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安徽微生物基因編輯技術服務開發(fā)

來源: 發(fā)布時間:2025-07-03

除了CRISPR-Cas9技術,還有其他幾種基因編輯技術可以用于金黃色葡萄球菌的研究:1.單堿基編輯技術:這是一種新型的基因編輯技術,可以在不切割DNA雙鏈的情況下實現基因的定點突變。季泉江教授課題組與中國科學院北京基因組所韓大力研究員課題組合作,在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術,通過融合失活的Cas9蛋白(Cas9D10A)和胞嘧啶脫氨酶(APOBEC1),實現了高效單堿基編輯,有助于研究耐藥機制和開發(fā)新型手段。2.同源重組(HR)修復技術:在某些細菌中,可以通過同源重組機制對CRISPR-Cas9系統產生的雙鏈DNA斷裂進行修復,實現基因的精確編輯。例如,在谷氨酸棒桿菌中,利用CRISPR/Cas9技術結合同源重組修復模板,實現了高效的基因缺失和點突變。3.非同源末端連接(NHEJ)相關蛋白共表達:通過共表達Cas9蛋白和NHEJ相關蛋白,如連接酶LigD,可以在鏈霉菌中實現有效的基因組編輯,這種方法不依賴于同源重組,可以應用于那些同源重組效率較低的細菌。4.CRISPR干擾技術(CRISPRi):利用失活的Cas9蛋白(dCas9)阻斷基因的轉錄,從而抑制特定基因的表達。這種技術可以用于研究基因功能和調控基因表達,已經在多種細菌中得到應用。通過各種生物學活性測定方法,如補體依賴的細胞毒法(CDC)、細胞/生長因子信號通路阻斷法。安徽微生物基因編輯技術服務開發(fā)

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DNA Marker IV:精細的DNA分子量標準DNA Marker IV 是一種即用型的DNA分子量標準,廣應用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小和進行粗略定量。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,能夠為DNA分析提供精確的分子量參考。產品特點組成:DNA Marker IV 由6-7條線狀雙鏈DNA片段組成,具體片段大小包括200 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp、3000 bp、4500 bp和7000 bp。即用型設計:已預混1×Loading Buffer,使用時無需額外添加,直接上樣。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存六個月,長期保存建議置于-20℃。使用方法上樣量:建議每次取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當增加上樣量。電泳條件:推薦使用1.0%-1.5%的瓊脂糖凝膠,1×TAE或0.5-1×TBE緩沖液,電壓4-10 V/cm,電泳時間20-40分鐘。染色與觀察:電泳結束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,紫外燈下觀察。注意事項保存條件:建議低溫保存,避免反復凍融。瓊脂糖質量:電泳時應盡量選用質量好的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。染料選擇:如果使用Goldview等染料,由于靈敏度較低,建議適當增加Marker的上樣量。安徽九價HPV疫苗開發(fā)服務技術服務研發(fā)通過基因敲除、基因突變或基因添加等方法,可以精確地改變大腸桿菌基因組中的特定基因。

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DL100:助力分子生物學實驗的高效工具在分子生物學研究中,DNA Marker是實驗室中不可或缺的工具之一,它用于幫助研究人員快速、準確地分析DNA片段的大小。DL100 DNA Marker作為一款經典的分子量標準,憑借其精細的條帶分布和便捷的操作,為實驗人員提供了可靠的參考。DL100 DNA Marker是一種即用型的DNA分子量標準,已預混Loading Buffer,可直接用于瓊脂糖凝膠電泳。它包含一系列已知長度的雙鏈DNA片段,覆蓋從100 bp到10,000 bp的范圍,具體條帶大小通常為100 bp、200 bp、500 bp、1,000 bp、2,000 bp、5,000 bp和10,000 bp。其中,部分條帶(如1,000 bp或5,000 bp)會加亮顯示,便于快速定位和半定量分析。在實驗中,DL100 DNA Marker的條帶清晰、亮度均勻,能夠為研究人員提供準確的分子量參考。它不僅適用于常規(guī)的瓊脂糖凝膠電泳,還可用于非變性PAGE膠的分析,進一步拓展了其應用場景。此外,DL100的保存條件非常靈活,可在2-8℃保存3-6個月,長期保存則建議置于-20℃,避免反復凍融即可。DL100 DNA Marker的使用也非常方便。推薦上樣量為5-10 μL,適用于1%-3%的瓊脂糖凝膠濃度。

