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P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印跡框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗體量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗滌緩沖液*量每孔4x 15 mL每個(gè)4x 30 mL每個(gè)4x 30 mL●Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,補(bǔ)充有0.1%Tweene 20表面活性劑在計(jì)算免疫檢測(cè)所需的抗體量時(shí),三個(gè)要素對(duì)于成功檢測(cè)出蛋白質(zhì)并獲得了高質(zhì)量的印跡(低背景,高信號(hào)):●樣品類型和凝膠上樣濃度●一級(jí)和二級(jí)抗體濃度●檢測(cè)試劑的種類和靈敏度下表中的所有抗體均使用LuminataTM Forte化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑進(jìn)行了測(cè)試。對(duì)于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng),抗體濃度高于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)中的濃度,但濃度較低體積。 表3.標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)中一抗稀釋的實(shí)例 SNAPi.d.?2.0免疫檢采購(gòu)正規(guī)細(xì)胞計(jì)數(shù)器哪家靠譜?嘉定區(qū)Merck超濾杯Merck儀器
2.0系統(tǒng)計(jì)算SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)所需的抗體濃度用于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)的濃度標(biāo)準(zhǔn)SNAP i.d.o 2.0免疫檢測(cè)免疫檢測(cè)多印跡迷你印跡Midi污點(diǎn)_Ab濃度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗體量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗體量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比較終抗體稀釋1:30,0001:10,0001:10,0001:10,000使用的抗體庫(kù)存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每種抗體都是只有一個(gè)的,并且檢測(cè)試劑的靈敏度各不相同,因此可能有必要進(jìn)行調(diào)整抗體或抗原濃度,使用的檢測(cè)試劑的類型或靈敏度或印跡X射線曝光時(shí)間。請(qǐng)注意,本指南只作為開發(fā)比較終抗體的起點(diǎn)濃度以獲得所需的性能。表2.封閉,抗體和洗滌的建議體積SNAP i.d.o 2.0SNA上海Merck超濾杯Merck儀器代理商質(zhì)量有保障的超濾杯在哪里買您知道嗎?
A板。在“手動(dòng)模式”選項(xiàng)卡上(圖7),單擊“運(yùn)行液體灌注”序列按鈕?;蛘撸凇皡f(xié)議編輯器”選項(xiàng)卡上(圖8)輸入所需的步驟和條件。建議的壓力1-5組井的流動(dòng)時(shí)間為34.5kPa(5psi)和5分鐘,分別。注意:對(duì)于傾向于黏附或聚集的細(xì)胞,請(qǐng)充分灌注第8組以及第1-5井組將使細(xì)胞在細(xì)胞中附著于通道的發(fā)生率裝貨有關(guān)創(chuàng)建協(xié)議的更多信息,請(qǐng)參考CelIASICD圖5.CellASICONIX2微流體系統(tǒng)的生產(chǎn)線《ONIX2MicrofluidicSystem用戶指南》。使用空氣壓力實(shí)現(xiàn)流量控制,使每一個(gè)中的液體都充滿單元加載出色地。板上的多個(gè)孔被組合在一起,并通過使用CelASICDONIX2微流體系統(tǒng)的壓力驅(qū)動(dòng)方法通過油路的單個(gè)氣動(dòng)管線每套油井被稱為“油井”。groupA真空管線用于將板密封到萬用板
白的免疫檢測(cè):SNAP i.d.“ 2.0系統(tǒng)與SNAP 1.d.系統(tǒng)(首先代)與標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)一種。 SNAPi.d。 2.0蛋白質(zhì)檢測(cè)b。快照蛋白質(zhì)檢測(cè)。標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)Midi印跡系統(tǒng)首先代,單孔免疫檢測(cè)對(duì)照,茴香霉素處理和PDGF處理的3T3小鼠成纖維細(xì)胞裂解液(10-0.63 ug)被轉(zhuǎn)移到Immobilon9-P膜上。印跡被阻止含0.5%的非脂肪干mik(NFDM),并在加筋的鹽水中制備含0. 1%Tweene 20表面活性劑(TBST),并用主要抗B-Tubulin探測(cè)(MAB3408)和次級(jí)HRP偶聯(lián)的山羊螞蟻(AP1 24P)在上述條件。將印跡暴露于X射線膠片一分鐘。圖2. erbB2的免疫檢測(cè):SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)與SNAP i.d.系統(tǒng)(首先代)與標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)s。 S細(xì)胞跨膜電阻儀品牌零售代理商家。
有關(guān)詳細(xì)信息,請(qǐng)參見表2?!癫唤ㄗh在SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)中剝離印跡。印跡已被剝離可以從阻塞步驟開始在SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)中對(duì)遵循標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議的系統(tǒng)進(jìn)行重新探測(cè)?!袢绻恍枰?jiǎng)冸x(例如,如果使用其他二抗進(jìn)行檢測(cè)),則可以重新檢測(cè)印跡快速清洗后,立即在SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)中使用。 優(yōu)化準(zhǔn)則抗體已經(jīng)開發(fā)了優(yōu)化指南,以使用戶能夠轉(zhuǎn)換所用抗體的濃度將標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)測(cè)定法濃縮至適用于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)的濃度。大多數(shù)用戶會(huì)能夠使用相同量的抗體,但與標(biāo)準(zhǔn)品相比,體積更小,濃度更高免疫檢測(cè)。但是,當(dāng)使用擴(kuò)展抗體方案(第12頁)時(shí),可以使用相同的方法通常用于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測(cè)的一抗的濃度,體積和時(shí)間,其次是較高濃度的二抗,持續(xù)時(shí)間較短。表1.如何根據(jù)SNAP i.d.9上海益啟生物樣本制備儀訂購(gòu)方便。楊浦區(qū)Merck微流控細(xì)胞芯片分析儀Merck儀器商家
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