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10x空間轉錄組報價

來源: 發(fā)布時間:2021-11-29

1. 10x  Genomics空間轉錄組用于文庫構建的每張載玻片上有四個捕獲區(qū)域,每個捕獲區(qū)域的大小為6.5x6.5mm,包含5000個被條形碼標記的點(barcoded spots),每個點的直徑為55 μm,點和點之間中心的距離為100 μm,并且每個點都有一個barcode序列。10X Visium空間轉錄組的實驗主要分為兩部分:組織學板塊和組學板塊。組織學板塊包括樣品的包埋、切片、固定、染色及成像,記錄切片的形態(tài)學信息;組學板塊包括cDNA的合成、擴增、接頭連接和測序,記錄切片的轉錄本信息和空間位置信息 。空間轉錄組測序結果為未來人類心臟發(fā)育的研究提供重要的借鑒意義。10x空間轉錄組報價

空間轉錄組是在組織原位檢測基因表達的一種技術,與bulk RNA-seq或單細胞轉錄組測序相比,空間轉錄組避免了組織中細胞位置信息的丟失,使得我們在檢測基因表達的同時獲得基因在組織內(nèi)部的空間位置信息。已發(fā)表的關于空間轉錄組技術有Slide-seq , LCM-seq , seqFISH, MERFISH , Liver single cell zonation , Geo-seq and Tomo-seq。這些方法或是在細胞數(shù)量上限制較大,或是存在有效測序深度不足等問題。正是由于空間轉錄組可以從多維度解析生物學過程的特點,近年來關于空間轉錄組無論是在技術開發(fā),還是大規(guī)模應用或商業(yè)化,都得到蓬勃發(fā)展。


江西運用空間轉錄組只聽名字就想嘗試,不清楚空間轉錄組的原理及通過該技術究竟能拿到什么結果。

1. 空間轉錄組是一種用于從空間層面上解析RNA-seq數(shù)據(jù)的技術,從而解析單個組織切片中的所有mRNA??臻g條形碼逆轉錄oligo(dT)引物在顯微鏡載玻片表面的有序附著,使得在mRNA樣品處理和后續(xù)測序過程中位置信息的編碼和獲取成為可能。單細胞RNA測序或組織樣本RNA測序,均無法為研究人員提供精確的空間信息。通過空間轉錄組技術可獲取組織中具體的位置的轉錄信息,為研究和診斷提供有效數(shù)據(jù)支撐。10x Genomics空間轉錄組技術可以應用于免疫、發(fā)育、神經(jīng)和病理等研究方向。

盡管前傳時代的空間技術被迅速棄用,但其思想和方法是當今時代空間轉錄組學發(fā)展的基礎。在過去的 5 年中,隨著眾多新技術的出現(xiàn)和 10x 公司 Visium 技術解決方案的商業(yè)化普及,該領域得到了快速的發(fā)展。一、實驗技術有待改進。我們可以做更多的事情來改善實驗技術。例如 組織切片技術的發(fā)展、 smFISH 和 ISS 技術的實驗技術優(yōu)化、高效率的計算工具實現(xiàn)真正的 3D 空間轉錄組或者空間時序轉錄組等。二,數(shù)據(jù)庫的建立。盡管當前空間轉錄組的數(shù)據(jù)在快速地增長,但尚未有對應的數(shù)據(jù)庫來對這些數(shù)據(jù)進行匯總集成。正是由于空間轉錄組可以從多維度解析生物學過程的特點得到蓬勃發(fā)展。

空間轉錄組的方法和技術有哪些?廣義上講,現(xiàn)有的生成空間分辨轉錄組學的方法可分為四類:用于空間重建的計算策略和組學實驗的組合,使用激光捕獲顯微切割(LCM)結合高通量進行直接測量,使用熒光物質(zhì)的基于圖像的原位轉錄組學 ,以及基于寡核苷酸的空間條形碼再加上高通量。每種方法都有其優(yōu)點和缺點。空間重構的計算策略:這種計算方法可以充分利用內(nèi)在基因表達模式或共表達的趨勢,從單個細胞的大量轉錄組數(shù)據(jù)中重構細胞間的環(huán)境。然而,這些推論方法在某些情況下*呈現(xiàn)空間趨勢或特定組織的總體布局?;贚CM的方法:基于LCM的轉錄組學或基因組學成功地獲得了單個細胞的空間轉錄組,盡管其通量很低,但是在可以標記成千上萬個單個細胞位置的多路復用條形碼策略可行之前,將少量細胞的數(shù)據(jù)粗略地整合到構成***的巨大背景中,可能具有一定價值?;趫D像的原位轉錄組學:基于圖像的原位轉錄組學在很大程度上增加了可檢測區(qū)域,但也存在一些問題,例如幾種smFISH方法很難從包括信號干擾、轉錄本積累等復雜背景中提取單個細胞??臻g條形碼加高通量:費用較高且無法在單個細胞中獲得轉錄組。Cell上發(fā)表了一篇利用空間轉錄組解析人鱗狀細胞*的文章。廣西歐易生物空間轉錄組做什么

空間轉錄組學和 10X Visium 依靠這種微陣列技術,區(qū)別在于微陣列載玻片上的組織上的轉錄本信息。10x空間轉錄組報價

如果只是通過空間轉錄組或者單細胞轉錄組,研究人員在兩個樣本中均可以發(fā)現(xiàn)淋巴細胞相關基因或者淋巴細胞群,無法解釋兩個樣本預后之間的差異。但是通過空間轉錄組,就能很清晰看到兩個樣本之間的差異。作者借助空間轉錄組測序技術探究人類心臟在發(fā)育過程中的基因表達特征和細胞圖譜變化,發(fā)現(xiàn)對于每個發(fā)育階段的不同解剖區(qū)域,都有獨特的基因表達特征。結合單細胞轉錄組測序技術,作者進一步確定和豐富了胚胎心臟基因表達的空間注釋信息。 10x空間轉錄組報價

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