細(xì)胞增殖的能力是評(píng)價(jià)細(xì)胞、代謝、生理、病理狀況、細(xì)胞活性、基因毒性等的重要指標(biāo)之一，細(xì)胞增殖雖然與多種因素有關(guān)，比如細(xì)胞代謝活性、與細(xì)胞增殖相關(guān)的蛋白表達(dá)、ATP的濃度等等，但是檢測(cè)細(xì)胞增殖現(xiàn)象的*直接*準(zhǔn)確的方法就是用熒光探針直接檢測(cè)遺傳物質(zhì)DNA的合成，這種方法是研究細(xì)胞增殖、信號(hào)通路、DNA修復(fù)及分化等等方向常用的方法。目前，基于DNA的合成原理，人們*初開發(fā)了工具是BrdU染色法,但是這種方法操作耗時(shí)長(zhǎng)，往往需要過(guò)夜處理細(xì)胞，操作繁雜，比如需要DNA變性、抗原修復(fù)以及抗原抗體反應(yīng)等操作，后來(lái)在BrdU的基礎(chǔ)上，人們開發(fā)出了革命性的探針--EdU，這種方法不需要繁雜的操作，節(jié)約時(shí)間，且反應(yīng)更靈敏和準(zhǔn)確。使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒前的安全檢查。安徽哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過(guò)夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)，操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免樣品損傷，而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性北京口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的發(fā)展趨勢(shì)如何？

建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察；如果條件限制，請(qǐng)于4°C條件下避光濕潤(rùn)保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片，可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測(cè)。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)，操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免樣品損傷，而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性

EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí)，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒能給人們帶來(lái)便利嗎？

EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過(guò)一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)，其反應(yīng)原理參見(jiàn)圖1。通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記，從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒發(fā)揮的重要作用。河北如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒價(jià)格

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與BrdU方法相比，EdU檢測(cè)方法無(wú)需DNA變性，無(wú)需抗原修復(fù)，無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確，是細(xì)胞增殖檢測(cè)的比較好選擇。更準(zhǔn)確--無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來(lái)的樣品損傷，確保細(xì)胞核邊緣清晰完整；更簡(jiǎn)單--無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法，簡(jiǎn)單高效，反應(yīng)單需要幾分鐘；更靈敏--無(wú)需抗體，檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500，更容易擴(kuò)散，即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè)；更快速--無(wú)需過(guò)夜，省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟，完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí)；更兼容--對(duì)樣品幾乎無(wú)損傷，更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記，能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征安徽哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

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