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組織免疫組化

來源: 發(fā)布時間:2024-08-29

免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對其染色結果的判斷,進而影響病理診斷,所以制作一張良好的免疫組化切片至關重要,它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調,密切配合和共同努力,病理醫(yī)生選擇抗體,設置對照,判讀結果,指導技術;而技術人員進行實驗操作,保證染色質量。在免疫組化切片的制作過程存在多個環(huán)節(jié),每一環(huán)節(jié)的失誤都可能影響檢測結果,如抗原保存,蛋白酶消化,增強技術及對抗體的管理、使用和試劑的濃度等等,因此制作一張高質量的免疫組織化學切片是多方面相互配合的結果。有沒有能做免疫組化的實驗外包公司?效果好一點的。組織免疫組化

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免疫組化染色呈陰性結果的原因有哪些?

1、抗體濃度和質量問題以及抗體來源選擇錯誤。不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結果,抗原抗體反應有前帶和后帶效應,必須摸索比較好濃度。

2、抗原修復不全,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位,以利于與抗體結合;建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數(shù)。若不行,還可高壓修復。

3、組織切片本身這種抗原含量低。

4、血清封閉時間過長。

5、DAB孵育時間過短。

6、細胞通透不全,抗體未能充分進入胞內參與反應。

7、開始做免疫組化,建議一定要首先做個陽性對照片,排除抗體等問題。 甘肅細胞免疫組化注意事項臨床樣本檢測,免疫組化,英瀚斯生物專業(yè)病理。

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病理醫(yī)師日常工作中經(jīng)常說的一句話應該就是“做個免疫組化吧”;不管是臨床醫(yī)師,還是患者,他們問的多的問題則是“為什么要做免疫組化?”病理醫(yī)師通過“特殊染色”來進行細胞的識別。這一做法的依據(jù)是特定細胞和組織中的成分不同、則化學性質不同,通過染色的方法則可以呈現(xiàn)不同顏色。不過,由于組織固定或儲存等,會造成相應物質的活性降低甚至消失,因而限制了特殊染色方法的應用。隨著免疫學研究的進展,根據(jù)抗原與相應抗體間特異性結合的性質,則有了現(xiàn)在免疫組化的方法:不同細胞、不同組織中抗原有一定差異,抗體與被測組織中的特定抗原結合,進而通過一定顯色方法將結合的抗體顯示出來。如有相應顯色,則證實可能有被測抗原;無顯色則可能無被測抗原。當然,這一方法中需注意相應的“例外”,如抗體的非特異性結合、非特異性顯色,則容易造成“假陽性”;或者雖有相關抗原、但所用抗體與該抗原并未結合等,則容易造成“假陰性”。隨著免疫組化的應用經(jīng)驗的增加,這些問題在常規(guī)應用中盡量得以避免,前者如各種顯色方法的優(yōu)化;后者如抗原修復方法的優(yōu)化、新型抗體開發(fā)及選擇。

免疫組化的局限性,可能會有假陽性。陽性信號定位不正確即為假陽性,包括著色不勻、背景著色、邊緣效應,另外組織的某些特定成分也能導致假陽性結果。假陽性可能的原因有:(1)一抗?jié)舛燃耙豢故欠袷В贵w有一個合適的濃度范圍且必須在有效期內使用,過期的抗體或者不著色,或者背景著色,形成假陽性;(2)試劑未充分覆蓋組織,組織邊緣的試劑易干濃度較組織中間高致深染;(3)抗體孵育時間過長,由于室溫的影響夏季孵育時間稍短,冬季孵育時間稍長;(4)操作過程中組織變干,造成組織邊緣收縮或損壞形成偽影,產(chǎn)生假陽性;(5)3,3'-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色時間太長,DAB宜現(xiàn)配現(xiàn)用,配制時間比較好在30min以內;(6)由于胞漿里含有較多的蛋白質,因此間質和胞漿中出現(xiàn)很多非特異性的染色,如內源性酶血紅蛋白、肌紅蛋白等造成的著色,可以通過血清封閉解決;乳腺cancer組織中的脂肪細胞、淋巴細胞也會產(chǎn)生非特異性的染色;(7)非特異性抗體吸附常見于壞死組織中,使壞死組織呈較高的背景染色,在免疫組化中應避免選擇壞死組織較多的蠟塊。免疫組化檢測經(jīng)驗總結!

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確定cancer分期,免疫組化技術應用于臨床可以進行處理哦,英瀚斯生物為您處理。cancer分期是判斷預后的一個指標,與是否浸潤、有無淋巴管或血管侵襲密切相關,而通過免疫組化方法可以判斷cancer是否浸潤、有無淋巴管或血管侵襲。層黏連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可以清楚的顯示基膜的主要成分,用于區(qū)分原位*和浸潤*,一旦上皮性*突破基膜為浸潤,未突破基膜為原位;顯示血管和淋巴管內皮細胞的標記物第八因子相關蛋白、D2-40等則可清楚顯示cancer對血管或淋巴管的浸潤。因此對許多cancer的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤,免疫組化結果作為主要的鑒別依據(jù)。免疫組化IHC詳細介紹!組織免疫組化

免疫組化流程是什么樣的?組織免疫組化

免疫組化臨床應用對“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤,在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細胞的起源特征不能分類,初步區(qū)分組織學類型用非特異性抗體,在其基礎上再選用特異性抗體做進一步鑒定。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,有時淋巴瘤可以表達上皮膜抗原,一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白,這同時也強調了在cancer診斷中應使用一組抗體而不是單個抗體。如果您有實驗外包的需求,可以與我們南京英瀚斯生物進行聯(lián)系,我們也有做免疫組化的服務!組織免疫組化

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