EU新生RNA檢測試劑產(chǎn)品簡介細胞內(nèi)新生RNA的變化是評價細胞活性的重要指標。EU(5-Ethynyl-Uridine)是一種尿嘧啶核苷類似物,能夠在細胞RNA轉(zhuǎn)錄時期代替尿嘧啶(U)摻入新合成的RNA分子中,然后通過基于EU與熒光染料的特異性共軛反應，把熒光集團標記到新合成的含有EU的RNA分子中，這樣就可以進行較快的的熒光檢測RNA的轉(zhuǎn)錄活性。本試劑盒將直接測定細胞內(nèi)新生RNA的變化。傳統(tǒng)的檢測新生RNA的方法為以放射性同位素標記RNA等方法然后進行Southernblot進行檢測。但是這種方法需要放射性同位素標記及后續(xù)的復雜操作步驟。利用EU標記新生RNA的檢測方法不需要劇烈的RNA變性，只需溫和的細胞固定化和透化處理，能夠較好地保護細胞形態(tài)、RNA整體結(jié)構及細胞內(nèi)抗原識別位點，操作步驟更加便捷、靈敏和準確，能在細胞水**映新生RNA轉(zhuǎn)錄活性的狀況。該試劑只需要簡單的操作步驟，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡以及高內(nèi)涵篩選儀進行新生RNA的轉(zhuǎn)錄活性。試劑組分產(chǎn)品編號試劑濃度試劑量C01901EU溶液1000×40μl細胞固定液1×15ml反應緩沖液10×1ml催化劑溶液25×400μlTAMRA紅色熒光溶液400×25μl緩沖添加劑粉末200mgHoechst×20μl運輸及保存方式藍冰運輸。-20℃避光長期保存。EdU細胞增殖檢測試劑盒使用時的注意事項。福建EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商

EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面，EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應非常迅速，被稱作點擊反應(Clickreaction)，其反應原理參見圖1。通過點擊反應，新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記，從而可以使用適當?shù)臋z測設備檢測到增殖的細胞。上海咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要性。

EdU（5-溴-2-脫氧尿嘧啶）試劑盒是一種嘧啶類似物，可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比，大家不難發(fā)現(xiàn)，EdU法檢測細胞增殖，無須抗體，無變性步驟，保持細胞形態(tài)和DNA完整性，是一種簡單，可靠，省事的創(chuàng)新方法。但是，現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒有得到細胞增殖檢測*行之有效，節(jié)約反應時間的方法。Abbkine的EdU檢測試劑盒有兩個型號，分別匹配的是兩種不同的熒光通道，細胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(綠色熒光)，KTA2030，488通道；細胞增殖成像分析試劑盒（EdU法）(橘紅色熒光)，KTA2031，549通道

羥基脲(Hydroxyurea)為DNA合成抑制劑，經(jīng)過10mM羥基脲提0min處理的細胞，綠色熒光陽性的細胞幾乎完全消失，因此常被用作EdU實驗的陰性對照。配制好的Click-iTAdditiveSolution請根據(jù)每次用量適當分裝后-20℃保存，避免反復凍融。Click-iTAdditiveSolution融化后有白色物質(zhì)析出為正?，F(xiàn)象，請上下顛倒幾次，待全部溶解后使用。溶液一旦呈現(xiàn)棕色，則說明有效成分降解，不能再使用。皂苷促滲液可以用于全血及含紅細胞的細胞懸液，以及其他含多種細胞類型的混合細胞懸液的通透。這種促滲液可以在裂解紅細胞的同時，維持白細胞的光散射特性。本試劑盒做動物實驗時可能需要更多的EdU，請根據(jù)實驗需求用合適稀釋液稀釋后使用。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒發(fā)揮的重要作用。

EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預熱，然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留上海東寰告訴您EdU細胞增殖檢測試劑盒的應用范圍。北京如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家

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快速—–無需過夜，省卻抗原抗體反應。整個檢測過程只需2.5小時，縮短實驗周期。準確—–標記率高且無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來的樣品損傷，確保細胞核邊緣清晰完。靈敏—–無需抗體，檢測染料為BrdU抗體的1/500，更容易擴散，即使單個增殖細胞也能準確檢測。兼容—–對樣品幾乎無損傷，允許與多種抗體或熒光蛋白同時標記，能夠同時檢測細胞其他性狀特征。本試劑盒適用于培養(yǎng)的細胞或組織樣品，也適用于組織切片，可以檢測到細胞或組織樣本中的單個增殖細胞，也可以對細胞或組織樣本總體的細胞增殖情況進行定量分析。福建EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商