基因治 療產(chǎn)品是近年來國內(nèi)外藥物研發(fā)的熱點，通常由各種病毒或非病毒載體攜帶治 療基因組成。在病毒載體中，慢病毒載體(LVs)由于其有效的將基因整合進靶細胞基因組、穩(wěn)定的基因表達等特點，被認為是蕞有希望的基因治 療載體?？紤]到慢病毒對人的病原性及相關(guān)的安全性，所使用的慢病毒載體均為復(fù)制缺陷型載體，但在病毒載體生產(chǎn)過程中可能由于同源重組或非同源重組導(dǎo)致可復(fù)制性慢病毒(RCL)的產(chǎn)生，RCL可以整合到細胞基因組中，從而導(dǎo)致原ai基因激 活，抑ai基因破壞等，因此，這類產(chǎn)品中的復(fù)制型慢病毒檢測是安全性檢測中非常重要的項目，美國FDA及中國CDE都要求在生產(chǎn)的整個過程及不同階段都要進行RCL檢測，以確保無RCL的污染。南京正揚有復(fù)制型病毒檢測試劑盒試劑盒嗎？蘇州RCL病毒檢測常見問題
南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的rcAAV復(fù)制型腺相關(guān)病毒檢測試劑盒有哪些優(yōu)點？①試劑盒經(jīng)過獨特的設(shè)計開發(fā)，可以防止PCR產(chǎn)物污染；②產(chǎn)品檢測靈敏度高；③重復(fù)性好，同一樣品重復(fù)檢測20次，CV＜15%；④檢測時間短，從樣品提取純化到出結(jié)果只需2.5h；⑤適應(yīng)性強，針對不同機型，不同實驗室條件，檢測結(jié)果穩(wěn)定；⑥可提供自動化服務(wù)，自動化完成樣品核酸提取純化；⑦貨期短，供應(yīng)快；
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《CAR-T細胞治 療產(chǎn)品質(zhì)量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》一文提到：目前RCR/RCL病毒檢測方法主要有指示細胞培養(yǎng)法、ELISA法(p24蛋白測定)、PCR/q-PCR法（通過psi-gag或VSV-G聚合酶鏈反應(yīng)）和轉(zhuǎn)錄酶活性測定法(PERT)等。其中，利用指示細胞培養(yǎng)法對生產(chǎn)過程中的病毒（上清液、病毒生產(chǎn)終末期細胞）存在的RCL進行培養(yǎng)擴增，并在培養(yǎng)終點進行重復(fù)檢測是FDA推薦的RCL檢測方法。
《CAR-T細胞治 療產(chǎn)品質(zhì)量控制檢測研究及非臨床研究考慮要點》一文提到：目前RCR/RCL病毒檢測方法主要有指示細胞培養(yǎng)法、ELISA法(p24蛋白測定)、PCR/q-PCR法（通過psi-gag或VSV-G聚合酶鏈反應(yīng)）和轉(zhuǎn)錄酶活性測定法(PERT)等。其中，利用指示細胞培養(yǎng)法對生產(chǎn)過程中的病毒（上清液、病毒生產(chǎn)終末期細胞）存在的RCL進行培養(yǎng)擴增，并在培養(yǎng)終點進行重復(fù)檢測是FDA推薦的RCL檢測方法。
用qPCR法進行rcAAV復(fù)制型腺相關(guān)病毒檢測時，出現(xiàn)擴增曲線復(fù)孔間熒光信號值降低及復(fù)孔間擴增曲線重復(fù)性差的原因可能是什么？復(fù)孔間部分曲線熒光信號值降低的現(xiàn)象比較常見，通常與反應(yīng)管內(nèi)存在氣泡相關(guān)，隨反應(yīng)溫度升高，氣泡破裂導(dǎo)致熒光信號值降低。上機前需仔細檢查反應(yīng)管內(nèi)是否有氣泡殘留。另外，針對加樣誤差引起的復(fù)孔間重復(fù)性差，實驗人員上崗前需加強培訓(xùn)并考核，移液器務(wù)必定期校準并正確掌握使用方法。此外，還需注意確保試劑與樣品混勻，離心后再上機。南京正揚有復(fù)制型逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測試劑盒嗎？
美國FDA要求對于采用γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體和慢病毒載體的產(chǎn)品，需要在整個生產(chǎn)過程及不同階段進行RCR復(fù)制型逆轉(zhuǎn)錄病毒／RCL復(fù)制型慢病毒檢測，針對載體生產(chǎn)用主細胞庫、工作細胞庫、生產(chǎn)終末細胞、載體上清液及在體外培養(yǎng)超過4天的載體轉(zhuǎn)到細胞進行檢測。針對慢病毒載體使用時RCL的檢測，除了金標準——指示細胞培養(yǎng)法，還需要選擇2種不同原理的快檢方法對其進行補充檢測。RT-PCR法具備操作便捷快速、特異性好、靈敏度高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點，是RCR/RCL補充檢測的優(yōu) 選方法。復(fù)制型慢病毒檢測請聯(lián)系南京正揚。qPCR法病毒檢測操作流程
慢病毒檢測助力CAR-T細胞醫(yī)治產(chǎn)品質(zhì)控放行。蘇州RCL病毒檢測常見問題
南京正揚生物科技有限公司 自主研發(fā)生產(chǎn) 的全自動核酸提取儀是針對生物制品核酸提取的技術(shù)平臺，內(nèi)置專業(yè)優(yōu)化的前處理程序，配套本公司的自動化前處理試劑盒和配套耗材，只需一鍵操作即可完成各類生物材料和制品中的宿主細胞、微生物、病毒因子等各類微量DNA/RNA的提取純化。只需26min即可完成樣品微量核酸的提取純化，解放雙手、縮短實驗操作時間、結(jié)果穩(wěn)定性得到保證。各相關(guān)程序已經(jīng)過多面驗證，保證前處理結(jié)果準確、穩(wěn)定。歡迎聯(lián)系！蘇州RCL病毒檢測常見問題