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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2020-04-27

這些熒光微球正廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究的多個(gè)領(lǐng)域中,如: (1)細(xì)胞表面抗原的檢測(cè),包括CD4/CD8表面抗原的***計(jì)數(shù);細(xì)胞表面低豐度表達(dá)受體的分析;骨髓移植受體內(nèi)供體紅細(xì)胞的檢測(cè);白色***抗原檢測(cè)等。 (2)退行性神經(jīng)病變示蹤物,熒光微球具有***、與神經(jīng)細(xì)胞結(jié)合時(shí)間長(zhǎng)以及受注射部位影響極小的特點(diǎn)。 (3)吞噬功能的檢測(cè),0.6~2.0μm大小的熒光微球適合于這一類的研究,如分析大鼠中性粒細(xì)胞、人橫紋導(dǎo)管細(xì)胞、小鼠腹膜巨噬細(xì)胞、人多核白細(xì)胞的吞噬功能或不同調(diào)理素調(diào)理作用對(duì)吞噬功能的影響等。 (4)血流分析,10-15 μm大小7種顏色的熒光可供研究組織中局部血流情況,如**脈管血流速率、視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜循環(huán)、肺泡微管的功能直徑定位等。 (5)敏感性診斷試劑,如替代一些已開(kāi)展應(yīng)用的微球診斷試驗(yàn):膠乳凝集試驗(yàn)、微球捕獲ELASA、雙位點(diǎn)夾心法等,它較傳統(tǒng)比色方法更為靈敏;另有新近誕生的流式微球分析技術(shù)(Cytometric Bead Array CBA)通過(guò)將不同熒光強(qiáng)度的聚苯乙烯微球包被上多種高特異性的單克隆抗體,在微球“三明治”平臺(tái)上進(jìn)行可溶性蛋白的檢測(cè),由此而使得1份微量標(biāo)本可同時(shí)1次定量分析多種可溶性蛋白,**節(jié)約了樣本量和操作時(shí)間,靈敏度也較傳統(tǒng)的ELISA長(zhǎng)沙羧基微球哪家好

2.3表面引發(fā)活性聚合法
表面引發(fā)活性活性聚合法是指通過(guò)一定的方法使自由基活性種鍵合到磁性粒子表面,然后引發(fā)單體聚合的一種方法,其比較大特點(diǎn)是可以控制聚合物分子量及得到窄分子量的聚合物,容易實(shí)現(xiàn)對(duì)磁性聚合物微粒粒徑的均一可控以及聚合物層的厚度控制及功能化。常見(jiàn)的表面引發(fā)活性聚合法主要包括:氮氧穩(wěn)定自由基(NMRP)、可逆加成斷裂鏈轉(zhuǎn)移聚合聚合法(RAFT)、原子轉(zhuǎn)移自由基聚合法(ATRP)[21]、活性開(kāi)環(huán)聚合等。
陳志軍等采用化學(xué)共沉淀法合成了Fe3O4納米粒子,然后用3-甲基丙稀酷氧基三甲氧基硅院(3-MPS)對(duì)其表面改性引入雙鍵,然后以苯乙稀為卑體,4-經(jīng)基-2,2,6,6-四甲基呢淀-1-氧化物自由基(HTEMPO)為穩(wěn)定自由基介質(zhì),采用可控“活性”自由基聚合在納米粒子表面原位引發(fā)聚合制備了粒徑為20-30nm,磁含量為62.6%的磁性聚苯乙稀復(fù)合納米粒子。
Qin先制備了含有RAFT鏈轉(zhuǎn)移劑的S-節(jié)基-S’-三甲氧基桂基丙基三硫碳酸醋(BTPT),并對(duì)共沉淀法制備的Fe3O4納米粒子表面進(jìn)行改性得到表面負(fù)載RAFT試劑的磁性納米粒子,然后在其表面引發(fā)聚乙二醇甲基丙稀酸酯聚合。由于表面聚乙二醇的生物相容性,其對(duì)牛血清蛋白,溶菌酶及球蛋白無(wú)特異性吸附,說(shuō)明其在納米顆粒在體內(nèi)有較長(zhǎng)循環(huán)時(shí)間,在***輸送和釋放等方面具有潛在的應(yīng)用。
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產(chǎn)品為水分散體系,有很好的力學(xué)性能、耐溶劑、耐各種pH環(huán)境,以及表面富含羧基/氨基和一定量的***根,在溶液中可以保持很好的穩(wěn)定性,可以適用于各種緩沖溶液。微球表面光滑、平整,比表面積大,并具有很好的均一性、單分散性和穩(wěn)定性。此類羧基/氨基微球可以較容易地將羧基/氨基與蛋白進(jìn)行共價(jià)偶聯(lián),而表面空白的聚苯乙烯微球可以與蛋白通過(guò)疏水締合作用進(jìn)行連接。在乳膠****比濁檢查、免疫熒光檢測(cè)、ELISA增強(qiáng)、乳膠凝集試驗(yàn)、免疫層析等領(lǐng)域有著廣的應(yīng)用。

