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來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-10-19

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所述pH緩沖劑為Tris-HCl、Tris-醋酸、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4、醋酸-醋酸鈉、檸檬酸-檸檬酸鈉,所述pH緩沖劑的pH值為7.0-11,推薦的pH緩沖劑為Tris-HCl,推薦的pH緩沖劑的pH值為7.5-8.5; (b)結(jié)合液,其組成成分包括表面活性劑、離液鹽、pH緩沖劑; 所述表面活性劑為:聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN 20、TWEEN 40、TWEEN 60、TWEEN 80、NP 40中的一種或兩種及以上的混合,所述表面活性劑的質(zhì)量濃度為1-100g/L; 所述離液鹽為異硫氰酸胍、鹽酸胍、硫氰酸鉀、高氯酸鈉、碘化鉀、碘化鈉中的一種或兩種及以上的混合,所述離液鹽的濃度為3-5 mol/L; 所述pH緩沖劑為Tris-HCl、Tris-醋酸、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4、醋酸-醋酸鈉、檸檬酸-檸檬酸鈉,所述pH緩沖劑的pH值為4.5-7.0;

調(diào)節(jié)樣本的含水量等因素來優(yōu)化裂解條件·裂解不充分:增加物理破碎的時(shí)間和次數(shù)?!z查洗滌液中是否加入乙醇?!は疵摬怀浞郑航ㄗh二次洗脫增加產(chǎn)量或提高洗脫體積。問題3:提取的DNA無法擴(kuò)增怎么辦?解決思路:· 檢測(cè)DNA的濃度:過量的DNA模板也會(huì)抑制PCR反應(yīng)?!颖綝NA稀釋之后可以擴(kuò)增:樣本中的腐殖酸等抑制物含量高。·確定PCR反應(yīng)條件是否已優(yōu)化:退火溫度,時(shí)間,引物等等?!し翘禺悧l帶:洗脫液中目的DNA的豐度可能比較低上海益啟品牌土壤DNA提取規(guī)格。

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實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,有沒有遇到過實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合預(yù)期的情況,提取DNA的純度過低、濃度達(dá)不到預(yù)期或者是出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。***給大家聊一聊一下其他同學(xué)遇到的問題,以及MP技術(shù)人員給出的解決方案,希望可以幫到大家,在以后的實(shí)驗(yàn)中順順利利~問題1:土壤樣品含水量過高怎么辦?解決思路:· 如果土壤樣品過濕,可先將樣本10,000 x g,離心30s,盡可能多的去除液體。問題2:DNA產(chǎn)量低怎么辦?解決思路:· 樣本微生物含量低:【1】增加樣本量【2】浦東新區(qū)土壤DNA提取試劑盒土壤DNA提取代理價(jià)

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