在EndoC-βH5細(xì)胞中檢測到所有對β細(xì)胞身份和功能重要的轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)。與成人b細(xì)胞相比，EndoC-βH5細(xì)胞中的表達(dá)水平相似（FOXA2、MNX1、NKX2.2）或更高（HOPX、MAFB、NEUROD1、PAX6、PDX1）。GLIS3、NKX6.1和MAFA在EndoC-βH5細(xì)胞中以較低水平表達(dá)EndoC-βH5細(xì)胞中表達(dá)與胰島素分泌相關(guān)的受體，包括腎上腺素(ADRA2A)、脂肪酸(FFAR1、FFAR3)、GABA(GABRB3)、胰hao xue tang素(GCGR)、生長抑素(SSTR2)和腸jiang xue tang素受體，例如胰gao xue tang素樣受體肽-1(GLP1R)和胃抑制多肽(GIPR)。重要的是，EndoC-βH5細(xì)胞中的GLP1R、GIPR和GCGR比EndoC-bH1細(xì)胞中更豐富。糖尿病細(xì)胞模型EndoC-BH5 細(xì)胞以穩(wěn)健且可重復(fù)的方式分泌胰島素以響應(yīng)葡萄糖刺激。上海胰島素啟動(dòng)子糖尿病細(xì)胞模型

EndoC-βH5GLTx、EndoC-βH5HLA-A2、EndoC-βH5等細(xì)胞可在體外在葡萄糖劑量刺激下產(chǎn)生正常的胰島素分泌反應(yīng)，對GLP-1R/GLP-1等胰島素刺激因子產(chǎn)生正常響應(yīng)，可以響應(yīng)細(xì)胞因子刺激，表達(dá)HLA-A2等T細(xì)胞受體，因此可用于糖尿病炎癥相關(guān)等多種藥物開發(fā)實(shí)驗(yàn)。EndoC-BH5細(xì)胞可批量穩(wěn)定生產(chǎn)，因此可以進(jìn)行基于siRNA的高通量篩選研究中，用于鑒定出潛在的2型糖尿病藥物靶點(diǎn)。Human cell design 構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細(xì)胞模型。通過多輪次優(yōu)化改良，獲得的功能胰腺B細(xì)胞，無限接近天然人源胰島B細(xì)胞，其胰島素分泌功能與天然細(xì)胞類似，基于PDX1/NKX6.1關(guān)鍵基因驗(yàn)證的細(xì)胞均一性達(dá)到90%以上（左圖），在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(yīng)（右圖），對GLP-1R激動(dòng)劑， Exendin4刺激產(chǎn)生明細(xì)那反饋， 且可實(shí)現(xiàn)批量化生成，實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定供應(yīng)。人胎兒胰腺組織糖尿病細(xì)胞模型批量化生產(chǎn)且純度高糖尿病細(xì)胞模型——即用型 EndoC-BH5 細(xì)胞是第三代永生化人類胰腺 B 細(xì)胞系。

HumanCellDesign的EndoC-BH5細(xì)胞系通過先進(jìn)的基因編輯技術(shù)，成功模擬了天然胰島細(xì)胞的功能和結(jié)構(gòu)。這些細(xì)胞不僅能夠在高葡萄糖環(huán)境下表現(xiàn)出胰島素分泌反應(yīng)，還能夠響應(yīng)不同的胰島素刺激劑，模擬人體胰島細(xì)胞的生理狀態(tài)。這些細(xì)胞模型為科學(xué)家們提供了寶貴的研究資源，推動(dòng)了糖尿病研究的進(jìn)展。Human Cell Design 以其技術(shù)和創(chuàng)新能力，在人源細(xì)胞模型領(lǐng)域樹立了榜樣。其開發(fā)的人源胰島β細(xì)胞模型不僅為糖尿病研究提供了強(qiáng)有力的支持，還為藥物開發(fā)和細(xì)胞治療帶來了新的希望。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和應(yīng)用的不斷擴(kuò)展，HCD 將繼續(xù)致力于推動(dòng)人源細(xì)胞模型的前沿研究，為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。

