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安徽離心管生產(chǎn)公司

來源: 發(fā)布時間:2024-05-31

超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標分子量選擇適當?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標分子量的一半。因為超濾膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計,可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。超濾離心管可用于分離細胞培養(yǎng)上清中的蛋白質(zhì)和小分子物質(zhì)。安徽離心管生產(chǎn)公司

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當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。江蘇3K超濾離心管廠家電話使用超濾離心管時,應(yīng)注意控制轉(zhuǎn)速,以避免過度旋轉(zhuǎn)導致超濾膜損壞或溢出樣品。

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選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質(zhì)的耐受程度有所不同。新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。平衡。質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預(yù)冷至4度)。

離心管就是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。 蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,目前較常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定??芍貜褪褂茫褂靡淮尉腿拥籼速M。以下是個人總結(jié)的使用方法和注意事項。離心超濾管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理。超濾離心管的選擇主要看你要截留那部分物質(zhì),就選擇比較小分子量小的,如果你要截留26KD的,你要的超濾管就要比26小。但兩者也要有一定的差距,比如,選擇20-25KD之間的就不合適,因為26的也可能會出去(這是由制造工藝決定的)。所以選擇20KD以下的超濾管比較合適。超濾離心管可以有效地去除溶液中的雜質(zhì),使樣品更純凈。

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超濾離心管可以滅菌嗎?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌,否則會變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應(yīng)當干燥保存,買回來的時候就是干的。當然也可以濕潤保存,但是應(yīng)當保存在20%的乙醇中,是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜。4. 有人說濕潤保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會有一個類似于內(nèi)管和外管的兩個部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。超濾離心管是現(xiàn)代實驗室必不可少的設(shè)備之一,為科研工作者提供了便利和支持。蘇州3K超濾離心管價位

超濾離心管是一種經(jīng)濟、有效且環(huán)保的分離技術(shù),具有普遍應(yīng)用前景。安徽離心管生產(chǎn)公司

超濾管產(chǎn)品系列包括5種不同的截留分子量(即標稱分子量限值, NMWL)。這些超濾管只供研究使用,不適用于診斷程序。1).濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(DNA/RNA樣本,單鏈或雙鏈)、噬菌體等微生物樣本。2).純化組織培養(yǎng)提取液或細胞裂解液中的大分子成分,去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標記,在HPLC前去除蛋白質(zhì)。3).除鹽,緩沖液更換,或滲濾。超濾管提供了兩個微量離心管。在操作過程中,一個用于收集濾出液,而另一個用于回收濃縮后的樣本。超濾管的超濾膜含有微量甘油。如果擔心干擾后續(xù)分析,可用緩沖液或Milli-Q水進行預(yù)清洗。如果干擾仍然存在,可用0.1M NaOH清洗,再用緩沖液或Milli-Q8水清洗并甩干。安徽離心管生產(chǎn)公司

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