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來源: 發(fā)布時間:2025-05-28

94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例5 以二氧化硅包裹的磁性納米顆粒提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有15 ul二氧化硅包裹的磁性納米顆粒的離心管中,混勻后靜止15分鐘;上磁力架吸附2分鐘,吸棄上清液;加入500 ul漂洗液,混勻,上磁力架吸附1分鐘,吸棄上清;上海益啟生物土壤DNA提取訂購方便。浦東新區(qū)土壤DNA土壤DNA提取訂購

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與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明技術(shù)克服了樣品土壤來源的二氧化硅對DNA的吸附,從而減少了不必要的DNA損失,可達(dá)到獲取高質(zhì)量、高產(chǎn)量土壤尿液DNA目的。 附圖說明 圖1是本發(fā)明實施例1中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 圖2是本發(fā)明實施例2中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 圖3是本發(fā)明實施例3中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 圖4是本發(fā)明實施例4中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 具體實施方式 下面將結(jié)合本發(fā)明的附圖,對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。寶山區(qū)土壤DNA提取聯(lián)系人在上海益啟生物買土壤DNA提取可以退貨嗎?

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調(diào)節(jié)樣本的含水量等因素來優(yōu)化裂解條件·裂解不充分:增加物理破碎的時間和次數(shù)。·檢查洗滌液中是否加入乙醇。·洗脫不充分:建議二次洗脫增加產(chǎn)量或提高洗脫體積。問題3:提取的DNA無法擴(kuò)增怎么辦?解決思路:· 檢測DNA的濃度:過量的DNA模板也會抑制PCR反應(yīng)?!颖綝NA稀釋之后可以擴(kuò)增:樣本中的腐殖酸等抑制物含量高。·確定PCR反應(yīng)條件是否已優(yōu)化:退火溫度,時間,引物等等。·非特異條帶:洗脫液中目的DNA的豐度可能比較低

解決方案應(yīng)對以上難點?MP Biomedicals:MP有三款試劑盒可供選擇。產(chǎn)品:提取方式、裂解介質(zhì)、樣本類型、樣本硬度、去雜提純、操作耗時。FastDNA Spin Kit:玻璃奶法、介質(zhì)A、植物樣本、艱難樣本、高效提純、需一定時間。需一定時間:柱膜法、介質(zhì)E、微生物樣本、較軟樣本、高效提純、省時簡便。FastDNA Spin Kit for Soil:玻璃奶法、介質(zhì)E、微生物樣本、較軟樣本、高效提純、需一定時間。解決方案:解決方案1:當(dāng)作植物樣本看待,選擇Fas上海益啟生物土壤DNA提取的銷售電話。

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12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,土壤DNA提取品牌零售代理商家。浙江土壤DNA提取試劑盒土壤DNA提取規(guī)格

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取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘; b.最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻; c.將上一步的混合液轉(zhuǎn)移至硅基DNA吸附材料,分離液體和硅基DNA吸附材料; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料; e.用洗脫液洗脫硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR擴(kuò)增及電泳 將上步純化的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,在電泳儀中檢測DNA。 本發(fā)明具有以下有益效果: 本發(fā)明的土壤尿液DNA提取試劑盒及方法,配制好土壤裂解液、結(jié)合液、漂洗液、洗脫液,利用特殊成分的土壤裂解液,在加入結(jié)合液之前,樣品土壤來源的二氧化硅不與DNA結(jié)合,離心分離固體顆粒和溶解了DNA的上清液,上清液中加入結(jié)合液,混合后轉(zhuǎn)入含有硅基DNA吸附材料中,分離液體和硅基DNA吸附材料,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫獲得純化DNA;浦東新區(qū)土壤DNA土壤DNA提取訂購

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