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河北提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-21

細(xì)胞增殖&細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ),是生物體的重要生命特征。檢測(cè)細(xì)胞在培養(yǎng)基或組織中的生長(zhǎng)速率,對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)和分化研究至關(guān)重要。在藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中也常被用于評(píng)估藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制情況。細(xì)胞增殖檢測(cè)通常是基于DNA含量或細(xì)胞代謝實(shí)現(xiàn)的,主要的研究方向?yàn)閷?duì)活細(xì)胞的代謝活性的檢測(cè)(基于WST、XTT、MTT等)及對(duì)DNA合成的檢測(cè)(基于BrdU的免疫法或EdU的點(diǎn)擊化學(xué)法),可通過(guò)體內(nèi)成像、微孔板或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)等多種技術(shù)進(jìn)行細(xì)胞示蹤。使用四唑鹽進(jìn)行代謝活性檢測(cè)通過(guò)添加四咪唑鹽到細(xì)胞中可進(jìn)行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測(cè)定。你知道EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)嗎?河北提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

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細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細(xì)胞的增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。方式:真核生物的分裂依據(jù)過(guò)程不同有三種方式,有有絲分裂,無(wú)絲分裂,減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動(dòng)物、植物、等一切真核生物中的一種*為普遍的分裂方式,是真核細(xì)胞增殖的主要方式。減數(shù)分裂是生殖細(xì)胞形成時(shí)的一種特殊的有絲分裂。多細(xì)胞生物,以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的細(xì)胞,用來(lái)補(bǔ)充體內(nèi)衰老或死亡的細(xì)胞~浙江EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好?

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EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類(lèi)似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過(guò)以上原理圖的對(duì)比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測(cè)細(xì)胞增殖,無(wú)須抗體,無(wú)變性步驟,保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡(jiǎn)單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。但是,現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒(méi)有得到細(xì)胞增殖檢測(cè)*行之有效,節(jié)約反應(yīng)時(shí)間的方法。Abbkine的EdU檢測(cè)試劑盒有兩個(gè)型號(hào),分別匹配的是兩種不同的熒光通道,細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),KTA2030,488通道;細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光),KTA2031,549通道

更準(zhǔn)確--無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來(lái)的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡(jiǎn)單--無(wú)需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無(wú)需抗體,檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè);更快速--無(wú)需過(guò)夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí);更兼容--對(duì)樣品幾乎無(wú)損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。rdU需要DNA變性后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致BrdU、Hoechst染色彌散,邊緣模糊不清;而EdU邊緣清晰完整,檢測(cè)更靈敏、更準(zhǔn)確EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒價(jià)格。

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EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過(guò)一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱(chēng)作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見(jiàn)圖1。通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)廠家。浙江哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

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    熒光試劑請(qǐng)避光保存。反應(yīng)緩沖液10X1ml催化劑溶液25x400ulTAMRA紅色熒光溶液400x25ul緩沖添加劑粉末200mgHoechstX20ul使用前須知該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)步驟(以24孔板,HK2貼壁細(xì)胞為例)EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸。河北提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒優(yōu)勢(shì)

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