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江蘇漢遜酵母表達(dá)人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-06-27

DNA Marker I Plus:精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DNA Marker I Plus 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小和進(jìn)行粗略定量。它由7條線狀雙鏈DNA條帶組成,覆蓋100 bp至700 bp的范圍,特別適合用于小片段DNA的分析。產(chǎn)品特點(diǎn)組成:包含100 bp、200 bp、300 bp、400 bp、500 bp、600 bp和700 bp的DNA條帶,其中400 bp條帶加亮顯示。即用型設(shè)計(jì):已預(yù)混1×Loading Buffer,使用時(shí)無(wú)需額外添加,直接上樣。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存三個(gè)月,長(zhǎng)期保存建議置于-20℃。注意事項(xiàng)保存條件:建議低溫保存,避免反復(fù)凍融,以防止核酸酶污染導(dǎo)致條帶降解。避免加熱:使用前無(wú)需加熱,直接上樣。電泳緩沖液:及時(shí)更換電泳緩沖液,使用高質(zhì)量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。染料選擇:如果使用Goldview等染料,由于靈敏度較低,建議適當(dāng)增加Marker的上樣量。應(yīng)用場(chǎng)景DNA Marker I Plus 適用于常規(guī)PCR產(chǎn)物、基因組DNA片段等的大小鑒定,特別適合需要精確測(cè)定DNA片段大小的實(shí)驗(yàn),如基因編輯驗(yàn)證、小片段插入/缺失分析等。GoldenView II廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),如基因克隆、PCR產(chǎn)物分析和質(zhì)粒提取等。江蘇漢遜酵母表達(dá)人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)

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Tris-硼酸電泳緩沖液(10×TBE):高效、穩(wěn)定的DNA電泳緩沖液在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,瓊脂糖凝膠電泳是分析DN片段大小和純度的重要技術(shù)之一。Tris-硼酸電泳緩沖液(10×TBE)作為一種高效、穩(wěn)定的緩沖液,因其廣的適用性和經(jīng)濟(jì)性,成為實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)Tris-硼酸電泳緩沖液(10×TBE)的主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、硼酸和EDTA(乙二胺四乙酸)。這種配方能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保DNA片段的清晰分離。高效分離:TBE緩沖液具有較高的離子強(qiáng)度,適合分離小分子量的DNA片段。它能夠在電泳過(guò)程中提供穩(wěn)定的電流,確保DNA條帶清晰、分辨率高。兼容性強(qiáng):TBE緩沖液適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見(jiàn)的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。經(jīng)濟(jì)實(shí)用:10×的高濃度設(shè)計(jì)使得該緩沖液在使用時(shí)可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活稀釋,減少浪費(fèi),降低實(shí)驗(yàn)成本。穩(wěn)定性高:液體形式的TBE緩沖液在保存和使用過(guò)程中更加穩(wěn)定,只需按照說(shuō)明稀釋即可使用,無(wú)需額外配制。浙江漢遜酵母表達(dá)技術(shù)服務(wù)臨床前研究Plant Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一種專門針對(duì)植物樣本設(shè)計(jì)的高效PCR預(yù)混液,它無(wú)需提取DNA。

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λ DNA HindIII + EcoRI:精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)λ DNA HindIII + EcoRI 是一種廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),由λ噬菌體DNA經(jīng)HindIII和EcoRI兩種限制性酶完全酶切后制備而成。這種酶切產(chǎn)物包含多條不同長(zhǎng)度的DNA片段,能夠?yàn)镈NA片段的大小分析提供精確的參考。產(chǎn)品特點(diǎn)片段組成:λ DNA HindIII + EcoRI Marker 包含12-13條雙鏈DNA片段,片段大小范圍從125 bp到21,226 bp。這些片段覆蓋了從小片段到大片段的廣范圍,適用于多種DNA分析場(chǎng)景。即用型設(shè)計(jì):產(chǎn)品已預(yù)混1×Loading Buffer,可直接上樣,無(wú)需額外處理。穩(wěn)定性高:在-20℃下可長(zhǎng)期保存,室溫下也能穩(wěn)定保存6個(gè)月。使用方法預(yù)熱處理:為獲得清晰的電泳圖像,建議在65℃加熱5分鐘,然后立即冰浴3分鐘。上樣量:根據(jù)加樣孔的大小,取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。電泳條件:推薦使用1.0%的瓊脂糖凝膠,電泳電壓4-10 V/cm,電泳時(shí)間45分鐘。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,紫外燈下觀察。注意事項(xiàng)預(yù)熱的重要性:如果不進(jìn)行預(yù)熱處理,21,226 bp和3,530 bp的片段可能會(huì)結(jié)合形成24,756 bp的額外條帶,同時(shí)3,530 bp的亮度會(huì)明顯減弱

