酵母文庫實驗:MAPK級聯(lián)***是植物防御病原體入侵信號傳導過程中的關(guān)鍵事件，MAPKs靶向并磷酸化調(diào)節(jié)下游基因轉(zhuǎn)錄的轉(zhuǎn)錄因子，**終響應病原菌的侵入。WRKYs轉(zhuǎn)錄因子是MAPK級聯(lián)的重要目標，在植物對各種病原體的抗性中起著關(guān)鍵作用。蘋果如何響應炭疽菌入侵，將信號傳導到細胞內(nèi)，以及哪個轉(zhuǎn)錄因子負責協(xié)調(diào)促進GLS耐受均尚不清楚。本研究在蘋果炭疽葉枯病易感品種“嘎拉”中發(fā)現(xiàn)了一個由蘋果炭疽菌******誘導的轉(zhuǎn)錄因子MdWRKY17。在6個易感蘋果種質(zhì)中，MdWRKY17表達水平***高于6個耐受蘋果種質(zhì)，同時對應的水楊酸含量降低，證實了MdWRKY17介導的水楊酸降解在GLS耐受中的關(guān)鍵作用。Gateway方法酵母雙雜交文庫構(gòu)建核系統(tǒng)與膜系。重慶酵母文庫使用

酵母雙雜交、pulldown和BiFC實驗均顯示，MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達MdJAZ1，花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達MdJAZ1/MdJAZ1，結(jié)果顯示過表達MdJAZ1抑制了MdTRB1對花青素和原花青素累積的促進作用。Pull down 實驗和熒光素酶互補成像實驗結(jié)果表明，在 MdJAZ1 存在下，MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱（圖 a-c）；外源施加 JA 可以部分恢復 MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合。對于 MdTRB1 在 JA 介導的花青素和原花青素積累中的作用機制，本研究建立了一個新的模型：MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作，增強了 MdMYB9 對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性，進而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下，MdJAZ1 與 MdTRB1 互作，干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合；在 JA 存在的條件下，MdJAZ1 被降解，MdTRB1 被釋放出來以參與后續(xù)過程。江西運用酵母文庫篩選酵母文庫選歐易生物技術(shù)可靠服務(wù)高效多年經(jīng)驗。

酵母文庫實驗:本研究報道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈現(xiàn)亞功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表達，而 OsNF-YB9 主要在發(fā)育中的胚乳中表達。在擬南芥 lec1-1 中異源表達 OsNF-YB9 或 OsNF-YB7 可以彌補 lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失導致種子發(fā)育異常，種子變長、變窄、變薄，堊白率較高。此外，osnf-yb9 中淀粉合成相關(guān)基因的表達紊亂。OsNF-YB9 可以與主要在水稻胚乳中表達的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突變體種子與 osnf-yb9 突變體種子都表現(xiàn)出堊白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和擬南芥中的異位表達導致了種子變小。綜上表明，OsNF-YB9 在水稻種子發(fā)育中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。

酵母雙雜交文庫：本研究通過藍/紅光誘導青蒿中青蒿素生物合成基因的表達，使用轉(zhuǎn)錄組分析確定了一個WRKY轉(zhuǎn)錄因子AaWRKY9，可明顯***青蒿素生物合成相關(guān)基因的表達。實驗表明AaWRKY9通過光依賴JA信號通路調(diào)節(jié)，在青蒿素生物合成中發(fā)揮重要作用，AaWRKY9通過與AaDBR2和AaGSW1的啟動子結(jié)合正向調(diào)節(jié)青蒿素的積累。此外，JA信號通路中的抑制因子AaJAZ9與AaWRKY9相互作用，并抑制其轉(zhuǎn)錄***活性，而在MeJA存在情況下，AaJAZ9被降解，AaWRKY9的轉(zhuǎn)錄***活性增加，進而促進青蒿素生物合成基因的表達。酵母雙雜交文庫結(jié)果表明，AaWRKY9有助于光和JA信號調(diào)節(jié)青蒿素的生物合成，為兩種信號途徑在植物次生代謝物合成中的整合調(diào)控提供了新見解。酵母雙雜交技術(shù)服務(wù)酵母雙雜交文庫構(gòu)建。

母文庫實驗由歐易生物完成。2021年3月16日，寧波大學陳劍平院士、孫宗濤研究員為共同通訊作者，在PNAS雜志（IF:9.412）在線發(fā)表了題為“AclassofindependentlyevolvedtranscriptionalrepressorsinplantRNAvirusesfacilitatesviralinfectionandvectorfeeding”的研究論文，深入報道了在不同植物RNA病毒中一種***存在的、通過劫持茉莉酸信號途徑以協(xié)同促進病毒傳播和介體昆蟲攝食的新機制。植物病毒基因組通常*編碼少數(shù)幾個蛋白，它們必需依賴寄主植物才能完成自身的侵染和增殖。因此植物病毒往往通過其編碼的蛋白來劫持或者利用寄主因子來實現(xiàn)自身的復制，并在植物體內(nèi)傳播，產(chǎn)生系統(tǒng)性***。酵母雜交技術(shù)兼具通量高、結(jié)果直觀、操作簡易，重復性好的優(yōu)勢。青海篩庫酵母文庫

酵母文庫"酵母"和"文庫"有什么不同。重慶酵母文庫使用

目前，歐易生物負責該水稻轉(zhuǎn)錄因子文庫的維護和保存工作，并對廣大水稻科研工作者提供轉(zhuǎn)錄因子篩選服務(wù)。如去年歐易生物助力中國科學院分子植物科學***創(chuàng)新中心的王二濤老師應用該文庫對水稻-叢枝菌根進行了深入研究，成功構(gòu)建了水稻-叢枝菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，結(jié)果發(fā)表于《Cell》封面。截至文章發(fā)表，該文庫已收錄了1683個水稻轉(zhuǎn)錄因子，隸屬于54個家族，覆蓋預測的水稻轉(zhuǎn)錄因子總量的70%。文庫中水稻轉(zhuǎn)錄因子的a基因信息來源于PlantTFDB和KOME數(shù)據(jù)庫。文庫載體使用pGADT7，酵母菌株使用Y187，每一個轉(zhuǎn)錄因子菌株**保存于96孔板中。重慶酵母文庫使用

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