熒光微球分析技術屬于化學材料發(fā)展結果，可用于細胞表面抗原的檢測、退行性神經(jīng)病變示蹤物、吞噬功能的檢測、血流分析、敏感性診斷試劑等，本文介紹了熒光微球分析技術以及熒光微球吞噬實驗的操作步驟。 熒光微球分析 技術簡介 熒光微球分析技術是近年來化學材料科學活躍發(fā)展 的產(chǎn)物，各種大小(0.2～10μm)可產(chǎn)生熒光和色彩的人工微球應運而生，目前各種材料人工合成、多種顏色和規(guī)格的熒光微球有2大類，一種是表面不帶修飾基團的微球，另一種是攜帶各種化學修飾基團，包括羧基化修飾、氨基修飾、巰基或醛巰基修飾等的微球。 銷售二乙烯基苯微球制造廠家

2.3單體法
單體聚合法是目前研究**多、被***采用的制備方法。單體聚合法是在有機單體和磁性粒子共同存在的情況下，根據(jù)不同的聚合方式加入表面活性劑、穩(wěn)定劑、引發(fā)劑等聚合制備磁性高分子微球的方法。常用的方法主要包括乳液聚合、（微）懸浮聚合、分散聚合以及活性聚合等。其中乳液聚合又分為無皂乳液聚合、Pickering乳液聚合法、種子乳液聚合、細乳液聚合法、反相乳液聚合、原位乳液聚合等。
2.3.1乳液聚合
無皂乳液聚合是指在反應過程中完全不加乳化劑或者**加入微量乳化劑(其濃度小于臨界膠束濃度(CMC))的乳液聚合過程Wu采用將通過油酸改性后的Fe3O4納米粒子與溫敏性N-異丙基丙稀醜胺在交聯(lián)劑DVB作用下，通過無培乳液聚合方法制備了具有磁場和溫度雙重相應的復合微球，該復合微球具有核殼結構，尺寸約為100nm，其比較低臨界溶解溫度(LCST)在40-45℃。Yamauchi等利用無皂乳液聚合法制備出平均粒徑達到515nm、比飽和磁化強度達到7.3A·m2/kg的磁性高分子復合微球。
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如何制作納米微球呢？ 離子交聯(lián)法是制作納米微球的基本方法之一，適用于以殼聚糖、海藻酸鈉等 為材料的納米微球。其主要原理是作為***載體的材料通過離子交聯(lián)法從乳 液中析出，同時通過氫鍵相互作用和疏水相互作用將***包埋在載體中，從 而制備成載藥微球。該方法制備條件溫和，整個過程不使用對人體有害的試 劑，也成為載藥微球的理想制備方法之一。 納米微球的典型制備方法還有“乳化-溶劑揮發(fā)法”和“微流控法”?！叭?化-溶劑揮發(fā)法”是將模型***先溶解于有機溶劑中,然后滴加到含有表面活 性劑的水相中,在均質機的高速剪切下形成油相/水相型乳液,再通過常壓或減 壓方式除去乳液分散相中的揮發(fā)性有機溶劑,使納米粒硬化,***通過冷凍干 燥從水性混懸液中收集納米粒。“微流控法”是一種在微米尺度的通道中操 控兩種或幾種互不相溶的微小體積液體,連續(xù)、可控地生產(chǎn)具有高度單分散尺 寸的單乳液滴和多重乳液液滴的技術。

微球是直徑在納米和微米尺度范圍的球型粒子。球形物體是自然界存在**穩(wěn)定的物質形態(tài)， 它是三維幾何空間理想的對稱體，也是單位體積中所有立體形態(tài)中面積**小的。自然界大 到星球如地球，小到籃球，乒乓球，玻璃珠等都是球體。 地球直徑是1.28萬千米，而籃球 直徑是0.25米，1納米等于十億分之一米，相當于一根頭發(fā)絲橫切面的六萬分之一，如果拿 納米的微球與籃球相比，就相當于籃球與地球之比例。 如此之小的納米微球材料卻是現(xiàn)代 產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要基礎。

如何制作納米微球呢？
離子交聯(lián)法是制作納米微球的基本方法之一，適用于以殼聚糖、海藻酸鈉等
為材料的納米微球。其主要原理是作為***載體的材料通過離子交聯(lián)法從乳
液中析出，同時通過氫鍵相互作用和疏水相互作用將***包埋在載體中，從
而制備成載藥微球。該方法制備條件溫和，整個過程不使用對人體有害的試
劑，也成為載藥微球的理想制備方法之一。
納米微球的典型制備方法還有“乳化-溶劑揮發(fā)法”和“微流控法”?！叭?br/> 化-溶劑揮發(fā)法”是將模型***先溶解于有機溶劑中,然后滴加到含有表面活
性劑的水相中,在均質機的高速剪切下形成油相/水相型乳液,再通過常壓或減
壓方式除去乳液分散相中的揮發(fā)性有機溶劑,使納米粒硬化,***通過冷凍干
燥從水性混懸液中收集納米粒。“微流控法”是一種在微米尺度的通道中操
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磁性高分子微球的制備
目前制備磁性高分子納米微球的方法主要分為五類，其主要包括：包埋法、原位法、單體聚合法、界面沉積法及自組裝法。
2.1包埋法
包埋法是將聚合物溶解在含有磁性超微粒子的溶液中，然后加入大量的沉淀劑，通過交聯(lián)、絮凝、霧化、沉積、蒸發(fā)等手段使高分子物質沉析在磁性粒子表面形成具有核殼結構的復合微球。高分子物質與磁性粒子主要通過范德華力、氫鍵、螯合作用或共價鍵等作用力結合。Li等通過化學共沉淀法合成納米粒子Fe3O4磁核，以殼聚糖為包裹材料包被自制的磁核，采用乳化交聯(lián)法制備了具有核-殼結構的磁性高分子微球-殼聚糖磁性微球，并偶聯(lián)肝素配基得到了一種新型親和磁性微球。所得親和磁性微球具有較窄的粒徑分布、形狀規(guī)整，粒徑在50nm左右。將磁分離技術應用于凝血酶的分離純化，得到了較好的效果（酶比活達1879.71U/mg，得率85%，純化倍數(shù)11.057，為傳統(tǒng)柱層析法的兩倍）。Chi?riuc等將含F(xiàn)e2+和Fe3+溶液逐滴加入殼聚糖的NaOH溶液中制的可用于負載頭孢霉素的磁性殼聚糖微球。
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