利用超細(xì)的固體顆??梢源姹砻婊钚詣┓€(wěn)定地存在于油/水界面,能阻止分散的油(水)微滴再次凝聚為大液滴而分相,起到了穩(wěn)定乳液的作用。Yin等用溫和的Pickering乳液聚合法一步制備PS/Fe3O4高磁性微球。用溴化十六烷基三甲銨(CTAB)改性的Fe3O4粒子作為穩(wěn)定劑(錨定在聚合物外層),完全疏水的油酸改性的Fe3O4粒子則被包埋在微球中。
Liu等首先利用無(wú)皂乳液法制備油酸包裹的Fe3O4納米粒子,再利用種子乳液聚合法制備了P(MMA-DVB(二乙烯基苯)-GMA)/Fe3O4磁性復(fù)合微球,***在微球表面接枝聚酰胺(PAMAM)(圖1)。所得的接枝聚酰胺磁性高分子微球的比飽和磁化強(qiáng)度為4.9A·m2/kg,遠(yuǎn)低于純磁性納米粒子,分析可能是微球的殼層比較厚所致.
亞微米(50~500nm)液滴構(gòu)成的穩(wěn)定的液/液分散體系稱為細(xì)乳液,在穩(wěn)定的細(xì)乳液聚合中,細(xì)乳液液滴是主要的成核點(diǎn)即聚合場(chǎng)所,聚合前液滴的數(shù)目和大小在聚合過(guò)程中基本保持不變,決定了**終的乳膠粒的數(shù)目和尺寸,不像常規(guī)聚合由聚合動(dòng)力學(xué)決定。Zhang等[14]通過(guò)細(xì)乳液聚合法制備P(St-MMA)/Fe3O4復(fù)合微球,磁性微球的比飽和磁化強(qiáng)度達(dá)到51.0A·m2/kg,磁性Fe3O4納米粒子的含量達(dá)到61.5wt%。

乳膠微球在免疫診斷學(xué)方面有著非常廣的應(yīng)用。采用乳膠微球可以從血清、尿和腦脊液中檢測(cè)出微量的抗原或者抗體。微量的抗體可以使抗原包被的微球產(chǎn)生明顯的聚集;同樣微量的抗原也可以使抗體包被的微球產(chǎn)生一樣明顯的聚集。另外一種較常見(jiàn)的用途是將其應(yīng)用在乳膠凝集抑制試驗(yàn)中。 本公司生產(chǎn)的乳膠微球產(chǎn)品有羧基/氨基聚苯乙烯微球、羧基/氨基聚甲基丙烯酸甲酯微球和表面空白的聚苯乙烯微球三種微球。其中羧基/氨基聚苯乙烯微球和表面空白的聚苯乙烯微球的材質(zhì)為聚苯乙烯高聚物;以及羧基/氨基聚甲基丙烯酸甲酯微球的材質(zhì)為聚甲基丙烯酸甲酯。杭州羧基微球

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反相乳液聚合是制備親水性磁性聚合物微球的一種方法,其主要特點(diǎn)是將水溶性單體溶于水中,然后在乳化劑的作用分散于非極性液體中,形成W/O分散相的聚合反應(yīng)。Hong[15]等首先制備了以葡聚糖為穩(wěn)定劑的水基磁流體,苯乙稀為連續(xù)相,在Span-85和CTAB乳化劑作用下,采用反相乳液聚合方法制備了粒徑為200nm,高磁含量的復(fù)合微球。
Wang等提出了一種新的在雙乳液體系中的原位聚合技術(shù),并用該法制備了PS-HEMA磁性高分子微球。Wang等首先以溶有PS-HEMA共聚物的乙酸乙酯為油相,F(xiàn)eCl2/FeCl3溶液為內(nèi)部水相(W1),PVA-217和Na2SO4為外部水相,制備了W1/O/W2雙乳液體系。然后向上述體系添加氨水溶液,堿溶液擴(kuò)散至內(nèi)部水相與鐵離子反應(yīng)形成磁核。與傳統(tǒng)原位法相比,該法所得微球包埋率高(26.1%)和磁化強(qiáng)度大(12.2emu/g)。由于原位乳液聚合制備的聚合物納米粒子具有顆粒尺寸小、分布均勻、分散穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn),逐漸引導(dǎo)著乳液聚合新的發(fā)展方向。
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