外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的無(wú)菌處理 已經(jīng)經(jīng)過(guò)上述方法制備的外泌體在進(jìn)行細(xì)胞或動(dòng)物實(shí)驗(yàn)之前還需進(jìn)行一步除菌過(guò)濾，這個(gè)時(shí)候考慮到得率，應(yīng)該采用離心法處理，以減少過(guò)濾時(shí)的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對(duì)樣品進(jìn)行澄清[目錄號(hào)SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號(hào)UFC901024,10 kDa MWCO) ，4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進(jìn)行緩沖液置換，溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *一個(gè)好的超濾濃縮管代理銷(xiāo)售需要具備哪些特點(diǎn)您知道嗎？徐匯區(qū)默克超濾濃縮管代理商

Amicon? Ultra 4 mL 超濾管 -離心速度快而保持很高的回收率 4 種不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon? Ultra 4mL 超濾管中濃縮（3kDa 細(xì)胞色素 C， 10kDa 細(xì)胞色素 C，30kDa BSA，100kDa IgG）， 測(cè)定在離心一定時(shí)間后的回收率。數(shù)據(jù)顯 示所有樣品在離心 15 分鐘左右回收率均 >95%。 為了方便初次使用者選擇**合適的超 濾管產(chǎn)品，默克密理博生命科學(xué)部網(wǎng) 站上提供選擇指引，您需要按照提 示進(jìn)行選擇，**終會(huì)選出一款產(chǎn)品。 為每次實(shí)驗(yàn)選擇**合適的， 您也能快速成為超濾高手！青浦區(qū)默克15ml超濾濃縮管訂購(gòu)你知道上海超濾濃縮管代理銷(xiāo)售哪家比較好嗎？

蛋白復(fù)性，溫和透析 D-Tube? 透析管 如果樣品很敏感而難以處理，采用溫和的透析方法可以避免其在過(guò)度濃縮時(shí)發(fā)生沉淀和離心操作剪切力對(duì)樣品的損害。。D-Tube?是雙膜設(shè)計(jì)的透析管，**提高了樣品透析表面積，在2-5小時(shí)內(nèi)即可完成透析，是非常溫和而高效的緩沖液置換工具。D-Tube? 透析管的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)： 樣品回收率> 89% ? 膜和管壁皆為低吸附性材質(zhì)，增加樣品回收率可靠而易用 ? 不會(huì)像使用夾子或打結(jié)那樣造成樣品滲漏和污染，安全可靠 旋蓋式設(shè)計(jì)，易于打開(kāi)和關(guān)緊 硬管設(shè)計(jì)，易于更充分地吸取、移走樣品，即使是μL級(jí)樣品加樣方便，功能多樣 ? 采用標(biāo)準(zhǔn)***頭加樣，而非注射器和針頭加樣，減少膜破損的風(fēng)險(xiǎn)提供的浮漂適合在常見(jiàn)的廣口燒杯中使用，方便在透析過(guò)程中換液D-Tube? 透析管還可以用于從瓊脂糖或丙烯酰凝膠電洗脫樣品

蛋白親和純化（無(wú)需換液和濃縮） * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管～1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法，但溶液體積和離心時(shí)間等需要略加優(yōu)化。 3次低速離心，總耗時(shí)~75分鐘（含60分鐘孵育時(shí)間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入至多1000μL親和純化樹(shù)脂（沉降的柱床體積）和至多9 mL漂洗緩沖液。1,000×g離心1 min平衡樹(shù)脂。（柱床）樹(shù)脂量≥ 500μL時(shí)采用2,000×g離心4 min。 2. 加入至多9 mL樣品并與樹(shù)脂吸打混勻。孵育1 h*，其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。超濾濃縮管的各種系列應(yīng)用領(lǐng)域還是不一樣的。

7次低速離心，總耗時(shí)~100分鐘（含60分鐘孵育時(shí)間） 1. 在Amicon? Pro上樣池中加入200μL親和純化樹(shù)脂（50%懸濁液）和1.5 mL漂洗緩沖液。 1,000×g離心1 min。 2. 加入0.5 mL樣品并與樹(shù)脂吸打混勻。孵育1 h，其間可溫和攪動(dòng)促進(jìn)結(jié)合。 3. 1,000×g離心1 min 以去除未結(jié)合雜質(zhì)。 4. 加入1.5 mL漂洗緩沖液，1,000×g離心1 min。 5. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（可選用50k MWCO型號(hào)）。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹(shù)脂混勻。4,000×g離心5 min。 7. 加入200μL 中和緩沖液。4,000×g離心15 min。 8. 加上**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min，置換緩沖液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。超濾濃縮管的優(yōu)勢(shì)您了解多少呢？閔行區(qū)默克超濾濃縮管

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外泌小體（Exosome）是一種囊泡結(jié)構(gòu)，直徑通常在30-150nm，常見(jiàn)于正常體液和病理樣本，培養(yǎng)細(xì)胞也可分泌。研究人員已經(jīng)在血液、唾液、尿液、母乳等中發(fā)現(xiàn)外泌小體，其運(yùn)載的蛋白和核酸涉及其細(xì)胞間物資、信息交流，影響和調(diào)控著多方面的生理功能，包括**的發(fā)生、免疫促進(jìn)、凋亡調(diào)控、血管的生成、炎癥的反應(yīng)及發(fā)育和分化等。由于在體液中出現(xiàn)，外泌小體對(duì)于臨床生物標(biāo)志物檢測(cè)來(lái)說(shuō)特別有利，成為體外診斷、biomarker研究的新熱點(diǎn)。徐匯區(qū)默克超濾濃縮管代理商