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美國ICSI紡錘體卵冷凍研究

來源: 發(fā)布時間:2025-05-19

無需染色紡錘體觀察技術(shù)已逐步應(yīng)用于臨床輔助生殖技術(shù)中。通過該技術(shù),醫(yī)生可以在不破壞卵母細(xì)胞活性的情況下,評估其質(zhì)量并選擇合適的卵母細(xì)胞進(jìn)行受精和胚胎移植,從而提高妊娠率和胚胎質(zhì)量。無需對卵母細(xì)胞進(jìn)行固定和染色處理,保留了細(xì)胞的活性與完整性。能夠?qū)崟r監(jiān)測冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化,評估冷凍效果。能夠?qū)崟r監(jiān)測冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化,評估冷凍效果。Polscope偏振光顯微成像系統(tǒng)的操作和維護(hù)需要較高的專業(yè)知識和技能。紡錘體的形態(tài)變化復(fù)雜多樣,需要豐富的經(jīng)驗和專業(yè)知識進(jìn)行數(shù)據(jù)解讀和結(jié)果分析。紡錘體的微管在細(xì)胞分裂過程中起著橋梁和牽引的作用。美國ICSI紡錘體卵冷凍研究

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紡錘體成像技術(shù)的中心在于提高成像的分辨率和速度,以捕捉紡錘體的精細(xì)結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化。以下是幾種主要的紡錘體成像技術(shù)的技術(shù)原理:結(jié)構(gòu)光照明顯微鏡(SIM):SIM通過引入已知的空間調(diào)制光場,使樣品發(fā)出具有特定空間頻率的熒光信號。通過采集多個不同空間頻率的熒光圖像,并利用算法進(jìn)行重建,SIM可以實現(xiàn)超越傳統(tǒng)熒光顯微鏡分辨率的成像。這種方法不僅提高了成像的分辨率,還保持了較快的成像速度和較好的細(xì)胞活性。受激輻射損耗顯微鏡(STED):STED利用一束聚焦的激光束(稱為STED束)來抑制樣品中特定區(qū)域的熒光信號。通過精確控制STED束的位置和強(qiáng)度,STED可以實現(xiàn)超越衍射極限的成像分辨率。這種方法特別適用于觀測紡錘體等復(fù)雜結(jié)構(gòu)中的精細(xì)細(xì)節(jié)。單分子定位顯微鏡(SMLM):SMLM通過檢測樣品中單個熒光分子的位置來實現(xiàn)高分辨率成像。由于熒光分子的隨機(jī)閃爍特性,SMLM可以在時間域上分離不同分子的熒光信號,從而實現(xiàn)對單個分子的精確定位。這種方法不僅提高了成像的分辨率,還提供了對紡錘體中單個微管和蛋白質(zhì)分子的動態(tài)變化的觀測能力。武漢輔助生殖紡錘體Oosight Meta紡錘體在細(xì)胞分裂后期通過收縮力推動染色體分離。

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Oosight影像分析系統(tǒng)采用液晶偏光成像技術(shù),無需對卵母細(xì)胞進(jìn)行染色,即可實時、清晰、高對比度地進(jìn)行紡錘體結(jié)構(gòu)和透明帶成像,對ICSI、核移植操作、卵母細(xì)胞質(zhì)量評價等有很好的輔助作用。主要應(yīng)用ICSI:在單精胞漿注射過程中定位初級卵母細(xì)胞,避免卵的破裂損傷,增強(qiáng)胚胎的發(fā)育潛能。卵評估:利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進(jìn)行分級,改善對胚胎的選擇。體外成熟評估:在未成熟卵催化(IVM)過程判斷成熟期,判斷依據(jù)采用的是準(zhǔn)確的識別紡錘體,而非不準(zhǔn)確的極體。質(zhì)量控制:利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進(jìn)行分級,改善對胚胎的選擇。核移植:顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質(zhì),使得核移植的成功率增加了80%,并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究:對冷凍的初級卵母細(xì)胞進(jìn)行解凍前和解凍后的定量分析,從而判斷卵的發(fā)育力,改善妊娠率。紡錘體研究:檢測胚胎中紡錘體的發(fā)育過程,確定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培養(yǎng)箱的顯微鏡)??梢詫θ旧w非正常的或非整倍體的胚胎成像,從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究:測量卵母細(xì)胞的透明帶;準(zhǔn)確測量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化,判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態(tài)

