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楊浦區(qū)土壤微生物DNA土壤DNA提取規(guī)格

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-16

PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個(gè)循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實(shí)施例3 以玻璃纖維膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有玻璃纖維的離心柱中,上海益啟生物土壤DNA提取訂購(gòu)方便。楊浦區(qū)土壤微生物DNA土壤DNA提取規(guī)格

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取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有石英膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;靜安區(qū)土壤微生物土壤DNA提取哪家好土壤DNA提取哪家正規(guī)可靠?

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與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明技術(shù)克服了樣品土壤來源的二氧化硅對(duì)DNA的吸附,從而減少了不必要的DNA損失,可達(dá)到獲取高質(zhì)量、高產(chǎn)量土壤尿液DNA目的。 附圖說明 圖1是本發(fā)明實(shí)施例1中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 圖2是本發(fā)明實(shí)施例2中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 圖3是本發(fā)明實(shí)施例3中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 圖4是本發(fā)明實(shí)施例4中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 具體實(shí)施方式 下面將結(jié)合本發(fā)明的附圖,對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。

游實(shí)驗(yàn)。產(chǎn)品特點(diǎn):1、適用于不同類型土壤及其他環(huán)境樣品。2、不受腐殖質(zhì)干擾。3、30min-60min內(nèi)即可獲得高產(chǎn)量的DNA。4、DNA純度高,并直接用于下游實(shí)驗(yàn)。5、不含有毒有害的試劑成分。案例研究:材料準(zhǔn)備:1.西紅柿栽盆2.淤泥3.沙土4.松樹下5.棕櫚樹下6.花園7.尼羅河百合花栽盆8.草坪9.檸檬樹下10.鱷梨樹。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:500mg樣本經(jīng)過試劑盒提取的總DNA在1.2%瓊脂糖凝膠電泳(0.5×TAE)。通過瓊脂糖凝膠圖中我們可以看出,不論是哪種上海益啟生物土壤DNA提取的銷售電話。

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(c)漂洗液,所述漂洗液為70-80%乙醇; (d)洗脫液,其組分為:10 mmol/L Tris-HCl,0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二鈉,pH 8.0; (e)硅基DNA吸附材料,所述硅基DNA吸附材料為二氧化硅納米顆粒、硅膠膜、玻璃纖維膜、石英膜、二氧化硅包裹的磁性納米顆粒中的任意一種。 使用本發(fā)明的試劑盒,用以提取土壤尿液DNA的方法,包括以下步驟: 1)DNA提取 用土壤裂解液和蛋白酶K裂解含有尿液的土壤樣品,離心分離土壤和上清液,上清液加入結(jié)合液,混合后加入硅基DNA吸附材料,分離硅基DNA吸附材料和液體,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫DNA;具體包括以下步驟: a.刮取含有尿液的表層土壤,烘干,質(zhì)量有保障的土壤DNA提取在哪里買您知道嗎?靜安區(qū)土壤微生物土壤DNA提取哪家好

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.53+0.03;1.09+0.03、1.51+0.05;1.37士0.03、1.43+0.03;0.81+0.02。提取不同土壤基因組DNA結(jié)果,有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土上樣3μL其余土壤上樣8μL;M: 1kb plus DNA ladder,Lane 1-4:自動(dòng)化提?。籐ane5-8:手工提?。籐ane 1&5: 100mg有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土;Lane 2&6: 100mg花壇土;Lane 3&7: 250mg鹽堿土;Lane 4&8: 250mg沙漠土。提取不同類型土壤DNA進(jìn)行PCR及酶切結(jié)果。M: 1kb plus DNA ladder;Lane 1:有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土;Lane 2:花壇土;Lane 3:鹽堿土;Lane 4楊浦區(qū)土壤微生物DNA土壤DNA提取規(guī)格

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