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重慶FabULOUSIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-09

為了讓所有實(shí)驗(yàn)室都能同時(shí)快速自動(dòng)消化多種抗體,Genovis的FabRICATORMagIC的設(shè)計(jì)具有靈活性,適用于一系列自動(dòng)化平臺(tái)。我們?cè)赥hermoScientific?KingFisher?純化系統(tǒng)上優(yōu)化了FabRICATORMagIC的工作流程,但它可以轉(zhuǎn)移到其他自動(dòng)化平臺(tái),如果沒有自動(dòng)化,在振動(dòng)臺(tái)上也能同樣出色地工作。消解后,將含有處理樣品的深孔板直接轉(zhuǎn)移到LC-MS的自動(dòng)進(jìn)樣器中進(jìn)行快速色譜分析,或轉(zhuǎn)移到其他分析方法進(jìn)行分析。FabRICATORMagIC與在消解緩沖液中添加0.05%聚山梨醇酯20兼容,以極大限度地減少自動(dòng)化系統(tǒng)中可能發(fā)生的純粹壓力。使用KingFisher儀器處理樣品時(shí),樣品制備非常簡(jiǎn)單。將樣品、樹脂和緩沖液移液到指定的孔或板中,然后將板放入儀器中。設(shè)計(jì)用于FabRICATORMagIC的BindIt?協(xié)議將控制每個(gè)步驟的孵育溫度和時(shí)間。為Fc聚糖分析提供了一種快速、直接的、自動(dòng)化,高通量的替代方法。重慶FabULOUSIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

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在Genovis,我們的策略是幫助客戶進(jìn)行中級(jí)(或亞基)分析,這是我們的工作,特別是我們的蛋白質(zhì)酶切產(chǎn)品。完整質(zhì)量和肽圖譜是蛋白質(zhì)表征的常用方法,我們發(fā)現(xiàn),與簡(jiǎn)單但信息有限的完整質(zhì)量和高度復(fù)雜但信息豐富的肽圖譜相比,中級(jí)方法具有優(yōu)勢(shì)。通過執(zhí)行中級(jí)描述,您可以生成從完整的質(zhì)量實(shí)驗(yàn)中獲得的所有信息,具有額外的優(yōu)勢(shì)。在對(duì)抗體進(jìn)行完整質(zhì)量分析時(shí),很難明確地識(shí)別某些修飾。質(zhì)譜儀器正在改進(jìn),可以更有效地分析更大的分子,但通過使用我們的SmartEnzymes,如IdeS,可以將抗體分解成更小的片段,這提高了這些實(shí)驗(yàn)可以執(zhí)行的分辨率,因此,增加了鑒定修飾的信心。此外,你不僅能夠更好地識(shí)別修改,而且你能夠?qū)⑺鼈兌ㄎ坏降鞍踪|(zhì)上的單個(gè)結(jié)構(gòu)域,這是你在完整水平上無法做到的。上海FabULOUSIdeS蛋白酶Genovis的FabRICATOR(IdeS) MagIC 以較少的用戶交互減少實(shí)驗(yàn)和操作時(shí)間。

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與IdeS不同。Genovis的IgASAPSub1是一種IgA1特異性酶,可在鉸鏈上方的一個(gè)特定位點(diǎn)消化人IgA1,產(chǎn)生完整且均質(zhì)的Fab和Fc片段。IgASAPSub1可水解分泌物和血清IgA1。消化在1小時(shí)內(nèi)完成,并且由于酶的特異性,如果孵育時(shí)間延長,則不存在過度消化的風(fēng)險(xiǎn)。該酶在pH值6.5至8.0下具有活性,不需要還原條件或輔助因子即可發(fā)揮活性?;钚允窃?7°C下,但也可以在室溫下使用增加孵育時(shí)間進(jìn)行消化。IgASAPSub1是從口腔鏈球菌克隆而來的,并在大腸桿菌中表達(dá)。該酶含有His標(biāo)簽,分子量為148kDa。IgASAPSub1凍干劑以凍干粉的形式提供,裝在1000個(gè)單位的小瓶中,用于消化1mgIgA1。

