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來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-15

內(nèi)生菌共生于植物內(nèi)部,要獲得內(nèi)生菌首先需要破碎植物組織。植物組織和內(nèi)生菌在形態(tài)、硬度等性質(zhì)上均有差異,想要獲得更多內(nèi)生菌基因組DNA,對(duì)裂解介質(zhì)的選擇是難點(diǎn)。2、相對(duì)于植物基因組,雖然內(nèi)生菌包括細(xì)菌,***,放線菌等不同類型微生物,但其基因組*占微小部分單獨(dú)提取內(nèi)生菌DNA比較困難,提取到的是混合DNA,通過PCR才能鑒定。內(nèi)生菌DNA提取思路:STEP1破壞植物釋放菌體;STEP2破壞菌體釋放核酸;STEP3提取DNA。有沒有合適的質(zhì)量有保障的土壤DNA提取在哪里買您知道嗎?金山區(qū)土壤DNA土壤DNA提取報(bào)價(jià)

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實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,有沒有遇到過實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合預(yù)期的情況,提取DNA的純度過低、濃度達(dá)不到預(yù)期或者是出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。***給大家聊一聊一下其他同學(xué)遇到的問題,以及MP技術(shù)人員給出的解決方案,希望可以幫到大家,在以后的實(shí)驗(yàn)中順順利利~問題1:土壤樣品含水量過高怎么辦?解決思路:· 如果土壤樣品過濕,可先將樣本10,000 x g,離心30s,盡可能多的去除液體。問題2:DNA產(chǎn)量低怎么辦?解決思路:· 樣本微生物含量低:【1】增加樣本量【2】土壤基因組DNA提取土壤DNA提取咨詢報(bào)價(jià)土壤DNA提取哪家正規(guī)可靠?

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游實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品特點(diǎn):1、適用于不同類型土壤及其他環(huán)境樣品。2、不受腐殖質(zhì)干擾。3、30min-60min內(nèi)即可獲得高產(chǎn)量的DNA。4、DNA純度高,并直接用于下游實(shí)驗(yàn)。5、不含有毒有害的試劑成分。案例研究:材料準(zhǔn)備:1.西紅柿栽盆2.淤泥3.沙土4.松樹下5.棕櫚樹下6.花園7.尼羅河百合花栽盆8.草坪9.檸檬樹下10.鱷梨樹。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:500mg樣本經(jīng)過試劑盒提取的總DNA在1.2%瓊脂糖凝膠電泳(0.5×TAE)。通過瓊脂糖凝膠圖中我們可以看出,不論是哪種

PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個(gè)循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實(shí)施例3 以玻璃纖維膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有玻璃纖維的離心柱中,土壤DNA提取的占地面積小嗎?

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8000rpm離心1分鐘,上清DNA溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個(gè)循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實(shí)施例2 以硅膠膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有硅膠膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)金山區(qū)土壤DNA土壤DNA提取報(bào)價(jià)

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