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安徽正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

來源: 發(fā)布時間:2025-08-01

以及酶或熒光偶聯(lián)二抗,檢測單細(xì)胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測,后者通過熒光顯微鏡檢測。優(yōu)點是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。體內(nèi)外均可進(jìn)行標(biāo)記,且可同時使用其他標(biāo)記進(jìn)行檢測,操作安全簡便。適用于貼壁或懸浮細(xì)胞,冰凍或福爾馬林包埋組織切片。EdU與BrdU檢測法不同,EdU-Click檢測,如EdU-Click594(BCK-EDU594)無需進(jìn)行DNA變性來檢測摻入的EdU,而是通過一次快速、高度特異性的點擊反應(yīng),將EdU高效地?fù)饺氲叫潞铣傻腄NA之中,通過EdU與不同熒光染料的特異性反應(yīng)檢測DNA復(fù)制活性,從而確地反映細(xì)胞的增殖情況。這一類細(xì)胞增殖用熒光標(biāo)記采用溫和的點擊實驗方案,準(zhǔn)確且兼容各種抗體實驗方案,整個實驗可在30分鐘內(nèi)完成,在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面,堪比多重分析方法。上海哪家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒值得信賴?安徽正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

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細(xì)胞增殖是評價細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團(tuán)在天然化合物中很少見,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。安徽正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的價格。

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為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地擴(kuò)展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測儀器要求,完全解決您的實驗難題。EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點,更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進(jìn)行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。

上海東寰生物科技有限公司即核苷滲入法。以前常用的核苷滲入法是BrdU(胸腺嘧啶核苷酸類似物)法,但BrdU法的缺點是需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)的破壞,影響了其他染料的結(jié)合染色,導(dǎo)致染色彌散,準(zhǔn)確性降低等問題。EdU法作為新型的核苷滲入法具有以下優(yōu)點:安全—–不使用[3H]thymidine,無放射性污染。簡單—–基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,需三步:EdU孵育;細(xì)胞固定;熒光檢測。無需DNA變性和孵育抗體。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒可以去哪里購買?

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熒光試劑請避光保存。反應(yīng)緩沖液10X1ml催化劑溶液25x400ulTAMRA紅色熒光溶液400x25ul緩沖添加劑粉末200mgHoechstX20ul使用前須知該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。實驗步驟(以24孔板,HK2貼壁細(xì)胞為例)EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸。有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒?河南正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

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可通過CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(發(fā)光法)進(jìn)行細(xì)胞群落中DNA合成測定(BrdUbased)。優(yōu)點是:實驗結(jié)果同增殖細(xì)胞數(shù)目緊密相關(guān),可一步完成細(xì)胞的溫和固定和變性,操作方便穩(wěn)定,不破壞細(xì)胞形態(tài)。5-Bromo-2′-dULabeling/DetectionKitI(熒光法)或KitII(AP)可使用試劑盒提供的BrdU單抗,以及酶或熒光偶聯(lián)二抗,檢測單細(xì)胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測,后者通過熒光顯微鏡檢測。優(yōu)點是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。安徽正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

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