Genovis的FabRICATOR Fab2 (IdeS)試劑盒可消化兔 IgG,但要在親和步驟中捕獲 Fc 片段,您需要另一種填料,而不是試劑盒中通常包含的 CaptureSelect? Fc。如果您對(duì)處理兔IgG感興趣,請(qǐng)聯(lián)系Genovis團(tuán)隊(duì),我們將在FabRICATOR Fab2試劑盒中提供與兔Fc相容的樹脂色譜柱。使用FabRICATOR的抗體消化的簡(jiǎn)單性、速度和可重復(fù)性也意味著這種酶可以被用于質(zhì)量控制應(yīng)用。 QC方法需要執(zhí)行簡(jiǎn)單,易于訓(xùn)練,高度可重復(fù),數(shù)據(jù)易于分析,這正是您使用FabRICATOR所得到的。 因?yàn)樗m用于一系列不同的IgG,這也意味著使用FabRICATOR進(jìn)行QC工作的客戶將能夠在未來的產(chǎn)品中使用它。 這顯示了這種酶在抗體消化中是多么的有效。Genovis 酶產(chǎn)品,被世界各地的科學(xué)家使用,創(chuàng)新的產(chǎn)品形式促進(jìn)了生物藥物的開發(fā)和質(zhì)量控制。

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為什么客戶想在他們的工作試用Genovis的FabRICATOR(IdeS)。FabRICATOR的高特異性(在鉸鏈下方有單個(gè)消化位點(diǎn))以及它對(duì)IgG種和亞類表現(xiàn)出活性的事實(shí)使其成為高效表征一系列不同分子的理想工具。FabRICATOR的另一大優(yōu)勢(shì)是速度。在大多數(shù)IgG上,您可以在短短30分鐘內(nèi)生成F(ab’)2和Fc/2片段,這一速度簡(jiǎn)化了方法開發(fā),并允許快速有效的中層表征,使客戶能夠在不比做完整質(zhì)量實(shí)驗(yàn)長太多的時(shí)間內(nèi)獲得更多關(guān)于分子的信息。Genovis發(fā)現(xiàn)更多的緩沖液與溶液中的FabRICATOR消解相容(更多信息)。Genovis已經(jīng)測(cè)試了PBS和150mM醋酸銨,pH7,結(jié)果良好。并且應(yīng)該也適用于FabRICATORHPLC。然而,緩沖液的離子強(qiáng)度會(huì)影響抗體片段在FabRICATORHPLC(IdeS)色譜柱上的保留,并且IgG1亞基需要至少100-150mM鹽才能洗脫為單個(gè)窄峰。其他IgG亞類或融合蛋白可能需要對(duì)緩沖液組成進(jìn)行一些優(yōu)化。工藝開發(fā)和潛在生物制藥穩(wěn)定性研究相關(guān)的大量樣品。陜西FabDELLOIdeS蛋白酶

度拉糖肽的使用GlySERIAS酶切后,HPLC分析后,還鑒定了GLP-1肽的氧化。重慶FabULOUSIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

抗體的氧化是可能影響抗體功能的關(guān)鍵質(zhì)量屬性,需要密切定量和表征。它可能導(dǎo)致mAb的體內(nèi)半衰期、功效和穩(wěn)定性降低。Genovis的FabRICATOR(IdeS)消化產(chǎn)生的抗體亞基是研究抗體氧化的理想選擇。酶解的穩(wěn)健性允許在受監(jiān)管的環(huán)境中監(jiān)測(cè)抗體亞基氧化。Genovis的FabRICATOR(IdeS)是一種IgG特異性半胱氨酸蛋白酶,可消化鉸鏈下方單個(gè)氨基酸位點(diǎn)的抗體,產(chǎn)生均質(zhì)的F(ab')2和Fc片段。該酶用于基于抗體的療法(如mAb、ADC、生物類似藥和Fc融合蛋白)的表征、質(zhì)量控制、穩(wěn)定性測(cè)試、生產(chǎn)監(jiān)測(cè)和克隆選擇。高度特異性-鉸鏈下方的一個(gè)消化位點(diǎn)快速–在30分鐘內(nèi)生成均勻的片段池實(shí)現(xiàn)基于抗體的生物zhiliao藥物的表征和質(zhì)量控制可固定在即用型離心柱中重慶FabULOUSIdeS蛋白酶IgG特異性蛋白酶

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