這些小鼠在 2 至 3 個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)低血糖，胰島素陽性細(xì)胞大量擴(kuò)增。這種體內(nèi)擴(kuò)增有助于維持大量增殖的胰島素細(xì)胞，并允許定義允許的培養(yǎng)條件，在這種條件下，可以在體外建立永生化細(xì)胞系。Human Cell Design（HCD）開發(fā)了一種用于在人類胎兒組織中使用靶向Zhong liu產(chǎn)生功能的人類β細(xì)胞系。在胰島素啟動(dòng)子的控制下，用表達(dá) SV40LT 的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)人類胎兒胰腺芽。Human Cell Design 開發(fā)了創(chuàng)新且安全的人類β細(xì)胞系生產(chǎn)方法。首先，將每個(gè)轉(zhuǎn)導(dǎo)的人類胎兒胰腺芽移植到 2 或 3 只 SCID 小鼠的腎被膜下，因?yàn)樵摬课皇侨祟愐认侔l(fā)育的允許部位。在 6 到 8 個(gè)月內(nèi)，所有移植的小鼠都發(fā)生了原發(fā)性胰島素瘤，這導(dǎo)致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比，原發(fā)性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發(fā)性胰島素瘤中這些高度血管化的區(qū)域分離，用在大鼠胰島素啟動(dòng)子控制下表達(dá) hTERT 的慢病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)導(dǎo)，并移植到其他 SCID 小鼠中。糖尿病細(xì)胞模型可用于胰島B細(xì)胞增殖、分化、去分化、凋亡研究。

Human Cell Design 成立于 2001 年，總部位于法國，專注于人源細(xì)胞模型開發(fā)，以助力科研和生物醫(yī)藥企業(yè)的發(fā)展。其中可作為糖尿病細(xì)胞模型的 EndoC-BH5、EndoC-BH3、EndoC-BH1 等人源胰島 B 細(xì)胞為其優(yōu)勢產(chǎn)品，這些人源胰島 B 細(xì)胞誘導(dǎo)產(chǎn)生的胰島素接近于天然胰島細(xì)胞分泌的胰島素量。人源胰島 B 細(xì)胞模型構(gòu)建技術(shù)性文章早期發(fā)表于 2011 年，相關(guān)文章總引用量達(dá)到 600+，人源胰島 B 細(xì)胞模型已經(jīng)被全球 200 多家生物醫(yī)藥和生命科研機(jī)構(gòu)作為糖尿病細(xì)胞模型使用。糖尿病細(xì)胞模型如何進(jìn)行病毒載體構(gòu)建？江蘇糖尿病細(xì)胞模型接近天然胰島素分泌

接近生理學(xué)的人類胰腺B細(xì)胞模型，具有高度動(dòng)態(tài)的葡萄糖刺激胰島素分泌和腸促胰島素調(diào)節(jié)。上海胰島素啟動(dòng)子糖尿病細(xì)胞模型

根據(jù)從嚙齒動(dòng)物β細(xì)胞獲得的數(shù)據(jù)來看，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC2A2頭次被認(rèn)為是葡萄糖感知的主要決定因素，而后來的研究表明，葡萄糖激酶(GLK)是主要決定因素。在人類β細(xì)胞中，GLK被認(rèn)為是葡萄糖感知的主要決定因素。為了克服這些限制，在HumanCellDesign中生成了新的β細(xì)胞系。EndoC-βH1是通過將表達(dá)SV40LT的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)到人類胎兒胰腺芽中來開發(fā)的。隨后將轉(zhuǎn)導(dǎo)的芽移植到SCID小鼠體內(nèi)，生成的表達(dá)SV40LT的細(xì)胞增殖并形成胰島素瘤。上海胰島素啟動(dòng)子糖尿病細(xì)胞模型