蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的**終濃度不超過 20mg/ml。對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白，建議的改進(jìn)方法是： 1）離心力降為推薦離心力的30%-50% 2）改用截留分子量更大的超濾管（如原本選用10k，此時(shí)可以選擇30k） 3）在濃縮過程中取出超濾管，用***頭反復(fù)吹吸幾次后再繼續(xù)濃縮 Amicon? Ultra超濾膜中含有微量甘油。如果出現(xiàn)這種情況，請(qǐng)先用0.1 N NaOH清洗再離心。***用緩沖液或Milli-Q?水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應(yīng)立即使用，如暫時(shí)不用，請(qǐng)保持潤(rùn)濕狀態(tài)，避免重新干燥。對(duì)于不同的需求我們選擇不同的超濾濃縮管系列。寶山區(qū)默克4ml超濾濃縮管聯(lián)系方式

經(jīng)典離心濃縮裝置 Amicon? Ultra 離心超濾管 反轉(zhuǎn)離心回收 ?反轉(zhuǎn)離心回收設(shè)計(jì)使蛋白樣品，特別是小體積樣品高效 回收，避免***頭吸取造成的樣品丟失或操作錯(cuò)誤 ?0.5mL、2mL 和 70mL 超濾管設(shè)計(jì)為反轉(zhuǎn)回收模式 樣品吸附損失小 ?Ultracel? 超濾膜為密理博超濾產(chǎn)品特有的設(shè) 計(jì)，非特異吸附比較低，減少樣品的吸附損失 ?膜和聚丙烯管都是低吸附材質(zhì)，保證> 90% 回收率 ?豎膜切向流設(shè)計(jì)，不像橫膜那樣容易堵，樣品 損失少 ?濃縮速度超快，**少需 10 分鐘虹口區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管聯(lián)系方式上海超濾濃縮管代理銷售電話多少？

截留 截留有時(shí)也稱為排阻。水合程度、離子和空間位置效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致分子量相近 的分子表現(xiàn)非常不同的截留狀態(tài)。許多生物大分子在不同的 pH 或離子強(qiáng) 度改變的情況下傾向于聚集或改變構(gòu)象，因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多，從而導(dǎo)致排阻增加。比如，有些蛋白質(zhì)在某些緩沖液條件下 會(huì)發(fā)生多聚化，而另一些則發(fā)生解聚（如血紅素蛋白）成亞基。這使選擇 合適截留分子量的膜變得復(fù)雜。以默克密理博的經(jīng)驗(yàn)，我們通常推薦選擇 為目的分子大小一半的膜作為嘗試的優(yōu)先，再根據(jù)實(shí)際情況加以調(diào)整。

外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體：300μg樣品（相當(dāng)于300μg總蛋白）用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋，與protein A/G磁珠共孵育1hr，漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上（以避免抗體洗脫下來對(duì)外泌體的干擾），請(qǐng)參考默克磁珠操作說明書。（Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3)）。推薦使用試劑目錄號(hào)信息：cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn)，相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心，用實(shí)驗(yàn)室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題，真是惠而不費(fèi)，不亦樂乎？益啟生物公司主營超濾濃縮管銷售。

提供的超濾管是沒有經(jīng)過去內(nèi)***處理的，同時(shí)由于內(nèi)***通常以多聚體的形式存在，大小 在10-1000KD之間不等，在超濾的過程中是無法去除的?？稍趯?shí)驗(yàn)前通過先用0.5M NaOH預(yù)清洗，隨后用Milli-Q?水/緩沖液清洗的步驟去除大部分內(nèi)***。關(guān)于針對(duì)Amicon?,Microcon? , Centricon?嘗試過的內(nèi)***去除方案。 Amicon? Ultra超濾管使用的是再生纖維素膜，這種材質(zhì)是蛋白吸附比較低的超濾膜。但是對(duì)于一些疏水性蛋白或非極性蛋白，它們和膜的非特異吸附可能會(huì)增強(qiáng)，對(duì)于這種情況，可以嘗試在實(shí)驗(yàn)前對(duì)超濾管進(jìn)行封閉處理。也可以嘗試換成Amicon? Ultra 0.5或2來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，通過減小膜面積來降低非特異性吸附。上海Millipore超濾濃縮管授權(quán)代理商！徐匯區(qū)Merck離心濃縮管聯(lián)系人

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脫鹽/緩沖液置換并濃縮 5次低速離心，總耗時(shí)~35分鐘 1. 在上樣池中加入0.5 mL TBS-T預(yù)濕Amicon? Pro。1,000×g離心1 min。 2. 優(yōu)化選做：加入1.5 mL用于置換的緩沖液，1,000×g離心1 min。 3. 上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管（有5種截留分子量規(guī)格可選）。 4. 加入1.5 mL樣品，4,000×g離心15 min進(jìn)行濃縮。 5. 加入1.5 mL需要置換的緩沖液，4,000×g離心15 min，換液的同時(shí)進(jìn)行濃縮。 6. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管，1,000×g離心回收處理好的蛋白。 * 進(jìn)行較大體積操作時(shí)，可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間，也可參考Amicon? Pro完整操作說明書 查看詳細(xì)信息。寶山區(qū)默克4ml超濾濃縮管聯(lián)系方式