在大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)中,優(yōu)化蛋白質(zhì)的折疊和活性可以通過(guò)以下策略實(shí)現(xiàn):1.優(yōu)化表達(dá)載體:選擇具有強(qiáng)啟動(dòng)子的表達(dá)載體,如T7啟動(dòng)子,以實(shí)現(xiàn)高水平的蛋白表達(dá)。同時(shí),載體中包含的SD序列位置和轉(zhuǎn)錄終止子也會(huì)影響轉(zhuǎn)錄和翻譯效率。2.密碼子優(yōu)化:對(duì)目的基因進(jìn)行密碼子改造,提高mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率,特別是在大腸桿菌中表達(dá)真核基因時(shí)。3.融合蛋白及分子伴侶的使用:利用融合蛋白如GST、MBP等增加蛋白的可溶性表達(dá),并共表達(dá)分子伴侶如GroEL/ES、DnaK/J/GrpE等,促進(jìn)重組蛋白的翻譯后折疊加工。4.靶蛋白的定位表達(dá):使用信號(hào)肽將重組蛋白分泌到細(xì)胞周質(zhì)或胞外,周質(zhì)空間的氧化環(huán)境有利于二硫鍵的形成和硫基蛋白的正確折疊。5.表達(dá)菌株的選擇:選擇適合目的蛋白特性的菌株,例如使用Rosetta2系列補(bǔ)充稀有密碼子對(duì)應(yīng)的tRNA,或使用Origami2系列促進(jìn)二硫鍵的形成。6.誘導(dǎo)條件的優(yōu)化:包括誘導(dǎo)劑的選擇和濃度、溫度、培養(yǎng)時(shí)間和細(xì)胞密度等因素的調(diào)節(jié)。例如,在較低溫度下表達(dá)可能有助于提高蛋白的溶解性和表達(dá)水平。7.蛋白質(zhì)的折疊和修飾:對(duì)于以包涵體形式表達(dá)的蛋白,進(jìn)行重折疊和修飾,加入還原劑和折疊助劑促進(jìn)正確的折疊。重組蛋白表達(dá)技術(shù)可用于多種下游應(yīng)用,包括基因調(diào)控分析、蛋白結(jié)構(gòu)及功能分析、蛋白質(zhì)間相互作用分析等。

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酵母表達(dá)高通量篩選技術(shù)在藥物發(fā)現(xiàn)中的具體應(yīng)用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:1.蛋白質(zhì)工程和藥物篩選:酵母表面展示(YSD)技術(shù)是生物技術(shù)中的重要工具,它通過(guò)將基因型與表型聯(lián)系起來(lái),用于蛋白質(zhì)工程和高通量篩選,特別是在生物藥物發(fā)現(xiàn)和診斷領(lǐng)域中克服YSD挑戰(zhàn)的創(chuàng)新方法。2.開(kāi)發(fā)新型表達(dá)系統(tǒng):通過(guò)合成生物學(xué)技術(shù),研究人員設(shè)計(jì)并開(kāi)發(fā)了新型的酵母表達(dá)系統(tǒng),如華東理工大學(xué)蔡孟浩課題組開(kāi)發(fā)的可響應(yīng)用戶自定義信號(hào)的高效畢赤酵母蛋白表達(dá)平臺(tái),這一平臺(tái)通過(guò)簡(jiǎn)單地“插拔”已知或篩選得到的低強(qiáng)度啟動(dòng)子,實(shí)現(xiàn)對(duì)特定信號(hào)的嚴(yán)謹(jǐn)調(diào)控和高效響應(yīng)。3.疫苗開(kāi)發(fā):酵母表達(dá)系統(tǒng)被用于病毒樣顆粒(VLPs)疫苗的開(kāi)發(fā),這些VLPs因其高安全性和免疫原性,成為疫苗開(kāi)發(fā)中的重要平臺(tái)。例如,上市的VLPs疫苗Gardasil(佳達(dá)修)就是通過(guò)在酵母中表達(dá)HPV的主要衣殼蛋白L1并自組裝成VLPs。4.藥物遞送系統(tǒng):VLPs由于其內(nèi)部空腔,可作為藥物遞送載體,酵母表達(dá)系統(tǒng)在這一領(lǐng)域的應(yīng)用為藥物發(fā)現(xiàn)提供了新的策略。與傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型相比,Cre/LoxP系統(tǒng)結(jié)合病毒載體(如AAV)進(jìn)行基因編輯可以縮短實(shí)驗(yàn)周期。江蘇漢遜酵母表達(dá)人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)

基因編輯技術(shù)可以用來(lái)優(yōu)化大腸桿菌的表達(dá)系統(tǒng),提高重組蛋白的產(chǎn)量和純度。江蘇漢遜酵母表達(dá)人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)

DL10000 DNA Marker:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的“長(zhǎng)距離”標(biāo)尺在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,準(zhǔn)確測(cè)定DNA片段的大小是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一。DL10000 DNA Marker作為一種高范圍的分子量標(biāo)準(zhǔn),為研究人員提供了精細(xì)的“長(zhǎng)距離”參考,尤其適用于分析較長(zhǎng)的DNA片段。DL10000 DNA Marker是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),專門設(shè)計(jì)用于瓊脂糖凝膠電泳。它包含一系列不同長(zhǎng)度的線狀雙鏈DNA片段,覆蓋從1000 bp到10000 bp的范圍。具體條帶通常包括1000 bp、2000 bp、3000 bp、5000 bp、7000 bp和10000 bp,這些條帶的分布能夠滿足大多數(shù)長(zhǎng)片段DNA分析的需求。其中,某些條帶(如5000 bp)的亮度會(huì)更高,便于在電泳過(guò)程中快速定位和參考。DL10000 DNA Marker的條帶清晰、亮度均勻,即使在高濃度的瓊脂糖凝膠中也能保持良好的分離效果。它已經(jīng)預(yù)混了Loading Buffer,使用時(shí)只需取5-10 μL直接上樣,無(wú)需額外處理。這種即用型設(shè)計(jì)簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作流程,節(jié)省了研究人員的時(shí)間和精力。在實(shí)驗(yàn)中,DL10000 DNA Marker適用于1%-2%的瓊脂糖凝膠濃度,能夠滿足不同實(shí)驗(yàn)條件下的需求。其保存條件也非常靈活,可在-20℃長(zhǎng)期保存,融化后可在4℃保存,避免反復(fù)凍融即可。這種穩(wěn)定性使得DL10000 DNA Marker成為實(shí)驗(yàn)室中理想的常備試劑。

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