可復制臨床上一些疾病不常見,如放射病、毒氣中毒、烈性傳染病、外傷等。還有一些如遺傳性、免疫性、代謝性和內分泌、血液等疾病，發(fā)展緩慢、潛伏期長，病程也長，可能幾年或幾十年,在人體很難進行3世代以上的連續(xù)觀察。人們可有意選用動物種群中發(fā)病率高的動物，通過不同手段復制出各種模型，在人為設計的實驗條件下反復觀察和研究，甚至可進行幾十世代的觀察，同時也避免了人體實驗造成的傷害。折疊意義2可按需要取樣動物模型作為人類疾病的"復制品",可按研究者的需要隨時采集各種樣品或分批處死動物收集標本，以了解疾病全過程，這是臨床難以辦到的。實驗動物向小型化的發(fā)展趨勢更有利于實驗者的日常管理和實驗操作。如何使用疾病動物模型建模原理

長久以來人們發(fā)現，以人本身作為實驗對象來推動醫(yī)學的發(fā)展是困難的，臨床所積累的經驗不僅在時間和空間上存在著局限性，許多實驗在道義上和方法學上還受到種種限制。而動物模型的吸引力就在于它克服了這些不足點，其在生物醫(yī)學研究中所起到的獨特作用，正受到越來越多的科技工作者的重視。動物模型的優(yōu)越性主要表現在以下幾下方面。（一）避免了在人身上進行實驗所帶來的風險臨床上對外傷、中毒、腫痛病因等研究是有一定困難的，甚至是不可能的，如急性和慢性呼吸系統(tǒng)疾病研究進很難重復環(huán)境污染的作用。輻射對機體的損傷也不可能在人身上反復實驗。而動物可以作為人類的替難者，在人為設計的實驗條件下反復觀察和研究。南通Balbc裸鼠疾病動物模型建模動物疾病模型廣泛應用于新藥靶點發(fā)現及篩選。

即為本發(fā)明構建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發(fā)明所采用第二種技術方案的特點還在于，步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結構。步驟3中grna1、grna2的濃度均為2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射濃度為30～100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提供了pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構建方法，本發(fā)明的小鼠動物模型對于pirb基因功能的研究和在體驗證提供了良好的基礎。分離自pirb基因敲入小鼠的細胞還可以用于研究pirb發(fā)揮調節(jié)作用的下游機制。

在cns，pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明，因此迫切需要pirb的細胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究，多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide，pep)和抑制劑，或者采用慢病毒轉染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響，后者慢病毒轉染在原代細胞和在體的轉染效率比較低，使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題，我們通過crispr/cas9技術建立了pirb基因敲入小鼠，將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點，為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經系統(tǒng)的作用和機制提供了很好的工具。技術實現要素：本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動物模型。小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現與驗證。

    APOE-/-鼠左頸動脈結扎糖尿病模型目的：用APOE-/-鼠做左頸動脈結扎后注射STZ造糖尿病模型一、材料：動物：APOE-/-鼠；試劑：STZ、檸檬酸緩沖液；器械：眼科剪、眼科彎鑷、眼科剪、手術剪、手術鑷、6-0非吸收縫合線、4-0縫合線；二、頸動脈結扎模型建立：APOE-/-鼠做左頸動脈內頸支脈和外頸支脈結扎，其中外頸支脈結扎點需要保持甲狀腺支脈于左頸動脈暢通；三、糖尿病模型建立：1、檸檬酸緩沖液配制：A液：檸檬酸g+雙蒸水100ml；B液：檸檬酸三鈉g+雙蒸水100ml；A液與B液1：混合，調整PH為；2、STZ液配制：取STZ溶于檸檬酸緩沖液中，濃度為10mg/ml，um濾頭過濾，避光，現配現用，10min內使用；術前禁食12h，100mg/kg腹腔注射SZT液，連續(xù)2d；四、檢測：頸動脈組織HE。上海東寰可以做疾病動物模型建模。品牌疾病動物模型建模價格

避免了在人身上進行實驗所帶來的風險。如何使用疾病動物模型建模原理

2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升，同樣，只有2mg組有明顯升高(p＜)，如圖3所示。表3表4②體重變化：(mean±sd)，如圖4所示：2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比，大鼠體重***下降(p＜，注射第4天開始)，直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比，大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p＜)，4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量：如表5、圖5所示，2mg、6mg組大鼠在經過順鉑注射后卵巢重量相比對照組，都有不同程度縮減，其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p＜)，4mg、6mg組無明顯差異。表5④動情周期觀察(陰道涂片)：3mg組動物死亡時間早，無完整的動情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動情周期4-5天。分為四個階段，動情前期：撇圓形有核上皮細胞占絕大多數，白細胞和角化上皮細胞很少(圖a)。動情期：角化上皮細胞占多大多數，由散在增至集白細胞和有核上皮細胞很少(圖b)。動情后期：片狀角化上皮細胞，有核上皮細胞和白細胞3種都有，無太大差異(圖c)。動情間期：白細胞占絕大多數，有核上皮細胞和角化上皮細胞很少(圖d)。表6⑤病理結果：如圖7所示如何使用疾病動物模型建模原理