非變性上樣緩沖液是一種在進行DNA或RNA凝膠電泳時使用的試劑,主要用于保持核酸分子的天然結構,避免其在電泳過程中發(fā)生變性。以下是一些關于非變性上樣緩沖液的通用信息:1.主要成分:-甘油:增加樣品的密度,使其更容易沉入凝膠孔中。-溴酚藍:作為指示劑,顯示樣品的遷移情況。-二甲苯青:作為指示劑,顯示樣品的遷移情況。-其他成分:可能包括一些緩沖液成分,如MOPS(3-(N-嗎啉代)丙磺酸)等。2.用途:-適用于常規(guī)的雙鏈DNA、總RNA的電泳。-也可用于單鏈DNA、DNA引物、小RNA或分離純化的特定RNA的電泳。-特別適用于非變性的瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)電泳。3.使用說明:-通常按照9:1的比例將非變性上樣緩沖液與DNA或RNA樣品混合均勻。-混合后的樣品可以直接加入凝膠孔中進行電泳。4.保存條件:-一般建議在-20℃保存,可以延長有效期至2年。-短期使用時,可以存放在4℃,有效期至少一個月。5.注意事項:-避免RNase污染:操作過程中須嚴格注意避免RNase污染,特別是在處理RNA樣品時。-操作安全:使用時請戴口罩、防護手套及工作服,避免吸入或皮膚接觸。利用硫酸銨沉淀、離子交換層析和疏水相互作用層析等方法,從大腸桿菌培養(yǎng)物中提取和純化病毒樣顆粒。

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DL15000 Plus DNA Marker:大片段DNA分析的理想工具DL15000 Plus DNA Marker 是一種即用型的DNA分子量標準,廣應用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于分析和估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,覆蓋從250 bp到15,000 bp的范圍,能夠為大片段DNA的分析提供精確的參考。產品特點組成:DL15000 Plus 包含10條線狀雙鏈DNA片段,分別為250 bp、500 bp、1,000 bp、1,500 bp、2,500 bp、4,000 bp、5,000 bp、7,500 bp、10,000 bp和15,000 bp。即用型設計:已預混1×Loading Buffer,可直接上樣,無需額外處理。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在-20℃下可長期保存,室溫下也能穩(wěn)定保存6個月。使用方法上樣量:建議每次取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當增加上樣量。電泳條件:推薦使用0.6%-1.0%的瓊脂糖凝膠,電壓4-10 V/cm,電泳時間20-40分鐘。染色與觀察:電泳結束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,在紫外燈下觀察。注意事項保存條件:建議低溫保存,避免反復凍融。瓊脂糖質量:電泳時應盡量選用高質量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。電泳緩沖液:及時更換電泳緩沖液并使用新制備的凝膠,以免影響電泳結果。Ultra-Long Master Mix (2×)(With Dye)通過其獨特的酶體系和優(yōu)化配方,為長片段PCR擴增提供便捷的解決方案。天津重組人源膠原蛋白技術服務臨床前研究

采用一系列純化技術,如密度梯度離心、親和層析、離子交換層析等,從畢赤酵母培養(yǎng)物中提取和純化病毒顆粒。安徽微生物基因編輯技術服務開發(fā)

10×MOPSRNA緩沖液是一種專為RNA電泳設計的緩沖液,具有以下科研用途和特點:1.RNA電泳:-10×MOPSRNA緩沖液主要用于RNA電泳,包括甲醛變性電泳和非變性電泳。它提供了一個穩(wěn)定的pH環(huán)境,有助于RNA分子在凝膠中的有效分離。2.高分辨率:-該緩沖液具有高分辨率的特點,能夠清晰地分離不同大小的RNA分子,適用于總RNA、mRNA、小RNA等的分離和分析。3.無酶污染:-10×MOPSRNA緩沖液經過RNasefree處理,不含DNA酶和RNA酶,確保在電泳過程中不會對RNA樣品造成降解。4.使用說明:-使用時,通常將10×MOPSRNA緩沖液用DEPC處理水稀釋至1×工作濃度。例如,取100mL的10×MOPS電泳緩沖液,加入20mL37%甲醛溶液,再加入880mLDEPC水,充分混勻,配制成1×MOPS電泳緩沖液。5.保存條件:-10×MOPSRNA緩沖液應避光保存,室溫下有效期為1年。見光后緩沖液可能會變黃,但淡黃色不影響使用,顏色過深則不宜使用。6.安全操作:-操作時應穿實驗服并戴一次性手套,避免直接接觸人體或吸入體內。MOPS對人體有害或有刺激性。安徽微生物基因編輯技術服務開發(fā)

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