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Genovis的SialEXO產(chǎn)品是用于去除和分析唾液酸的唾液酸酶。這些酶對(duì)天然糖蛋白或游離的聚糖結(jié)構(gòu)上存在的 N- 和 O-連接聚糖均具有活性。SialEXO用于在用OpeRATOR或OglyZOR消化之前預(yù)處理O-糖基化蛋白。其他應(yīng)用包括降低樣品復(fù)雜性、電荷異構(gòu)體分析和外切糖苷酶陣列。N-連接、O-連接和游離聚糖的高效去唾液酸化快速去除唾液酸,增強(qiáng)對(duì)蛋白質(zhì)電荷變體的分析可固定在即用型離心柱中。然后可以用FabRICATOR消化所得的去糖基化蛋白,并通過(guò)中級(jí)質(zhì)譜分析。我們將該工作流程應(yīng)用于依那西普的分析,雖然未經(jīng)處理的TNFR結(jié)構(gòu)域過(guò)于復(fù)雜而無(wú)法分析,但O-聚糖組成可以在用PNGase F處理后進(jìn)行分離和比較。固定形式可提高酶與底物的比率,快速去糖基化。廣東固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開(kāi)發(fā)
為了研究 OglyZOR 對(duì)天然糖蛋白的活性,將該酶與依那西普、TNFR 和阿巴西普在 37°C 下有或沒(méi)有 SialEXO 孵育 1 小時(shí)。當(dāng)唾液酸被去除時(shí),OglyZOR酶有效地水解了所有三種底物中的O-聚糖。Genovis的OglyZOR 酶可有效水解天然糖蛋白中的he心 1 二糖 (Gal-β1,3-GalNAc)。這使得這些酶適合在LC-MS分析之前制備樣品,以鑒定其他PTM或確認(rèn)氨基酸序列O-糖基化生物制藥的全去糖基化:O-糖基化生物制藥(如依那西普)很難表征。為了能夠通過(guò)質(zhì)譜法測(cè)定完整質(zhì)量數(shù),我們進(jìn)行了酶促總?cè)ヌ腔?。N-聚糖被Genovis的PNGase F裂解,而O-聚糖可以與OglyZOR和SialEXO一起去除。。甘肅固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶瑞典Genovis上海倍篤生物科技有限公司(簡(jiǎn)稱“倍篤生物”)代理Genovis的IdeS酶等。
GalNAcEXO固定化離心柱含有與瓊脂糖珠共價(jià)偶聯(lián)的GalNAcEXO酶,用于水解糖蛋白上的GalNAc殘基,而不會(huì)用酶污染制劑。Microspin 色譜柱可用于水解 5 或 10 x 0.5 mg 糖蛋白。1. 易于使用的離心柱;2. 提高酶與底物的比例,提高消化效率;3. 終樣品中不含酶。用于水解離心柱中糖蛋白上的Genovis的GalNAc殘基的固定化酶。GalNAcEXO 酶是一種n 外α-N-乙酰半乳糖氨酸酶,可快速有效地水解來(lái)自天然 O-糖蛋白的 z es GalNAc 殘基。 該酶來(lái)源于Akkermansia muciniphila,在大腸桿菌中表達(dá),帶有His標(biāo)簽,分子量為52 kDa。 該酶在 Tn 抗原和 α1-3 連接末端 GalNAcs 上均顯示活性。在這里,我們展示了如何使用GalNAcEXO來(lái)表征復(fù)雜的生物制藥。
該酶適用于在釋放的聚糖結(jié)構(gòu)上修剪半乳糖,用于外切糖苷酶陣列,或用于生成具有均相 G0/G0F 聚糖譜的抗體。1. 高效β-半乳糖苷酶混合物 – 快速去除末端 β1-3 和 β1-4-連接的半乳糖;2. 有助于在亞基水平上識(shí)別糖基化修飾;3. 可固定在即用型離心柱中。Genovis的GalactEXO是一種外切糖苷酶,含有β-半乳糖苷酶的混合物,可有效去除N-和O-糖基化蛋白或寡糖上的半乳糖殘基。該混合物由兩種半乳糖苷酶組成,可高效水解 β1-3 和 β1-4 連接的半乳糖酶。GalactEXO在天然條件下水解糖蛋白,并在5.5至7.5的寬pH值范圍內(nèi)顯示活性。GalactEXO由兩種半乳糖苷酶組成,均帶有His標(biāo)簽,組分的分子量為87 kDa和109 kDa。
與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR 含有固定化酶的混合物,可快速有效地去除抗體、融合蛋白和其他糖基化蛋白上的 N 和簡(jiǎn)單的粘蛋白型 O-聚糖。聚糖的去除被用于減少異質(zhì)性,以促進(jìn)蛋白質(zhì)的分析,例如質(zhì)譜法。去糖基化也可用于研究聚糖的功能作用。N-和粘蛋白型O-連接聚糖的快速高效去糖基化;即用型離心柱形式 - 無(wú)酶干擾分析;與LC-MS兼容。與PNGase F類似,Genvois的與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR 含有去除 N-糖和最常見(jiàn)的粘蛋白型 O-糖所需的酶,即單唾液酸和二唾液酸he心 1 和 Tn 抗原 (α-GalNAc)。OmniGLYZOR Microspin 小柱中包含以下組分:PNGase?F;O-糖苷酶。水解ɑ2-3-連接唾液酸的凍干酶SialEXO 2-3,裝在500個(gè)單位的小瓶中,用于0.5mg糖蛋白的去唾液酸化。江西用于自動(dòng)化系統(tǒng)的96孔板形式PNGaseF去糖基化酶疾病機(jī)理研究
用于LC-MS分析之前制備樣品,以鑒定其他PTM或確認(rèn)氨基酸序列。廣東固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開(kāi)發(fā)
在抗體藥物及核酸藥物領(lǐng)域,倍篤生物產(chǎn)品線涵蓋藥物研發(fā)的全流程,主要用——RNA轉(zhuǎn)染試劑、生物活性物質(zhì)純化分離用填料產(chǎn)品、ADC的payload抗體(如anti-DXD、anti-Eribulin、anti-MMAE等)、動(dòng)物造模用陽(yáng)性及陰性抗體、泊洛沙姆P 188 Bio、工藝雜質(zhì)及外源污染物殘留檢測(cè)產(chǎn)品、抗體結(jié)構(gòu)域分析蛋白酶、蛋白聚糖分析水解酶等,品牌有瑞典Genovis、德國(guó)BASF、美國(guó)QED、中國(guó)君研生物、中國(guó)金傳生物、中國(guó)毫厘科技、中國(guó)再帆生物等。這些國(guó)產(chǎn)品牌都具有國(guó)內(nèi)自研、自產(chǎn)能力,批次生產(chǎn)穩(wěn)定可靠、品質(zhì)可控,為行業(yè)發(fā)展提供更多國(guó)產(chǎn)選擇。廣東固定化小柱形式PNGaseF去糖基化酶生物藥物開(kāi)發(fā)