培養(yǎng)基配置原則:滅菌處理,要獲得微生物純培養(yǎng),必須避免雜菌污染,因此對所用器材及工作場所進行消毒與滅菌。對培養(yǎng)基而言,更是要進行嚴格的滅菌。對培養(yǎng)基一般采取高壓蒸汽滅菌,一般培養(yǎng)基用1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的。在高壓蒸汽滅菌過程中,長時間高溫會使某些不耐熱物質遭到破壞,如使糖類物質形成氨基糖、焦糖,因此含糖培養(yǎng)基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分鐘進行滅菌,某些對糖類要求較高的培養(yǎng)基,可先將糖進行過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合;長時間高溫還會引起磷酸鹽、碳酸鹽與某些陽離子(特別是鈣、鎂、鐵離子)結合形成難溶性復合物而產生沉淀??s短冷卻時間可加速后續(xù)分裝、倒平板等操作。廣東培養(yǎng)基制備器報價
培養(yǎng)基配制方法:正確制備培養(yǎng)基是微生物檢驗的較基礎步驟之一,使用脫水培養(yǎng)基和其他成分,尤其是含有有毒物質(如膽鹽或其他選擇劑)的成分時,應遵守良好實驗室規(guī)范和生產廠商提供的使用說明。培養(yǎng)基的不正確制備會導致培養(yǎng)基出現質量問題。使用商品化脫水合成培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基時,應嚴格按照廠商提供的使用說明配制。如重量(體積)、pH、制備日期、滅菌條件和操作步驟等。實驗室使用各種基礎成分制備培養(yǎng)基時,應按照配方準確配制,并記錄相關信息,如:培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個成分物質含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實施的方式、溫度及時間)、配置日期、人員等,以便溯源。廣東培養(yǎng)基制備器報價培養(yǎng)基制備器功能強大的加熱器,能夠迅速加熱!
培養(yǎng)基中血清的質量標準:血清質量高低取決于兩方面因素:一是取材對象,二是取材過程。用于取材的動物應健康無病并且在指定的出生天數之內,取材過程應嚴格按照操作規(guī)程執(zhí)行,制備出的血清要經過嚴格的質量鑒定?!队脛游锛毎w外培養(yǎng)生產生物制品規(guī)程》中的要求:牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當的監(jiān)測系統(tǒng)。有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。證明所用牛血清中不含對所生產疫苗病毒的抑制物。血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。對細胞有良好的支持繁殖作用。
培養(yǎng)基準備器的滅菌:培養(yǎng)基準備器能夠保證快速溫和的制備標準和高敏感性培養(yǎng)基。的加熱冷卻系統(tǒng)加上均勻的攪拌,大程度上減低了對培養(yǎng)基的熱應力,保證了培養(yǎng)基的營養(yǎng)性。培養(yǎng)基準備器的操作高度安全:滅菌開始前,會有一個程序自動檢查整個系統(tǒng)的氣密性,例如:鍋蓋的密封圈是否完好,這能夠避免培養(yǎng)基在滅菌過程中突然漏氣引起卸壓,此外,培養(yǎng)基準備器有4個溫度/壓力檢測器,保證用戶及工作環(huán)境的高度安全。鍋蓋上裝有**的過壓安全保護裝置,在電子檢測系統(tǒng)失效時,自動卸壓以保障安全。投資一臺高性能制備器可明顯降低實驗失敗率,長期節(jié)省時間和成本。
培養(yǎng)基配制:配制用水,培養(yǎng)基的大部分是水,所以水的質量直接影響培養(yǎng)基的質量。按Waymouth標準,水的電阻應為200萬歐姆,一般實驗室里以玻璃蒸餾器制備的雙蒸水或三蒸水可以符合使用條件。培養(yǎng)基:培養(yǎng)基有天然、人工兩種。一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養(yǎng)基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調pH至7.2-7.4,若pH值超過7.6或遠低于6.8,則大多數細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。血清:培養(yǎng)中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高壓滅菌,無菌的小牛血清需在56℃水浴30分鐘滅活補體,置4℃冰箱存放待用。配制時含量視培養(yǎng)細胞種類、時間而定,一般用10—15%。由于血清成分復雜、條件不易控制,可選用無血清培養(yǎng)基。**兼容外接冷卻**:如支持冷水浴槽或快速轉移至冷卻模塊。福建進口培養(yǎng)基制備器
**小規(guī)模實驗室**:選擇帶高效加熱/冷卻功能的臺式培養(yǎng)基制備儀。廣東培養(yǎng)基制備器報價
根據培養(yǎng)基的用途來區(qū)分,可分為選擇培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。a.選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質以殺死或壓抑不需要的菌種生長的培養(yǎng)基,稱之為選擇培養(yǎng)基。如鏈霉素、氯霉素等壓抑原核微生物的生長;而制霉菌素、灰黃霉素等能壓抑真核微生物的生長;結晶紫能壓抑革蘭氏陽性細菌的生長等。b.增殖培養(yǎng)基在自然界中,不同種的微生物常生活在一起,為了分離我們所需要的微生物,在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養(yǎng)物質,以增加這種微生物的繁殖速度,逐漸淘汰其它微生物,這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基,這種培養(yǎng)基常用于菌種篩選和選擇增菌中。在某種程度上講,增殖培養(yǎng)基也是一種選擇培養(yǎng)基。c.鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學藥品,使難以區(qū)分的微生物經培養(yǎng)后呈現出明顯差別,因而有助開快速鑒別某種微生物。這樣的培養(yǎng)基稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基。廣東培養(yǎng)基制備器報價