ELAREM Prime人血小板裂解液是面向未來需求的先進的細胞培養(yǎng)解決方案?;谌搜“宓慕?jīng)濟實惠的細胞生長促進劑可實現(xiàn)從動物血清添加劑到無異種細胞培養(yǎng)條件的簡單轉(zhuǎn)換。每批ELAREM Prime均由大量血小板單位生產(chǎn),以比較大限度地減少批次間的差異。ELAREM Prime支持細胞擴增,無需批間測試即可提供一致的試驗結(jié)果。ELAREM Prime只供體外實驗和研究使用(RUO),該產(chǎn)品不適合直接用于人類或動物用途。有關(guān)安全預(yù)防措施,請參閱相應(yīng)的SDS。推薦用于與FBS相比,ELAREM Prime人血小板裂解液支持間充質(zhì)干細胞(MSC)的細胞生長性能,而不會丟失表型。非靈長類細胞系的體外繁殖和維持需要根據(jù)具體情況進行測試和優(yōu)化。血清替代里有哪些生長因子?gamma射線輻照血小板裂解液好用么
凍融循環(huán)后的穩(wěn)定性:對所有的血小板裂解液不建議反復(fù)凍融超過3次(包括初始解凍),次數(shù)過多會形成較多的碎片沉淀,影響性能,因此建議***次解凍時即進行分裝。Sexton進行了內(nèi)部研究,以檢查經(jīng)歷反復(fù)凍融循環(huán)的hPL的穩(wěn)定性。雖然數(shù)據(jù)是使用Stemulate作為測試血清收集的,但基于產(chǎn)品的相似成分和相似的放行規(guī)范標準,測試結(jié)果同樣適用于nLivenPR和T-LivenPR。Sexton建議單瓶的hPL產(chǎn)品經(jīng)歷不超過三個冷凍/解凍循環(huán),包括初始解凍。內(nèi)部數(shù)據(jù)顯示,在經(jīng)過多達三個冷凍/解凍循環(huán)時,pH、滲透壓、總蛋白或細胞生長沒有顯著變化。然而,需要注意的是,單個單位hPL所經(jīng)歷的凍融循環(huán)次數(shù)越多,碎片形成的發(fā)生率就越高。建議客戶在其培養(yǎng)基產(chǎn)品中遇到碎片問題時盡可能減少冷凍/解凍循環(huán)次數(shù)。此外,建議需要三次以上冷凍/解凍循環(huán)的客戶在初次解凍時進行分裝。GMP等級血小板裂解液protocol血小板裂解物是無菌過濾的黃色澄清溶液,來自于多人份健康人血小板,裂解后經(jīng)無菌過濾制備而成。
本發(fā)明公開了一種制備血小板裂解液的方法及其應(yīng)用,制備血小板裂解液的方法其包括以下步驟:將濃縮血小板在8001000rpm的離心機下離心處理1525min,離心處理后上層為富含血小板血漿,底層為紅細胞層,將底層紅細胞層分離出;將上層的富含血小板血漿成批地充分混合均勻,采用反復(fù)凍融發(fā)充分裂解血小板;去除細胞碎片,得到很終的血小板裂解液.本發(fā)明還提供一種細胞培養(yǎng)方法,其采用上述方法所制得的血小板裂解液培養(yǎng)細胞.通過本發(fā)明的方法可將濃縮血小板中提取的血小板的裂解液率提高至95%,縮短了操作的時間,且可使用臨床過期產(chǎn)品重復(fù)開發(fā)利用.1.一種制備血小板裂解液的方法,其特征在于包括以下步驟:將濃縮血小板在800-1000rpm的離心機下離心處理15-25min,離心處理后上層為富含血小板血漿,底層為紅細胞層,將底層紅細胞層分離出;將上層的富含血小板血漿成批地充分混合均勻,采用反復(fù)凍融發(fā)充分裂解血小板;去除細胞碎片,得到很終的血小板裂解液。更多關(guān)于人血小板裂解液/血清替代相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio
為了排除肝素對于細胞增長的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關(guān)。我們對不添加防腐劑的肝素進行了相同實驗,結(jié)果對AT-MSC和BM-MSC細胞增殖抑制趨勢相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時累積細胞群體倍增指數(shù)(cPD)較高。CFU-F的塑料粘附生長性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件,在96孔板中通過有限稀釋的方法結(jié)合泊松統(tǒng)計進行CFU-F試驗,顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時明顯降低。這些結(jié)果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報道的其他研究結(jié)論一致。
血小板裂解液怎么樣使用?
Sexton的血小板裂解液系列產(chǎn)品使用干冰運輸,全程確保產(chǎn)品處于凍存狀態(tài)。接收后立即儲存在-20°C環(huán)境中,使用的時候必須使用37°C水浴解凍,而非4°C冰箱或室溫解凍方法,否則會產(chǎn)生更多碎片,影響性能。對于不立即使用的整瓶/袋解凍的血小板裂解液產(chǎn)品,建議將剩余體積制備成一次性使用的等分試樣。在滿足生物血清相容性和低溫要求的條件下,可以使用錐形管或較小的瓶子進行等分儲存。等分試樣的制備將減少血小板裂解液產(chǎn)品的冷凍/解凍循環(huán)。人源血小板裂解液是一種能有效支持間充質(zhì)干細胞等人類細胞生長的高效細胞培養(yǎng)補充劑。gamma射線輻照血小板裂解液怎樣使用
血小板裂解液使用的時候有什么注意事項嗎?gamma射線輻照血小板裂解液好用么
間充質(zhì)間質(zhì)細胞(MSCs)體外擴增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種ganran及免疫反應(yīng)的風(fēng)險,監(jiān)管機構(gòu)并不鼓勵使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應(yīng)或牛病原體ganran的風(fēng)險,有助于增強間充質(zhì)干細胞的擴增,也相對容易地根據(jù)良好的生產(chǎn)規(guī)范程序生產(chǎn),并已用于臨床應(yīng)用,因此現(xiàn)如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻1)。 血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對于一般細胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來說通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來防止凝膠形成,其中肝素很為常用。 更多關(guān)于Sexton人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!gamma射線輻照血小板裂解液好用么