在現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)已成為不可或缺的工具，廣泛應(yīng)用于基因擴(kuò)增、突變檢測(cè)、基因表達(dá)分析等多個(gè)領(lǐng)域。而一款PCR Master Mix則是確保實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素之一。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)憑借其性能和獨(dú)特的產(chǎn)品特點(diǎn)，為科研工作者提供了高效、可靠的實(shí)驗(yàn)解決方案。一、酶性能Phusion Master Mix的成分是Phusion DNA聚合酶，這是一種具有高保真性的熱穩(wěn)定酶。它能夠以極高的準(zhǔn)確性復(fù)制DNA模板，錯(cuò)誤率極低，為普通Taq酶的1/500，這使得它在擴(kuò)增長(zhǎng)片段DNA或?qū)π蛄袦?zhǔn)確性要求極高的實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出色。例如，在進(jìn)行基因克隆或構(gòu)建基因文庫(kù)時(shí)，Phusion酶能夠確保擴(kuò)增產(chǎn)物的序列與原始模板高度一致，從而提高了后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功率。二、快速擴(kuò)增能力盡管Phusion酶具有高保真性，但其擴(kuò)增速度并未受到影響。它能夠在短時(shí)間內(nèi)完成長(zhǎng)片段DNA的擴(kuò)增，提高了實(shí)驗(yàn)效率。對(duì)于長(zhǎng)度在5kb以內(nèi)的DNA片段，Phusion Master Mix可以在幾分鐘內(nèi)完成擴(kuò)增，這對(duì)于需要快速獲得實(shí)驗(yàn)結(jié)果的研究人員來(lái)說(shuō)是一個(gè)巨大的優(yōu)勢(shì)。例如，在進(jìn)行高通量基因篩查或大規(guī)模樣本分析時(shí)，Phusion Master Mix能夠縮短實(shí)驗(yàn)周期，提高工作效率。Pfu DNA Polymerase的熱穩(wěn)定性：Pfu DNA Polymerase在高溫下仍保持活性，適合高溫PCR反應(yīng)。Recombinant Human ENPP-2/Autotaxin Protein,His Tag

Probe qPCR Mix (2×, Low ROX)：高特異性與低背景校正的qPCR解決方案Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 是一種為探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液，適用于需要低濃度ROX校正染料的qPCR儀器。該預(yù)混液結(jié)合了熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液、dNTPs以及低濃度ROX，能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異的基因定量檢測(cè)。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度：采用抗體修飾的熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶，有效減少非特異性擴(kuò)增，提高檢測(cè)靈敏度。低濃度ROX校正：適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器，如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。防污染系統(tǒng)：部分產(chǎn)品含有dUTP和UNG（尿嘧啶DNA糖基化酶），能夠有效降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物，防止假陽(yáng)性?？焖俜磻?yīng)：支持快速qPCR程序，可在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè)，提高實(shí)驗(yàn)效率。操作簡(jiǎn)便：2×預(yù)混液設(shè)計(jì)，只需加入引物、探針和模板即可進(jìn)行反應(yīng)，減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析：用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。病原體檢測(cè)：快速檢測(cè)病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析：通過(guò)探針?lè)▽?shí)現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR：可在同一反應(yīng)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)基因。Recombinant Human TREML2/TLT-2 Protein,His Tag在基因編輯過(guò)程中，Pfu DNA Polymerase 可用于合成高質(zhì)量的單鏈或雙鏈DNA修復(fù)模板。

產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性SYBRGreen是一種熒光染料，能夠特異性地結(jié)合到雙鏈DNA的小溝區(qū)域。在qPCR過(guò)程中，隨著DNA鏈的延伸，SYBRGreen的熒光信號(hào)不斷增強(qiáng)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)基因的實(shí)時(shí)定量。這種染料的結(jié)合特異性極高，確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。即使在低濃度的模板條件下，也能檢測(cè)到目標(biāo)基因的存在，靈敏度可達(dá)單拷貝水平。2×預(yù)混體系，操作簡(jiǎn)便該產(chǎn)品采用2×預(yù)混體系，預(yù)先將Taq酶、dNTPs、MgCl?等關(guān)鍵組分混合均勻，實(shí)驗(yàn)人員需加入引物和模板即可進(jìn)行反應(yīng)。這種預(yù)混體系簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作步驟，減少了人為誤差，同時(shí)保證了反應(yīng)體系的均一性和穩(wěn)定性。無(wú)論是初學(xué)者還是經(jīng)驗(yàn)豐富的研究人員，都能輕松上手，快速開展實(shí)驗(yàn)。低ROX參比染料，減少背景干擾ROX染料作為qPCR反應(yīng)中的參比染料，用于校正孔間熒光信號(hào)的差異。然而，過(guò)高的ROX濃度可能會(huì)引入背景熒光，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。SYBRGreenqPCRMix(2×,LowROX)采用了低濃度的ROX染料，有效降低了背景干擾，提高了熒光信號(hào)的信噪比，使得定量結(jié)果更加精確可靠。

SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus)：助力高精度定量PCR實(shí)驗(yàn)實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）是分子生物學(xué)中一種重要的技術(shù)，廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析、病原體檢測(cè)和基因分型等領(lǐng)域。SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一種專為qPCR設(shè)計(jì)的高性能預(yù)混液，憑借其獨(dú)特的配方和優(yōu)化的組分，為科研人員提供了一種高效、靈敏且防污染的解決方案。產(chǎn)品特點(diǎn)SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 的優(yōu)勢(shì)在于其優(yōu)化的配方和防污染體系。產(chǎn)品采用2×濃縮配方，包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液、SYBR Green I熒光染料以及UDG酶等關(guān)鍵組分。其中，UDG酶（尿嘧啶-DNA糖基化酶）和dUTP的加入，能夠有效降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物，從而防止前次反應(yīng)的殘余產(chǎn)物對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)的污染，顯著提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。此外，該產(chǎn)品還采用了抗體修飾的熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶，能夠在預(yù)變性步驟中釋放酶活性，有效避免引物二聚體和非特異性擴(kuò)增的發(fā)生，進(jìn)一步提升了擴(kuò)增的特異性和靈敏度。在分子生物學(xué)研究中，PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具，而Pfu Master Mix (2×)則是實(shí)現(xiàn)高保真擴(kuò)增的理想選擇。

Taq DNA聚合酶：分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶，因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力，成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)中發(fā)揮著重要作用，極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性，但缺乏3'→5'外切酶活性，這使得它在DNA合成過(guò)程中能夠快速延伸引物，同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基，便于后續(xù)的克隆操作。此外，Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定，從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來(lái)，科學(xué)家們通過(guò)對(duì)Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化，開發(fā)出多種突變體，以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如，Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性，適用于長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增。此外，Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測(cè)技術(shù)，如“MeltArray”技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡(jiǎn)化了DNA擴(kuò)增的流程，還為基因診斷、遺傳病檢測(cè)和個(gè)性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。盡管Ultra-Long Master Mix設(shè)計(jì)用于長(zhǎng)片段擴(kuò)增，但在某些情況下，可能出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增，需要通過(guò)優(yōu)化引物。Recombinant Human PD-1/PDCD1 Protein,hFc Tag

通過(guò)在常溫下抑制Taq酶活性，該預(yù)混液有效避免了非特異性擴(kuò)增形成，從而提高了PCR反應(yīng)的特異性。Recombinant Human ENPP-2/Autotaxin Protein,His Tag

Uracil-DNA Glycosylase (E. coli) (5U/μl)：高效去除尿嘧啶的分子生物學(xué)工具Uracil-DNA Glycosylase（UDG）是一種來(lái)源于大腸桿菌的重組酶，能夠高效催化DNA鏈中尿嘧啶（dU）堿基與脫氧核糖骨架之間的N-糖苷鍵水解，釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效，但對(duì)RNA或短于6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無(wú)活性。產(chǎn)品特點(diǎn)UDG酶的主要特點(diǎn)是能夠在PCR反應(yīng)中有效防止產(chǎn)物污染。通過(guò)在PCR反應(yīng)中摻入dUTP替代dTTP，生成含有dU的DNA產(chǎn)物，UDG可以特異性降解這些含dU的DNA，從而避免PCR產(chǎn)物的交叉污染。此外，UDG酶在較寬的pH范圍內(nèi)具有活性，適pH為8.0，且不需要二價(jià)陽(yáng)離子。應(yīng)用場(chǎng)景UDG酶廣泛應(yīng)用于以下領(lǐng)域：PCR產(chǎn)物防污染：通過(guò)降解含dU的PCR產(chǎn)物，防止氣溶膠污染導(dǎo)致的假陽(yáng)性結(jié)果。單核苷酸多態(tài)性檢測(cè)：用于檢測(cè)基因組中的單核苷酸變異?；蚓庉嬇c位點(diǎn)特異性突變：用于制備和處理含有dU的DNA模板。蛋白質(zhì)-DNA相互作用研究：通過(guò)去除尿嘧啶，研究DNA修復(fù)機(jī)制。在PCR反應(yīng)中，UDG酶的推薦使用濃度為0.01U/μl，通常在反應(yīng)體系中加入適量的UDG Buffer以確保比較好活性。此外，UDG酶在RT-PCR中需謹(jǐn)慎使用，因?yàn)槠淇赡芟潞铣傻腸DNA。Recombinant Human ENPP-2/Autotaxin Protein,His Tag