SDS-EDTA 染料混合液(2.5×) 簡介: SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)是一種以溴酚藍為染料的 2.5 倍濃縮的蛋白上樣緩沖液, 主要由 SDS、溴酚藍、EDTA、蔗糖等組成,可用于蛋白上樣。 組成: 編號 名稱 PE0010 5ml Storage SDS-EDTA 染料混合液(2.5×) 使用說明書 4℃ 1份 操作步驟(光供參考): 1、 取適量的蛋白樣品和 SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)混合,充分混勻。 2、 直接上樣到 SDS-PAGE 膠加樣孔內即可。 3、 通常電泳至藍色染料到達 PAGE 膠的底部附近即可停止。 注意事項: 1、 SDS-EDTA 染料混合液(2.5×)中不含β-巰基乙醇。 2、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 有效期: 12 個月有效。亦可室溫短期保存。標準物質在方法確認中的主要作用是評估方法的正確度(偏差)及其測量不確定性。亞精胺溶液(1mol/L)
篩選:篩選之前:由于每種細胞對G418的敏感性不同,而且不同的廠家生產的相同濃度的G418的活性不盡相同,所以在篩選之前,一定要確定G418的適合篩選濃度。具體如下:將細胞稀釋到1000個細胞/mL,在100ug/mL~1mg/mL的G418濃度范圍內進行篩選,選擇出在10~14天內使細胞全部死亡的低G418濃度來進行下一步的篩選試驗。由于每種細胞對G418的敏感性不同,一般變動在100ug/ml~1000ug/ml范圍。而且不同的廠家生產的相同濃度的G418的活性不盡相同,所以在篩選之前,一定要確定細胞對這一批G418的適合篩選濃度。盡管如此,特性明確的細胞系G418的適合用量還是穩(wěn)定的?!斗肿涌寺 方o出了幾個常用細胞系所需G418的適合用量。溴甲酚綠-甲基橙指示劑固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中,液體試劑則盛在細口瓶中。
PH緩沖液:正常人血漿的pH值為7.35~7.45。血漿PH值的相對恒定性有賴于血液內的緩沖物質以及正常的肺、腎功能。血漿的緩沖物質包括NaHCO3/H2CO3、蛋白質鈉鹽/蛋白質和Na2HPO4/NaH2PO4三個主要的緩沖對,其中以NaHCO3/H2CO3較為重要。紅細胞內還有血紅蛋白鉀鹽/血紅蛋白、氧合血紅蛋白鉀鹽/氧合血紅蛋白、K2HPO4/KH2PO4、KHCO3/H2CO3等緩沖對參與維持血漿PH值的恒定。當酸性或堿性物質進入血液時,血漿中的緩沖物質可有效的減輕酸或堿性物質對血漿PH值的影響,特別是肺和腎保持正常的排出體內過多的酸或堿的功能的情況下,血漿PH值的波動范圍極小。
液體固體試劑正確取用試劑的方法過程:固體試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中,液體試劑則盛在細口瓶中(或滴瓶中),見光易分解的試劑(如硝酸銀)應裝在棕色瓶中,每一種試劑都貼有標簽以表明試劑的名稱、濃度、純度。(實驗室分裝時,固體只標明試劑名稱,液體還須注名明濃度)。固體粉末試劑可用潔凈的牛角勺取用。要取一定量的固體時,可把固體放在紙上或表面皿上在臺秤上稱量。要準確稱量時,則用稱量瓶在天平上進行稱量。液體試劑常用量筒量取,量筒的容量為:5mL、10mL、50mL、500mL等數(shù)種,使用時要把量取的液體注入量筒中,使視線與量筒內液體凹面的低處保持水平,然后讀出量筒上的刻度,即得液體的體積。科研實驗中試劑取用應注意事項:視線與量筒內液體的凹液面的低處保持水平。
外用液體試劑系指藥物與適宜的溶劑或分散介質制成的,通過動物體表給藥以產生局部或全身性作用的溶液、混懸液或乳狀液及供臨用前稀釋的高濃度液體試劑,一般有涂劑、澆潑劑、滴劑等。涂劑系指藥物與適宜溶劑、透皮促進劑制成的涂于動物特定部位,通過皮膚吸收而達到治理目的的液體試劑。 二、澆潑劑 系指藥物與適宜溶劑制成的澆潑于動物體表的澄清液體試劑。澆潑劑易于在皮膚上分散和吸收,使用量通常在5ml以上,使用時沿動物的背中線進行澆潑。pH緩沖溶液有何用途:在一般精度測量時檢pH計是否需要重新標定。檸檬酸—檸檬酸鈉緩沖液(1mol/L,pH3.0-6.6)
固體試劑的取用:直接傾倒時瓶口必須緊挨試管口,試管45度,并且緩緩地倒。亞精胺溶液(1mol/L)
G418又稱遺傳霉素,新霉素,對細菌、酵母、高等植物、原生生物、哺乳動物細胞具有氨基苷類毒性,對真核細胞進行篩選。G418(G418,G 418,G-418,Geneticin)是一種氨基糖苷類 ,這種氨基糖類的結構和新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似,在分子遺傳試驗中,是穩(wěn)定轉染常用的抗性篩選試劑。它通過克制轉座子Tn601,Tn5的基因,干擾核糖體功能而阻斷蛋白質合成,對原核和真核等細胞產生東西,包括細菌、酵母、植物和哺乳動物細胞 ,也包括原生動物和蠕蟲。當neo基因被整合進真核細胞DNA后 ,則能啟動neo基因編碼的序列轉錄為mRNA ,從而獲得抗性產物氨基糖苷磷酸轉移酶的表達 ,使細胞獲得抗性而能在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長。G418的這一選擇特性 ,已在基因轉移、基因敲除、抗性篩選以及轉基因動物等方面得以普遍應用。亞精胺溶液(1mol/L)