二、生化及免疫學檢驗：5、精漿肉堿測定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L?！九R床意義】精漿肉堿測定精漿中的肉堿主要由附睪分泌，其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種，附睪中含高濃度的肉堿，主要與精子在附睪成熟時所需的能量來源有關?，F認為精漿肉堿含量和果糖含量的變化，常反映附睪、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常，表明附睪、精囊功能正常。當肉堿含量高于正常的50%，而果糖含量降低，則提示精囊功能障礙，附睪功能正常；精漿肉堿約為正常含量的50%左右，果糖含量正常，說明附睪功能障礙，精囊功能正常；而肉堿急劇下降，果糖含量亦減少，表示精囊、附睪功能均發(fā)生障礙。6、抗精子抗體(AsAb)測定【正常參考值】陰性?！九R床意義】AsAb檢測對不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb，可抑制精子的活動，干擾精子的運行，阻礙精子穿透及精卵結合，使受精發(fā)生障礙。即使已經受精，也可能影響發(fā)育中的胚胎，造成免疫性流產。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%，當精子輸出管道受阻、睪丸損傷、炎癥、附睪等生殖系***時，系精子外逸而產生的自身抗體。在精子研發(fā)的歷程中，計算機輔助精子檢測經歷了黑白圖像機、彩色圖像檢測。目前先進的是熒光精子圖像檢測。馬精子分析W.H.O 5

精子分析儀工作原理以灰度識別CASA為例，采用高分辨率的攝影技術與顯微鏡結合，**標本液化后吸入計數，通過顯微鏡放大后，用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動、靜態(tài)圖像后輸入計算機。根據設定的精子大小和灰度、精子運動移位及運動參數，對采集圖像進行精子密度、活動力、活動率、運動特征等幾十項檢驗項目動態(tài)分析，由計算機處理后，打印出“**分析檢查報告以及精子動態(tài)特征分布圖”。一次能對1000個精子進行動態(tài)檢測分析，2-3分鐘即可完成檢測[1]。優(yōu)點：操作簡便，用量少，檢測速度快，重復性優(yōu)于人工檢測，并且能夠快速、準確的測定精子密度、活力、精子分級等，還可提供精子運動狀態(tài)的多種參數等。缺點：影響分析結果的因素較多，除**本身性質所含的固有誤差外，不同的精子計數池的相對準確性和精確性可產生明顯不一致的效果。密度精子分析BCFHamilton Thorne精子分析儀具有高度的可靠性和穩(wěn)定性，能夠長時間穩(wěn)定運行，保證數據的準確性和可重復性。

世界衛(wèi)生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》于1980年***出版，以滿足臨床與科研對人類精液標準化檢測程序日益增長的需求。該手冊是人類精液實驗室檢查和處理程序及方法的標準操作指南，旨在提高精液分析的質量和提高不同實驗室結果的可比性。在過去40年里，該手冊進行了4次修訂與補充(1987年、1992年、1999年和2010年)，內容涉及精液檢查的標準化操作程序、精子功能、精漿生化、精液處理與冷凍以及質量保證等，已成為國際公認的標準，被世界各地臨床和實驗室***使用。中國衛(wèi)生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術規(guī)范。WHO《人類精液檢查與處理實驗室手冊(第5版)》精液參考值的數據是來自全球3大洲8個國家的前瞻性、多中心臨床研究的結果，通過循證醫(yī)學研究獲得的精液參數參考值具有里程碑式意義。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一，即使在**近幾年其下載量也在穩(wěn)步增長。它是男科實驗室及全球范圍內開展精液分析操作的其他實驗室、醫(yī)院和研究機構使用的標準操作手冊。該手冊在國際大會、科學會議、以及WHO合作中心、專業(yè)學會和其他學術機構的培訓項目中進行了***傳播。截止到2021年，已被3000余篇同行評議論文和評論引用。

采集精液前5～7天內必須停止性生活，并且不得有**、夢遺等情況，還應禁煙戒酒，忌服對生精功能有影響的藥物等。采取精液時間以晨起為佳，采精前用溫水將雙手、**，尤其是**洗凈?？刹捎?*法或電動按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序，開頭部分來自前列腺、附睪及壺腹，伴有大量精子，***部分來自精囊，故應收集整份精液，不要遺漏任何部分，尤其是開頭部分。正因為易丟失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應干凈、無菌、干燥，采精前容器的溫度應與室溫相同；瓶子不應過大，但瓶口不應過小，以免將精液射出瓶外；還應貼上標簽，記錄姓名及取精時間。在冷天應將精液標本保溫，放置在貼身內衣袋中，不可傾斜或倒置，盡可能在1小時內送到實驗室。選擇合適的CASA檢測原理和設備，確保幀率要求，避免因設備問題影響檢測結果?。

精液顯微鏡檢查(1)精子存活率：排精后30～60分鐘，正常精子存活率應為80%～90%，精子存活率降低是導致不育的重要原因。(2)精子活動力：指精子活動狀態(tài)，也是指活動精子的質量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動力分為4級：①精子活動好，運動迅速，活潑有力，直線向前運動；②精子活動較好，運動速度尚可，游動方向不定，呈直線或非直線運動，帶有回旋；③精子運動不良，運動遲緩，原地打轉或抖動，向前運動能力差；④死精子，精子完全不活動。正常精子活動力應在③級以上，若＞40%的精子活動不良(③、④)級，常是導致男性不育的重要原因。精子活動力低，主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***，應用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。CASA系統(tǒng)主要用于精子動力學的分析，可以評估精子的濃度、活力等參數。廣州前向運動精子分析重復性高

精子分析儀參數，精子頭側擺幅度（ALH）?：精子頭關于其平均路徑的側向位移幅度。馬精子分析W.H.O 5

精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號、廠家差異不盡相同，操作人員上崗前必須經過嚴格培訓，了解工作原理、操作規(guī)程、校正方法等，使用前必須仔細閱讀說明書。一般儀器都會經歷如下操作步驟[1]：開機接通電源，打開計算機輔助**分析系統(tǒng)。1.輸入患者信息及**理學檢查結果。2.加樣取液化的**1滴，滴入精子計數板的計數池中，置顯微鏡操作平臺上，點擊“活動顯示”菜單，調節(jié)好顯微鏡焦距，顯示器上即可顯示待測標本的精子運動圖像。3.分析點擊“計算分析”菜單，系統(tǒng)進入自動分析狀態(tài)，圖像顯示區(qū)出現精子分割圖像并進行分析。4.打印報告分析結束后，可根據需要打印出分析結果。馬精子分析W.H.O 5