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嘉定區(qū)土壤微生物土壤DNA提取參數(shù)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-06-01

所述pH緩沖劑為T(mén)ris-HCl、Tris-醋酸、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4、醋酸-醋酸鈉、檸檬酸-檸檬酸鈉,所述pH緩沖劑的pH值為7.0-11,推薦的pH緩沖劑為T(mén)ris-HCl,推薦的pH緩沖劑的pH值為7.5-8.5; (b)結(jié)合液,其組成成分包括表面活性劑、離液鹽、pH緩沖劑; 所述表面活性劑為:聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN 20、TWEEN 40、TWEEN 60、TWEEN 80、NP 40中的一種或兩種及以上的混合,所述表面活性劑的質(zhì)量濃度為1-100g/L; 所述離液鹽為異硫氰酸胍、鹽酸胍、硫氰酸鉀、高氯酸鈉、碘化鉀、碘化鈉中的一種或兩種及以上的混合,所述離液鹽的濃度為3-5 mol/L; 所述pH緩沖劑為T(mén)ris-HCl、Tris-醋酸、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4、醋酸-醋酸鈉、檸檬酸-檸檬酸鈉,所述pH緩沖劑的pH值為4.5-7.0;上海益啟生物公司的土壤DNA提取附帶使用說(shuō)明書(shū)嗎?嘉定區(qū)土壤微生物土壤DNA提取參數(shù)

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PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個(gè)循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實(shí)施例3 以玻璃纖維膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有玻璃纖維的離心柱中,黃浦區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取高質(zhì)量的土壤DNA提取,保證您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

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取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有石英膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;

入RAase消化。問(wèn)題7:A260/A230比值低怎么辦?解決思路:·A230是多肽、芳香基團(tuán)、苯酚和一些碳?xì)浠衔锏奈舛?,A230高表示樣品中存在一些污染物?!?】蛋白去除不干凈:增加蛋白沉淀離心的次數(shù)?!?】雜質(zhì)去除不干凈:洗脫之前,核酸吸附柱中盡可能不要?dú)埩粢后w,可增加空離心次數(shù)和時(shí)間。問(wèn)題8:提取的DNA出現(xiàn)降解怎么辦?解決思路:·優(yōu)化裂解條件,避免過(guò)度裂解,降低物理破碎的力度·操作過(guò)程中是否有污染DAase,造成DNA降解質(zhì)量有保障的土壤DNA提取在哪里買您知道嗎?

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取純度。絕招四:***的硅膠柱膜及配套耗材,能特異性高效吸附核酸,比較大限度截留DNA分子,且柱容積大,可以減少結(jié)合時(shí)離心的次數(shù)。四大絕招傍身,各種類型土壤的樣本統(tǒng)統(tǒng)搞定,再讓我們看看TA在江湖上的表現(xiàn)吧。2.好不好用,數(shù)據(jù)來(lái)說(shuō)話。1.提取不同類型土壤基因組DNA收率及純度結(jié)果。含高腐殖酸有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土、水稻土、花壇土、鹽堿土、沙漠土等土壤樣本,DNA提取收率及純度結(jié)果如下表:Sample Type:Organic soil、Paddy soil、Flower上海益啟生物的土壤DNA提取詢價(jià)公司電話。金山區(qū)土壤DNA提取銷售

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內(nèi)生菌共生于植物內(nèi)部,要獲得內(nèi)生菌首先需要破碎植物組織。植物組織和內(nèi)生菌在形態(tài)、硬度等性質(zhì)上均有差異,想要獲得更多內(nèi)生菌基因組DNA,對(duì)裂解介質(zhì)的選擇是難點(diǎn)。2、相對(duì)于植物基因組,雖然內(nèi)生菌包括細(xì)菌,***,放線菌等不同類型微生物,但其基因組*占微小部分單獨(dú)提取內(nèi)生菌DNA比較困難,提取到的是混合DNA,通過(guò)PCR才能鑒定。內(nèi)生菌DNA提取思路:STEP1破壞植物釋放菌體;STEP2破壞菌體釋放核酸;STEP3提取DNA。有沒(méi)有合適的嘉定區(qū)土壤微生物土壤DNA提取參數(shù)

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