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北京PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

來源: 發(fā)布時間:2024-07-30

上海倍篤生物科技有限公司(簡稱“倍篤生物”),由中國科學(xué)院及生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)界人士,于2018年1月共同創(chuàng)立。公司代理多個品牌的儀器、試劑及耗材(如Genovis的IdeS酶),遵守相關(guān)法規(guī)要求,如cGMP規(guī)范、ISO13485質(zhì)量管理體系認(rèn)證等,致力于為診斷領(lǐng)域如分子診斷及病原微生物檢測研發(fā)等,藥物研發(fā)領(lǐng)域如細(xì)胞基因藥物、核酸藥物、抗體藥物、干細(xì)胞及外泌體研究等客戶提供合規(guī)、高質(zhì)量物料及專業(yè)服務(wù),以期與客戶共同協(xié)作,加快研發(fā)及生產(chǎn)進(jìn)度,為客戶提供更多價值。并且該酶還在 α1-3 連接的末端 GalNAcs 上顯示出活性。北京PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

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Genvois的SialEXO產(chǎn)品是唾液酸酶,用于N-和O-糖基化蛋白的有效去唾液酸化。SialEXO凍干由兩種唾液酸酶組成,每種唾液酸酶都具有獨(dú)特的活性,并且它們同時起作用。一種酶對α2-3、α2-6和α2-8連接的唾液酸具有很好的活性,另一種酶(SialEXO 2-3)通過α2-3-鍵快速水解唾液酸。SialEXO凍干可在2小時內(nèi)去除天然蛋白質(zhì)上的所有唾液酸。SialEXO在天然條件下水解糖蛋白,在pH值范圍為6.5至9時顯示出活性。這些酶來源于Akkermansia muciniphila,并在大腸桿菌中表達(dá)。兩種酶都含有 His 標(biāo)簽,酶的分子量為 43 kDa 和 66 kDa。 青海N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶蛋白質(zhì)組學(xué)研究OmniGLYZOR 含有固定化酶的混合物,可快速有效地去除抗體;

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Fc N-聚糖在抗體的效應(yīng)功能中起著至關(guān)重要的作用,但可能會增加蛋白質(zhì)表征測定的復(fù)雜性。在天然條件下用PNGase F去除Fc N-糖可以表征游離N-糖以及去糖基化抗體的功能和結(jié)構(gòu)。 為了證明PNGase F固定化和PNGase F凍干在天然反應(yīng)條件下有效去除Fc N-聚糖,對zhiliao性抗體曲妥珠單抗進(jìn)行了處理。圖2中的質(zhì)量數(shù)偏移表明,在37°C下用Genovis的PNGase F凍干或PNGase F固定化孵育1小時后,曲妥珠單抗上的Fc N-聚糖成功去除,與在溶液中用PNGase F凍干處理的樣品相比,沒有酶干擾用PNGase F固定處理的樣品的分析。

genovis分析依那西普和曲妥珠單抗游離聚糖:為了確認(rèn)依那西普和曲妥珠單抗中半乳糖損失的LC-MS數(shù)據(jù),進(jìn)行了釋放的N-聚糖分析。標(biāo)記的N-聚糖的分離清楚地表明了依那西普和曲妥珠單抗上半乳糖的丟失,如半乳糖基化聚糖物種的信號丟失所示。該酶是一種有價值的工具,可降低樣品異質(zhì)性,用于分析攜帶α連接的 GalNAc 殘基作為未成熟截短he心 1 的復(fù)雜 O-糖蛋白。1. 高效 α-N-乙酰半乳糖胺酶 – 快速、完全去除 Tn-抗原和 α1-3-連接的 GalNAc;2. 實(shí)現(xiàn)完全糖基去除,以改善蛋白質(zhì)表征;3. 可固定在即用型離心柱中。GalactEXO在天然條件下水解糖蛋白,并在5.5至7.5的寬pH值范圍內(nèi)顯示活性。

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與PNGase F類似,Genvois的OmniGLYZOR用于攜帶N-和簡單O-糖的糖蛋白的去糖基化。 OmniGLYZOR 試劑盒包括:OmniGlyZOR 微離心柱;PNGase F 凍干;RapiGest?* SF表面活性劑。除非底物蛋白變性,否則某些 N-糖基化位點(diǎn)很難或無法被 PNGase F 接近。在OmniGLYZOR Microspin柱上孵育后剩余的N-糖可以在變性條件下使用試劑盒中包含的PNGase F凍干和RapiGest? SF表面活性劑通過額外的去糖基化步驟去除。使用Genovis的OpeRAT對EPO進(jìn)行O-糖位點(diǎn)特異性消化:對于jin攜帶一個或幾個 O-糖基化位點(diǎn)的簡單底物蛋白,OpeRATOR 也可用于繪制中間水平的 O-糖基化位點(diǎn)。 曲妥珠單抗中半乳糖損失的LC-MS數(shù)據(jù),進(jìn)行了釋放的N-聚糖分析。N-聚糖水解酶PNGaseF去糖基化酶糖生物學(xué)研究

用于水解天然 N-和 O-糖基化蛋白或游離寡糖上的α1-2、α1-3和α1-4-連接巖藻糖殘基。北京PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

生成攜帶 O-糖的糖肽,該酶可實(shí)現(xiàn) O-糖譜分析、O-糖肽圖譜和位點(diǎn)占用測定,以及使用 MS 分析的中級方法。1.可靠O-聚糖特異性蛋白酶 – 消化絲氨酸/蘇氨酸糖基化位點(diǎn)的 N 末端;2.穩(wěn)健的消化,增強(qiáng)復(fù)雜生物制藥的表征;3.高特異性 - 可靠的聚糖位點(diǎn)測定和定位。Genovis的OpeRATOR 是一種 O-聚糖特異性蛋白酶,可消化攜帶he心1 O-聚糖的蛋白質(zhì),糖基化(he心 1)Ser 和 Thr 殘基的 N 端。OpeRATOR 來源于 Akkermansia muciniphila,并以 E 表達(dá)。大腸桿菌。該酶含有 His 標(biāo)簽,分子量為 42 kDa。SialEXO 來源于 Akkermansia muciniphila,并以 E 表達(dá)。大腸桿菌。SialEXO Lyophilized 中的酶也含有 His 標(biāo)簽,這些組分的分子量分別為 43 kDa 和 66 kDa。用于消化粘蛋白型O-糖蛋白和肽的凍干酶。Genovis的OpeRATOR 凍干劑以凍干粉末的形式提供,裝在 2000 個單位的小瓶中,用于消化 2 mg O-糖基化蛋白。北京PNGaseF去糖基化酶生物藥物開發(fā)

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