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斑馬魚尾部脫水皺縮模型是評(píng)估化妝品保濕性能的關(guān)鍵工具。其皮膚真皮層含水通道蛋白AQP3,與人類透明質(zhì)酸合成酶HAS3協(xié)同調(diào)控水分平衡。實(shí)驗(yàn)中,將斑馬魚胚胎置于高滲氯化鈉溶液中,尾部因脫水皺縮,通過(guò)顯微鏡測(cè)量尾部面積變化并檢測(cè)aqp3、has3基因表達(dá)量。例如,某糙米發(fā)酵濾液可使斑馬魚尾部面積縮小抑制率達(dá)65%,同時(shí)aqp3基因表達(dá)量提升2.3倍,證實(shí)其強(qiáng)的效保濕能力。該模型已被納入團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn),要求陽(yáng)性對(duì)照組相對(duì)表達(dá)量需大于空白對(duì)照組2倍標(biāo)準(zhǔn)偏差,確保結(jié)果可靠性。美白化妝品斑馬魚實(shí)驗(yàn)是一種常用的科學(xué)研究方法。滋養(yǎng)功效檢測(cè)
斑馬魚胚胎因其透明性與體外受精特性,成為化妝品急性毒性檢測(cè)的關(guān)鍵工具。依據(jù)OECD TG 236標(biāo)準(zhǔn),實(shí)驗(yàn)通過(guò)將斑馬魚胚胎暴露于不同濃度受試物溶液中,觀察48小時(shí)內(nèi)的發(fā)育異常(如卵凝結(jié)、體節(jié)異常、心包水腫等)并計(jì)算半數(shù)致死濃度(LC50)。例如,某美白精華液在濃度達(dá)31.5μg/mL時(shí)導(dǎo)致50%胚胎死亡,提示其潛在急性毒性風(fēng)險(xiǎn)。該方法較傳統(tǒng)哺乳動(dòng)物實(shí)驗(yàn)周期縮短90%,成本降低80%,且符合動(dòng)物福利“3R”原則。目前,該方法已納入《化妝品安全評(píng)估技術(shù)導(dǎo)則》,被云南貝泰妮、廣州嬌蘭等企業(yè)用于原料篩選,并形成T/HPCIA 004-2022團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)。然而,斑馬魚對(duì)不溶性粉體(如散粉)的檢測(cè)存在局限性,需結(jié)合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)完善評(píng)估體系?;瘖y品原料檢測(cè)報(bào)價(jià)美白化妝品人體功效測(cè)試方法的優(yōu)勢(shì)在于其直接觀察效果。
斑馬魚原產(chǎn)于亞洲南部,經(jīng)常分布于印度、孟加拉國(guó)、尼泊爾等國(guó)家,是一種小型熱帶淡水魚,具有易飼養(yǎng)、繁殖能力強(qiáng)、發(fā)育快、受精卵透明、易于觀察等特點(diǎn)。斑馬魚作為模式生物的一部分,與人類基因組有高達(dá)87%的同源性4。自20世紀(jì)30年代以來(lái),斑馬魚被確立為發(fā)育和繁殖研究的模型四。隨著斑馬魚技術(shù)的發(fā)展,斑馬魚模型逐漸被應(yīng)用于毒理學(xué)、藥物篩選、環(huán)境污染等研究。近年來(lái),斑馬魚作為一種新興的模型被常常應(yīng)用于化妝品及其原材料的功效評(píng)價(jià)中。歐盟委員會(huì)指57%0/63/EU允許在斑馬魚胚胎和早期幼魚階段(受精后5天之前)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),而不受動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的監(jiān)管[。這是因?yàn)樵缙诎l(fā)育階段的斑馬魚胚胎幾乎沒(méi)有疼痛感,斑馬魚模型符合3R原則。2021年4月9日,國(guó)家藥監(jiān)局頒布了《化妝晶功效宣稱評(píng)價(jià)規(guī)范》,此外,國(guó)內(nèi)多項(xiàng)使用斑馬魚模型進(jìn)行化妝品功效評(píng)價(jià)的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)也被發(fā)布,這些舉措使得斑馬魚逐漸成為了化妝品領(lǐng)域高度認(rèn)可的評(píng)價(jià)模型之一間。
