LISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析的三個(gè)小建議:實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔，然后計(jì)算每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值，復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。平均OD值減去空白孔的OD值。制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。 以減去本底后的OD值為X軸，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸，利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來作圖，比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法（比如直線、半對數(shù)、對數(shù)、四參數(shù)方程等）并從中選擇一條合適的方程。要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合，可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù)，將對應(yīng)的OD值帶入該方程，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度，得到的結(jié)果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近（+/-10%）。選擇擬合度高的那條曲線。利福平不能經(jīng)血液透析或腹膜透析除去。乙酸鈉溶液(3mol/L,pH5.0,無菌)

我們在檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)中，有時(shí)會遇到樣品濃度挨近檢測試劑盒的靈敏度就容易發(fā)生樣本OD450值低于空白值的現(xiàn)象，特別是在血清和血漿樣本中。這就有可能是基質(zhì)效應(yīng)導(dǎo)致的結(jié)果。首先我們要知道什么是基質(zhì)，基質(zhì)是指樣品中目標(biāo)分析物以外的部分。由于基質(zhì)成分會對分析過程有明顯干擾，影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。業(yè)內(nèi)把這些影響統(tǒng)稱為基質(zhì)效應(yīng)。這是檢測試劑盒開發(fā)和使用中需要避開的雷。如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢？當(dāng)單個(gè)樣本或少量樣本值低于空白值時(shí)，可能是實(shí)驗(yàn)操作出現(xiàn)問題，這時(shí)應(yīng)增加重復(fù)，進(jìn)步操作技術(shù)。當(dāng)許多樣本都低于空白值時(shí)，應(yīng)思考基質(zhì)效應(yīng)的影響，建立校正曲線予以修改?；|(zhì)效應(yīng)的原因錯(cuò)綜復(fù)雜，有可能是樣品中存在的基質(zhì)導(dǎo)致原抗體的聯(lián)絡(luò)結(jié)合能力下降，便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。導(dǎo)致樣本值無法計(jì)算出數(shù)值，或許數(shù)值為負(fù)。免疫染色一抗稀釋液注意ELISA檢測試劑盒保存期，過保存期的試劑不能使用。

氨芐青霉素為白色晶體或粉末，分子式是C16H19N3O4S,分子量為349.41。溶于稀酸和稀堿，微溶于水和甲醇，幾乎不溶于氯仿、96%乙醇、、乙酸乙酯和固定油。無臭，味苦。抗革蘭氏陽性及陰性菌，用于分子生物學(xué)和組織培養(yǎng)（防止微生物污染和抗性篩選）。氨芐青霉素時(shí)常被用于分子生物學(xué)上，作為細(xì)菌（如大腸桿菌）吸收基因（如質(zhì)粒）的測試。測試會將一組基因，連同已編碼抗氨芐青霉素的基因插入細(xì)菌中。該細(xì)菌會被放于充滿氨芐青霉素的環(huán)境下培育，直至成功制造卞所需的基因。

校準(zhǔn)液標(biāo)示值往往是按其基質(zhì)偏差修正的，所以標(biāo)示值并非實(shí)際值。校準(zhǔn)液、質(zhì)控血清通常是經(jīng)過處理的混合人或動(dòng)物血清，這種制備物在特定分析系統(tǒng)中往往與人新鮮血清反應(yīng)性不同而產(chǎn)生基質(zhì)偏差。如總膽固醇測定基質(zhì)效應(yīng)研究指出：校準(zhǔn)液酶法測定回收結(jié)果偏低可達(dá)5%~7%。甘油三酯測定，有人主張選用雙試劑方法消除內(nèi)源性甘油，這個(gè)方法是可行的，但忽視了一個(gè)化學(xué)平衡理論。因?yàn)樗械孽ピ谒芤褐卸疾皇呛唵蔚匾怎サ男问酱嬖?，而是以水解與酯化相平衡的形式存在。在一個(gè)平衡體系中，如果去除游離甘油，這個(gè)平衡就向生成甘油方向移動(dòng)，甘油三酯就會重新水解，生成新的甘油，達(dá)到新的平衡，因此樣品與R1試劑孵育時(shí)間越長，測得甘油三酯值就越低。甘油三酯測定，不只要去除游離甘油，而且還要克服樣本含量真實(shí)性發(fā)生的變化，試劑中必須加入甘油激酶，并且延遲時(shí)間要標(biāo)準(zhǔn)化。所以，一些試驗(yàn)項(xiàng)目在消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾的同時(shí)，會帶來樣品含量真實(shí)性的變化。檢測試劑盒變質(zhì)的原因：樣本因素。

檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)加樣要求：有此測定（如間接法檢測試劑盒）需用稀釋的血清，可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液，再在其中參加血清標(biāo)本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以確?；旌汀＜用附Y(jié)合物使用液和底物使用液時(shí)可用定量多道加液器，在檢測試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反響的完結(jié)需求有必定的溫度和時(shí)刻，這一保溫進(jìn)程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在檢測試劑盒中似不恰當(dāng)。按檢測試劑盒說明書的要求預(yù)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。檢測試劑盒頂用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗刷的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液使用pH計(jì)測量較正。從冰箱中取出的實(shí)驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次實(shí)驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。固體試劑的取用:貼標(biāo)簽的一面必須朝向手心處【防止藥液灑出腐蝕標(biāo)簽】。鈣鹽染色液(茜素紅S法)

科研實(shí)驗(yàn)中試劑取用應(yīng)注意事項(xiàng)：應(yīng)在容器的正上方垂直滴入；膠頭滴管不要接觸容器壁。乙酸鈉溶液(3mol/L,pH5.0,無菌)

怎樣減少檢測試劑盒誤差？嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間，反應(yīng)時(shí)間過長，酶失活；反應(yīng)時(shí)間過短，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合，生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假陰性。注意檢測試劑盒保存期，過保存期的試劑不能使用。評估試劑的實(shí)用性，試劑的穩(wěn)定與否，對準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應(yīng)進(jìn)行陰、陽對照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn)，判定試劑符合要求后方可使用。嚴(yán)格掌握顯色時(shí)間，顯色時(shí)間過短，加入終止液反應(yīng)終止后，底物結(jié)合物的量過少，易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時(shí)間后顯色，應(yīng)判為假陽性，這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色，不可報(bào)陽性，這可能是本底顯色的結(jié)果。乙酸鈉溶液(3mol/L,pH5.0,無菌)