蛋白質(zhì)。不過連續(xù)的超濾可以分離出外泌體，和超高速離心相比，超濾不需要特殊的設(shè)備就可以較短時間內(nèi)分離出外泌體。但是，超濾膜對外泌體的黏附作用會降低外泌體的產(chǎn)量，并且超濾過程中施加的外力可能會使外泌體變形或者破裂。無錫正規(guī)外泌體提取試劑產(chǎn)品介紹用于外泌體提取的體液收集注意事項：抽血技巧。

密度梯度離心法該方法由于比較繁瑣，用的較少。原理是：像所有的脂質(zhì)小囊泡一樣，外泌體可以懸浮于特定密度梯度的蔗糖中，其密度范圍1.13g/ml-1.21g/ml，將要分離外泌體的樣本液體置于梯度蔗糖介質(zhì)上，隨后通過離心將外泌體分離。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時，對離心時間極為敏感。具體步驟是：收集培養(yǎng)2d的上清液。將培養(yǎng)上清液先以1500r/min離心5min除去細胞及碎片,再依次以1000×g離心10min取上清,10000×g離心30min取上清,然后用100ku超濾離心管(Millipore)濃縮至15mL,

在無菌條件下提取人體體液，并用PBS緩沖液進行稀釋，然后通過離心篩選初步去除體液中的細胞成分和細胞碎片，制成體液樣本備用；體液樣本純化：通過過濾膜對上述體液樣本進行過濾，進一步去除體液中的細胞殘片及其他雜質(zhì)，靜置10～15分鐘，留取沉淀物備用；外泌體提?。簩⑸鲜龀恋砦镉肞BS緩沖液進行懸浮，使外泌體懸浮于液體上層，然后用無菌針管吸取上層含有外泌體的液體，置于80℃儲存?zhèn)溆谩４颂崛》椒l件復(fù)雜，成本高，專利申請利用靜置不太可能把外泌體沉降下來；根據(jù)外泌體表面的特異生物化學特性通過提取試劑的特異配方把外泌體從水相中沉降下來。不同細胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標志物。外泌體的提取分離：PEG-base沉淀法。

研究初次發(fā)現(xiàn)瘧原蟲傳染小鼠血漿外泌體(exosomes)能夠壓制一些病癥血管生成，并初步闡明其分子機制。研究加深了對瘧原蟲傳染宿主所分泌的外泌體與一些病癥血管生成之間的相互作用的認識，為開發(fā)瘧原蟲傳染來源的外泌體作為一種新型抗一些病癥制劑奠定了基礎(chǔ)。研究人員選用肺病小鼠模型作為研究對象，從傳染瘧原蟲的小鼠血漿中獲得外泌體，并將這些外泌體注射到小鼠的一些病癥內(nèi)部，并與沒有瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體進行對照。研究發(fā)現(xiàn)，瘧原蟲傳染小鼠的血漿外泌體明顯壓制一些病癥血管的生成。進一步的研究發(fā)現(xiàn)，瘧原蟲傳染的小鼠血漿外泌體通過至少四種特殊的微小RNA(miR16-5p/17-5p/322-5p/497-5p)壓制血管內(nèi)皮細胞VEGF受體(VEGFR2)的表達從而阻斷血管生成的信號通路。這些發(fā)現(xiàn)加深了人們對瘧原蟲抗病機理的理解，并為瘧原蟲療法治病一些疾病的臨床研究提供進一步的理論依據(jù)。獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時。唐山外泌體提取試劑哪家便宜

外泌體的提取分離：超速離心法（差速離心）。金華正規(guī)外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨

外泌體在肺病進程中的作用：肺病細胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長。據(jù)相關(guān)報道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進一些病癥血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加，促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖，遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不普遍。金華正規(guī)外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