無血清快速細胞凍存液凍存細胞復蘇方法：1、從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2、待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。3、離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min），移去上清液。4、清洗細胞，充分洗凈殘留凍存液。5、加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。6、鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能：胎牛血清取自牛，因此，難以應用到需要避免接觸動物源的應用領(lǐng)域。唐山正規(guī)無血清細胞凍存液產(chǎn)品介紹

細胞凍存和復蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑，會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷，引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進而促使細胞死亡。在過去的幾十年中，科研工作者將培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例配制成凍存液，并配合手工使細胞從4℃，-20℃，-80℃到液氮中逐步轉(zhuǎn)移使其達到“慢凍”的效果。但這種自制的凍存液儲存時間一般比較短，不能滿足時間跨度大的實驗項目的需求。且這樣人力和時間成本大，人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實驗結(jié)果帶來了不穩(wěn)定性。合肥鄭州無血清細胞凍存液避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞,同時另一些保護劑不能穿透細胞。

細胞凍存液是如何保護細胞的：細胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似，機體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成，但是其結(jié)構(gòu)微小復雜，內(nèi)部任何的物理損傷對于它都是致命的。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。如果將細胞懸浮在純水中，隨著溫度的降低，細胞內(nèi)外的水份都會結(jié)冰，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞而引起細胞死亡，這種因細胞內(nèi)部結(jié)冰而導致的細胞損傷稱為細胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細胞懸浮在溶液中，隨著溫度的降低，細胞外部的水分會首先結(jié)冰，從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。如果將細胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時間過長，細胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞，細胞便發(fā)生滲漏，在復溫時，大量水分會因此進入細胞內(nèi)，造成細胞死亡。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導致的細胞損傷稱為溶質(zhì)損傷或稱溶液損傷。

所含化學成分明確，無動物源性成分，可一步實現(xiàn)細胞凍存并長期在-80℃冰箱保存，保護細胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷，適用于大多數(shù)常規(guī)細胞。LiveCyteTM（LC-1602）是原代細胞及干細胞**凍存液，可進一步提高原代細胞和干細胞凍存效率。產(chǎn)品優(yōu)點1、省去繁瑣的降溫步驟，可直接放置于-80°C冰箱，節(jié)省時間和精力。2、即用型，無需現(xiàn)配，操作方便，可減少實驗中因操作引起的污染。3、在多種哺乳細胞系中經(jīng)過性能驗證，其復蘇率和活率達90%以上。無血清細胞凍存液產(chǎn)品特色：可直接存放于-80℃冰箱凍存，無需經(jīng)過費時的程序降溫過程（省時、省錢）。

干細胞無血清凍存液操作事項：使用說明：1.細胞消化和計數(shù)，用胰酶對待凍存的細胞進行消化，并對細胞進行計數(shù)。2.1000轉(zhuǎn)/min離心5分鐘（4℃），去掉上清。3.根據(jù)細胞計數(shù)的情況，加入適量的干細胞無血清凍存液，使細胞密度在1×106左右（或根據(jù)自己希望達到的細胞密度）。4.輕輕地重懸細胞（務必重懸均勻）。5.將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管（需提前做好標記或者貼上標簽）中，旋緊凍存管蓋。6.將凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒直接放入-80℃。7.第二天將細胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中。注意事項：1.用處于對數(shù)生長期的細胞進行凍存。2.控制好胰酶的消化時間，切記消化過度，會影響復蘇效果。3.重懸細胞的過程中，請務必要輕柔，以免損傷細胞，但同時也一定要充分重懸，這樣細胞在復蘇時才不會成團。4.細胞操作請注意無菌。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能：不含牛血清，無動物源組分。重慶無血清細胞凍存液廠家推薦

含血清，細胞污染(細菌、霉菌和支原體等)的風險更高。唐山正規(guī)無血清細胞凍存液產(chǎn)品介紹

胞冷凍保存方法：選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。2.按照培養(yǎng)細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數(shù)。（參考：5×105至5×106cells/ml）。3.取相當于所需細胞數(shù)的細胞懸浮液量，置于離心管中，離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去離心管中的上清液。4.加入適量的無血清型細胞凍存液于離心管中，使細胞濃度為5×105至5×106cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細胞混合液。5.將離心管中的細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。6.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。7.若研究者需要液氮保存時，可將完全凍結(jié)的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。唐山正規(guī)無血清細胞凍存液產(chǎn)品介紹