了解泊松分布，我們先要從二項式分布說起，二項式分布是一個離散概率分布，它給出了m次試驗中k次成功的可能性，每次試驗的概率為p，例如當擲骰子時，二項分布給出了在10次試驗中恰好有7次擲出4的概率。在數(shù)字PCR的情況中，投擲骰子類似于將一個目標實體隨機“投擲”到一組分區(qū)中，當目標落在選定的分區(qū)中時，就是成功。如果有n個分區(qū)，并且分區(qū)過程是完全隨機的，則目標出現(xiàn)在所選分區(qū)中的概率為1/n。該試驗重復m次，樣品中的每個分子一次。如下所示的二項式分布給出了k個成功的概率，即所選分區(qū)恰好包含k個分子的概率。數(shù)字PCR通常采用大量分區(qū)。當n很大，并且嘗試成功的概率(1/n)很小時，二項分布可以近似為泊松分布。通過“儀器+試劑”相互配合的方式，打出了數(shù)字PCR檢測的“組合拳”。華南地區(qū)國產(chǎn)數(shù)字PCR熒光通道
二項式分布是一個離散概率分布，它給出了m次試驗中k次成功的可能性，每次試驗的概率為p，例如當擲骰子時，二項分布給出了在10次試驗中恰好有7次擲出4的概率。在數(shù)字PCR的情況中，投擲骰子類似于將一個目標實體隨機“投擲”到一組分區(qū)中，當目標落在選定的分區(qū)中時，就是成功。如果有n個分區(qū)，并且分區(qū)過程是完全隨機的，則目標出現(xiàn)在所選分區(qū)中的概率為1/n。該試驗重復m次，樣品中的每個分子一次。更多關(guān)于PCR的相關(guān)信息，歡迎咨詢廣州雙螺旋科學儀器有限公司。珠三角一體化數(shù)字PCR技術(shù)在數(shù)字PCR賽道，塔歌生物將加速胎兒染色體非整倍體無創(chuàng)產(chǎn)前篩查注冊證的申報。
dPCR的結(jié)果統(tǒng)計方式有2種，一種是采用標記多種顏色，通過不同檢測通道分辨不同顏色和強度，再根據(jù)分散液滴的數(shù)量計算待測基因的含量；另一種采用概率統(tǒng)計的數(shù)據(jù)處理方法，即通過泊松分布的方法對結(jié)果進行分析。應(yīng)用概率統(tǒng)計分析數(shù)據(jù)和對數(shù)據(jù)處理方法的模型直接關(guān)系著結(jié)果的準確性和分析時間的長短。常用的統(tǒng)計方法是假設(shè)每個微反應(yīng)單元的體積相同，根據(jù)泊松統(tǒng)計計算拷貝數(shù)，公式為：M=-Vx1n（1-x/）其中M是目標總拷貝數(shù)量；V是微反應(yīng)單元數(shù)量；x是發(fā)光的微反應(yīng)單元數(shù)量。
dPCR在使用過程中需要特別注意體積誤差造成的結(jié)果偏差。體積誤差對于測量拷貝數(shù)濃度會產(chǎn)生偏差。目前dPCR中體積優(yōu)化方法以光學顯微鏡觀測為主。分散體積的差異會增加拷貝數(shù)結(jié)果的不確定性，Emslie等使用光學顯微鏡縱向拍照比較圖片邊緣的微小差異，考察了數(shù)字PCR系統(tǒng)中每個微孔內(nèi)和孔與孔間的體積差異對實驗結(jié)果的影響程度。Corbisier等使用微滴數(shù)字PCR對6種不同質(zhì)量分數(shù)棉籽粉質(zhì)粒DNA標準物質(zhì)[ERM-AD623a-f，濃度范圍（10~10）copies/ul]進行分析，優(yōu)化了液滴體積得到相應(yīng)校正因子，并使用該校正因子發(fā)現(xiàn)并校準了運行軟件中液滴體積不變的假設(shè)而引起的數(shù)據(jù)偏離，數(shù)據(jù)結(jié)果的一致性有明顯提高。dPCR儀器在操作中集成了前處理以減少手工移液和樣品轉(zhuǎn)移的操作，增加了通量，并在價格上具有優(yōu)勢。
由于現(xiàn)有的商業(yè)化數(shù)字PCR設(shè)備在物理上只設(shè)置了2個檢測通道，所以存在一個明顯的短板：不能同時進行多個位點的檢測。在樣品多位點的檢測中，就需要更多的起始樣品，但臨床上組織的樣品非常有限。相比之下熒光定量PCR儀上就很容易實現(xiàn)多重檢測。為了考察利用數(shù)字PCR實現(xiàn)多重檢測的可能性，英國TheInstituteofCancerResearch的研究人員以非小細胞肺相關(guān)的KRAS基因為檢測對象，在Bio-Rad的數(shù)字PCR系統(tǒng)上通過3個三重ddPCR檢測體系來實現(xiàn)9個KRAS突變位點的檢測。3D數(shù)字PCR是基于納米流體芯片進行檢測，通過一次檢測，將樣品分到數(shù)千個單獨的PCR。上海國產(chǎn)數(shù)字PCR樣品回收
數(shù)字PCR具有諸多優(yōu)點，但也存在一定的不足，如成本高、儀器操作復雜、經(jīng)濟效益低等。華南地區(qū)國產(chǎn)數(shù)字PCR熒光通道
數(shù)字PCR平臺的評價指標有：分割單元數(shù)，熒光通道數(shù)，操作復雜性和污染風險。但是重要的是檢測準確性，評估數(shù)字PCR平臺的一種方法是使用多個數(shù)字PCR平臺互相驗證，另一種方法是使用定值準確的標準物質(zhì)。目前的三代的PCR技術(shù)各有各的優(yōu)缺點，也各有各的應(yīng)用領(lǐng)域，并不是一代取代一代的關(guān)系。技術(shù)的不斷進步給PCR技術(shù)注入了新的活力，使其能解鎖一個又一個的應(yīng)用方向，使核酸檢測更方便、更準確。目前dPCR儀器的價格仍然十分昂貴，但隨著系統(tǒng)加工工藝的改進以及使用較便宜的材料，聚合成更小的體積[556]，其價格將會不斷的降低，使其應(yīng)用到更多的檢測中。華南地區(qū)國產(chǎn)數(shù)字PCR熒光通道
廣州雙螺旋科學儀器有限公司致力于精細化學品，是一家服務(wù)型的公司。公司業(yè)務(wù)涵蓋數(shù)字PCR，純水機，病理切片機，倍性分析儀等，價格合理，品質(zhì)有保證。公司秉持誠信為本的經(jīng)營理念，在精細化學品深耕多年，以技術(shù)為先導，以自主產(chǎn)品為重點，發(fā)揮人才優(yōu)勢，打造精細化學品良好品牌。在社會各界的鼎力支持下，持續(xù)創(chuàng)新，不斷鑄造高質(zhì)量服務(wù)體驗，為客戶成功提供堅實有力的支持。