糖化反應(yīng),又稱美拉德反應(yīng),其晚期糖基化產(chǎn)物也被稱為AGEs,AGEs隨著年齡不斷累積,一方面會(huì)通過(guò)改變真皮ECM的功能使細(xì)胞形態(tài)改變,另一方面會(huì)通過(guò)ji活下游信號(hào)通路,影響細(xì)胞、組織功能,促進(jìn)皮膚衰老。具有抗糖基化活性的天然化合物可能具有較大的抗老潛力。糖基化誘導(dǎo)劑甲基乙二醛(MGO)可誘導(dǎo)糖基化產(chǎn)物的產(chǎn)生,在MGO造模的情況下,SHIN等人利用離體皮膚研究了沒(méi)食子酸甲酯的抗糖化作用,沒(méi)食子酸甲酯通過(guò)降低羧甲基賴氨酸(CML)的表達(dá)、刺激纖維蛋白I的表達(dá)來(lái)發(fā)揮其抗糖化作用[57。另一項(xiàng)在離體皮膚中的研究表明,氨基胍、葛根素、綠原酸可促進(jìn)纖維蛋白1的產(chǎn)生和抑制CML的產(chǎn)生,這表明這些活性成分具備抗氧化和抗糖化的功效[58]。此外,與MGO處理相比,水飛薊花提取物水飛薊賓涂抹8天,可明顯降低皮膚外植體中CML的表達(dá)??梢允褂蔑@微鏡或圖像分析軟件來(lái)定量評(píng)估斑馬魚的美白效果。
斑馬魚作為繼大小鼠后的第三模式生物,其與人類基因同源性高達(dá)87%,皮膚結(jié)構(gòu)與人類高度相似,且胚胎透明、發(fā)育周期短,成為化妝品功效評(píng)價(jià)的理想模型。根據(jù)《化妝品監(jiān)督管理?xiàng)l例》及國(guó)際3R原則,出生5天內(nèi)的斑馬魚胚胎不屬于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)范疇,可替代哺乳動(dòng)物測(cè)試,明顯降低倫理爭(zhēng)議和實(shí)驗(yàn)成本。斑馬魚檢測(cè)具備高通量、可視化、高效率三大優(yōu)勢(shì):?jiǎn)未螌?shí)驗(yàn)可處理數(shù)百條胚胎,結(jié)果通過(guò)顯微鏡或熒光標(biāo)記實(shí)時(shí)觀測(cè);實(shí)驗(yàn)周期只需3-7天,相比人體臨床測(cè)試縮短90%以上時(shí)間;成本只為傳統(tǒng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的1/10,尤其適用于原料篩選、配方優(yōu)化等早期研發(fā)階段。美白化妝品人體功效測(cè)試的發(fā)展可以推動(dòng)行業(yè)的規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化,促進(jìn)行業(yè)的健康發(fā)展?;瘖y品功效原料測(cè)試
隨著社會(huì)的發(fā)展和人們對(duì)美的追求,美白化妝品在市場(chǎng)上越來(lái)越受歡迎。滋養(yǎng)功效檢測(cè)
在“一白遮百丑”的審美趨勢(shì)下,美白類化妝品市場(chǎng)持續(xù)火熱,但產(chǎn)品實(shí)際功效參差不齊。環(huán)特人體功效實(shí)驗(yàn)室推出的人體淡斑美白功效測(cè)試方案,旨在以科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牧鞒虨橄M(fèi)者揭開(kāi)美白產(chǎn)品的真實(shí)效果。該方案通過(guò)嚴(yán)格篩選志愿者,將受試者后背分為試驗(yàn)側(cè)與對(duì)照側(cè),結(jié)合研究者評(píng)估、視覺(jué)評(píng)估及儀器測(cè)量等多元手段,對(duì)產(chǎn)品使用前后的皮膚黑色素含量、ITA值等關(guān)鍵指標(biāo)進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。從D0到D28的28天周期內(nèi),通過(guò)5個(gè)關(guān)鍵時(shí)間節(jié)點(diǎn)的精細(xì)數(shù)據(jù)采集,不僅能直觀展現(xiàn)產(chǎn)品的短期即時(shí)效果,更能追蹤長(zhǎng)期改善情況,為化妝品企業(yè)提供可靠的功效驗(yàn)證,也為消費(fèi)者選購(gòu)提供科學(xué)依據(jù),推動(dòng)美白化妝品市場(chǎng)向更規(guī)范、透明的方向發(fā)展。滋養(yǎng)功效檢測(cè)