EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復(fù)制的DNA分子中，通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性，適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測方法相比，EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU與T非常相似，而EdU染料只有BrdU抗體的1/500，在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無需DNA變性（酸解、熱解、酶解等），可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒多少錢？上海東寰告訴您！福建正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好

這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的，但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細(xì)胞，但由于每增殖一次熒光減弱一半，在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞，檢測靈敏度不是很高，通常*適用于流式細(xì)胞儀檢測。在進(jìn)行科學(xué)研究時，上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2'-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。安徽提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些？上海東寰告訴您。

EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實(shí)情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào)：“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同，EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成，且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理，使得組織成像更簡單易行。”細(xì)胞增殖檢測方法基于EdU與Apollo？熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測新合成的DNA，簡單，快速，準(zhǔn)確。這種檢測方法非?？焖?，且只需簡單的幾個步驟，因此也適用于高通量篩選試驗(yàn)，如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞的活力

羥基脲(Hydroxyurea)為DNA合成抑制劑，經(jīng)過10mM羥基脲提0min處理的細(xì)胞，綠色熒光陽性的細(xì)胞幾乎完全消失，因此常被用作EdU實(shí)驗(yàn)的陰性對照。配制好的Click-iT Additive Solution請根據(jù)每次用量適當(dāng)分裝后-20℃保存，避免反復(fù)凍融。Click-iT Additive Solution融化后有白色物質(zhì)析出為正?，F(xiàn)象，請上下顛倒幾次，待全部溶解后使用。溶液一旦呈現(xiàn)棕色，則說明有效成分降解，不能再使用。皂苷促滲液可以用于全血及含紅細(xì)胞的細(xì)胞懸液，以及其他含多種細(xì)胞類型的混合細(xì)胞懸液的通透。這種促滲液可以在裂解紅細(xì)胞的同時，維持白細(xì)胞的光散射特性。本試劑盒做動物實(shí)驗(yàn)時可能需要更多的EdU，請根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求用合適稀釋液稀釋后使用。有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒？

BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體，由于空間位阻，雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結(jié)合。法使用小分子標(biāo)記的疊氮化物(Azide)，無需DNA變性，操作更便捷，兼容性好，檢測結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測快速。相對于BrdU法，本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測新合成的DNA，所需時間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后，增殖的細(xì)胞呈棕色，可以用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測細(xì)胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測細(xì)胞增殖的效果圖。無EdU組觀察不到棕色染色(左側(cè)一列)；EdU(10μM)孵育2小時組有明顯的棕色染色(中間一列)；而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預(yù)處理0.5小時后，棕色染色減弱，說明DNA合成被抑制后，EdU的摻入被抑制(右側(cè)一列)。上海東寰EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域。安徽提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒評價

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上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法，但BrdU法的缺點(diǎn)是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合，導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞，影響了其他染料的結(jié)合染色，導(dǎo)致染色彌散，準(zhǔn)確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優(yōu)點(diǎn)：安全—–不使用[3H]thymidine，無放射性污染。簡單—–基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法，簡單高效，需三步：EdU孵育；細(xì)胞固定；熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。福建正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好