盡管成熟卵母細(xì)胞紡錘體冷凍保存技術(shù)取得了進(jìn)展,但仍面臨一些挑戰(zhàn)。首先,冷凍損傷仍然是制約其臨床應(yīng)用的主要問題之一。盡管玻璃化冷凍法能夠在一定程度上減少冷凍損傷,但仍無法完全避免。其次,冷凍保存后的卵母細(xì)胞在體外受精和胚胎發(fā)育過程中的表現(xiàn)仍存在不確定性。這可能與冷凍過程中紡錘體和染色體的損傷有關(guān),也可能與冷凍保護(hù)劑的殘留毒性有關(guān)。此外,法律倫理問題也是卵母細(xì)胞冷凍保存技術(shù)面臨的一大挑戰(zhàn)。不同國家和地區(qū)對卵母細(xì)胞冷凍保存的法律和倫理規(guī)定各不相同,這在一定程度上限制了該技術(shù)的普及和應(yīng)用。紡錘體的中心體在細(xì)胞分裂前會復(fù)制并分離到細(xì)胞兩極。

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紡錘體是如何形成的(1)紡錘體是動植物細(xì)胞分裂期形成的與染色體正常分離直接相關(guān)的分裂器,紡錘體的裝配在有絲分裂的前期完成。動物細(xì)胞紡錘體由星體微管、極間微管、動粒微管及其結(jié)合蛋白構(gòu)成,因含有星體微管故稱有星紡錘體。無中心體的動物細(xì)胞和植物細(xì)胞也能形成紡錘體,因不含有星體微管而稱之為無星紡錘體。微管是由α、β微管蛋白異源二聚體及少量微管結(jié)合蛋白聚合而成的亞穩(wěn)定動態(tài)結(jié)構(gòu)。動物細(xì)胞的中心體由一對相互垂直的圓筒狀中心粒及中心體基質(zhì)構(gòu)成。它是紡錘體微管向外生長的**,又稱微管組織中心。在有絲分裂前間期的S期初期,中心體開始復(fù)制倍增,在G2期結(jié)束時完成。在細(xì)胞分裂期前期,間期復(fù)制倍增的兩個中心體分離,每一個中心體形成放射狀排列的微管,稱為星體,每個中心體是它自身星體的**。在有絲分裂細(xì)胞周期的分裂期,微管通過持續(xù)增加和丟失組成微管的微管蛋白亞基來實現(xiàn)微管的聚合和解聚,微管始終處于生長和縮短的更替中。在分裂前期,紡錘體微管由游離的微管蛋白組裝而成,介導(dǎo)染色體的運(yùn)動;分裂末期,紡錘體微管解聚,又組裝形成細(xì)胞質(zhì)微管網(wǎng)絡(luò)。紡錘體微管包括動粒微管、極間微管和星體微管.紡錘體在細(xì)胞分裂中的精確調(diào)控是生物體發(fā)育的基礎(chǔ)。北京雙折射性紡錘體加熱臺

紡錘體的研究有助于揭示細(xì)胞分裂過程中的錯誤修復(fù)機(jī)制。美國ICSI紡錘體卵冷凍研究

紡錘體觀測儀在補(bǔ)救ICSI中的應(yīng)用我們知道,成熟的卵母細(xì)胞排出***極體。IVF加入精子后,精子會穿透層層障礙**終進(jìn)入卵子,隨著時間的推移,卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極,進(jìn)而排出第二極體,再往后大約加精后9-16小時,雌雄原核會出現(xiàn),而原核的出現(xiàn)才是受精的標(biāo)志。但是對于那些沒有受精的卵子,到了原核出現(xiàn)的時間窗,發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補(bǔ)救ICSI,往往錯過了卵子的比較好受精時間,因為沒有受精的卵子會在體外老化,即使受精,胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以,我們在加精后的4-6小時,通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精,**的增加了那些受精障礙患者的受精率,也避免了卵子的老化。當(dāng)然,偶爾也會出現(xiàn)錯誤補(bǔ)救。文獻(xiàn)報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行ICSI補(bǔ)救,實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目,82.7%含有一個紡錘體,17.3%含有兩個紡錘體,并對含有一個紡錘體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI;而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體,只對未排出第二極體的卵母細(xì)胞進(jìn)行補(bǔ)救ICSI。結(jié)果發(fā)現(xiàn),使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,降低多原核受精比率。美國ICSI紡錘體卵冷凍研究

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