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廣東酵母文庫質(zhì)量

來源: 發(fā)布時間:2023-03-07

酵母文庫實驗:本研究報道了 OsNF-YB9 和 OsNF-YB7 在水稻中呈現(xiàn)亞功能化。OsNF-YB7 主要在胚中表達,而 OsNF-YB9 主要在發(fā)育中的胚乳中表達。在擬南芥 lec1-1 中異源表達 OsNF-YB9  OsNF-YB7 可以彌補 lec1-1 缺陷。OsNF-YB9 功能缺失導致種子發(fā)育異常,種子變長、變窄、變薄,堊白率較高。此外,osnf-yb9 中淀粉合成相關(guān)基因的表達紊亂。OsNF-YB9 可以與主要在水稻胚乳中表達的蔗糖合酶蛋白激酶 SPK 相互作用。spk 敲除突變體種子與 osnf-yb9 突變體種子都表現(xiàn)出堊白增加的表型。OsNF-YB9 在水稻和擬南芥中的異位表達導致了種子變小。綜上表明,OsNF-YB9 在水稻種子發(fā)育中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。從該技術(shù)開發(fā)以來,雙雜交和三雜交報告基因數(shù)量從1個報告基因增加到了4個,降低了假陽性概率。廣東酵母文庫質(zhì)量

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酵母雙雜交、pulldown和BiFC實驗均顯示,MdTRB1可以通過其C末端與JAZ1蛋白互作。在蘋果葉片和愈傷組織中過表達MdJAZ1,花青素和原花青素的累積受到明顯抑制。在蘋果葉片和愈傷組織***表達MdJAZ1/MdJAZ1,結(jié)果顯示過表達MdJAZ1抑制了MdTRB1對花青素和原花青素累積的促進作用。Pull down 實驗和熒光素酶互補成像實驗結(jié)果表明,在 MdJAZ1 存在下,MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合減弱(圖 a-c);外源施加 JA 可以部分恢復 MdTRB1 與 MdMYB9 的結(jié)合。對于 MdTRB1 在 JA 介導的花青素和原花青素積累中的作用機制,本研究建立了一個新的模型:MdTRB1 通過與 MdMYB9 互作,增強了 MdMYB9 對下游基因的轉(zhuǎn)錄***活性,進而正向調(diào)節(jié)了 JA 介導的花青素和原花青素累積。在 JA 缺乏的條件下,MdJAZ1 與 MdTRB1 互作,干擾了 MdTRB1 與 MdMYB9 之間的結(jié)合;在 JA 存在的條件下,MdJAZ1 被降解,MdTRB1 被釋放出來以參與后續(xù)過程。

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